2024年华东师大版选修3生物下册阶段测试试卷

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A.靶基因部分序列与sgRNA通过碱基互补配对原则进行配对B.核酸内切酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键C.被编辑后的B基因与编辑前的B基因互称为非等位基因D.通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因的功能2、下列相关叙述正确的是（）A.某植物经X射线处理后若未出现新的性状，则没有新基因产生B.在基因工程中只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达C.生物的变异不一定会引起基因频率的改变D.基因频率是指种群基因库中，等位基因占全部基因数目的比例3、下列关于人类遗传病的叙述正确的是（）A.禁止近亲结婚能够预防隐性遗传病的发生B.研究单基因遗传病的发病率需在患者家系中随机抽样调查C.通过基因诊断确定胎儿不携带致病基因，则该胎儿不会患遗传病D.先天性心脏病是多基因遗传病，是否患病与基因有关，与环境无关4、下图是首例体细胞克隆猴“中中”的相关示意图，下列叙述不正确的是（）

A.上图中的卵子（b）需要培养到MⅡ时期，再通过显微操作去除细胞核B.重组细胞（c）可通过物理或化学方法完成核激活，使其完成分裂和发育C.不考虑突变，中中（e）的各种性状与提供细胞（a）的个体完全相同D.此项技术可以克隆出特定疾病模型的动物，为进一步研究提供实验材料5、下列有关动物胚胎移植的叙述错误的是A.常用桑椹胚或囊胚进行胚胎移植B.受体母畜必须处于与供体母畜同期发情的状态C.超数排卵技术要使用一定的激素D.由该技术培育而成的动物遗传物质全部来自一个亲本6、辽河流域是辽宁省重要的生态屏障和经济地带。为恢复辽河某段“水体——河岸带”的生物群落；研究人员选择辽河流域常见的植物进行栽种。植物种类；分布及叶片或茎的横切面见下图。下列有关叙述错误的是（）

注：右侧为对应植物叶片或茎的横切面示意图，空白处示气腔A.丙与丁的分布体现了群落的水平结构B.四种植物都有发达的气腔，利于根系的呼吸，体现出生物对环境的适应C.不同位置上植物种类的选择，增强了它们之间的竞争程度D.生态恢复工程使该生态系统的营养结构更复杂，抵抗力稳定性增强评卷人得分二、填空题(共8题，共16分)7、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______8、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。9、基因治疗：基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。10、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。11、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。12、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。13、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。14、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分三、判断题(共5题，共10分)15、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误16、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误17、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误18、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误19、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分四、非选择题(共4题，共8分)20、菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花；培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答下列问题：

(注：卡那霉素抗性基因KanR为标记基因；菊花叶片对卡那霉素高度敏感）

（1）质粒是基因工程中最常用的载体；其化学本质是___________。

（2）限制酶M和N切割后产生的相同黏性末端是_________；连接它们所需要的基本工具是_________。

（3）为了促进对重组质粒的吸收；可用________处理土壤农杆菌；使其处于感受态。

（4）将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素；营养物质以及_______的固体培养基中；在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。

（5）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时；需根据抗虫基因（目的基因）两端的部分碱基序列设计特异引物，若其中一种引物共用了31个，则目的基因最多扩增了_______次。

（6）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫；实验结果如表所示。请据表回答：

。组别。

处理。

菊天牛死亡率（％)

实验组。

饲喂转基因菊花植株的嫩茎及叶片与人工饲料混合物。

53.33

对照组。

13.33

①对照组应饲喂_____________与人工饲料混合物。

②实验结果显示_____________差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。21、口蹄疫是口蹄疫病毒引起的一种动物性传染病；目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄生产口蹄疫疫苗。请回答下列问题：

⑴Ti质粒是农杆菌中的一种质粒；把目的基因插入Ti质粒的___________中，可实现目的基因转入受体细胞。

⑵构建含VP1基因的重组Ti质粒；还需要在质粒上插入_________，便于目的基因的表达。

⑶口蹄疫病毒的遗传物质为RNA；则获得能够重组到质粒上的VP1基因必须用到___________酶。如要获得大量的该VP1基因，可利用________技术进行扩增，扩增产物可以与___________（填试剂名）在沸水浴条件下呈蓝色。

⑷通常用BamHI、HindIII两种酶分别切割目的基因和质粒；获得不同黏性末端构建表达载体的原因是（写出一条即可）_____________________________________；用含__________的培养基能筛选出含重组Ti质粒的农杆菌。

⑸VP1基因转入普通番茄细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为______。我们可以使用____________技术检测目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA上。22、改造生物的性状；在许多领域取得了可喜的成果。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，请据图分析回答：

⑴图中①一般经________处理可以得到③，在①→③的培养过程中，需向培养液中通入一定量的CO2；其目的是______________________________。

⑵在胚胎发育过程中；囊胚时期的_________将发育成幼体的各种组织。

⑶在基因工程中；②表示_________________；②可用“DNA探针”进行筛选或检测，这里的“DNA探针”是指_______________；如果②的数量太少，常用_________技术来扩增。

⑷图中应用到的胚胎工程领域的生物技术有_________________和____。23、复合型免疫缺陷症（SCID）患者缺失ada基因；利用现代生物工程技术将人正常ada基因转入患者自身T细胞，可改善患者的免疫功能。如图显示该过程的主要步骤，回答下列问题：

（1）图中所示获取正常ada基因的方法是从基因文库中获取目的基因；基因文库包括基因组文库和___________。若要大量获取该目的基因，可通过PCR技术进行扩增。PCR技术是利用___________的原理，将基因的核苷酸序列不断加以复制。

（2）与细胞内DNA复制过程相比；PCR技术的不同点有：需要___________DNA聚合酶，另一个不同之处表现在温度控制方面，在PCR中先用90～95℃左右高温处理的目的是__________，而这一过程在细胞内是通过___________的催化作用实现的。

（3）将人正常ada基因转入患者自身T细胞进行治病的方法叫做___________。

（4）在该治疗方案中，病毒DNA起___________作用，ada基因整合到病毒核酸上需使用的工具酶有_______________________。评卷人得分五、实验题(共2题，共4分)24、某些糖尿病患者因胰岛B细胞被完全破坏；分泌胰岛素的功能丧失，需要通过注射胰岛素来补充。目前，该类患者对胰岛素的需求量越来越大。回答下列问题：

(1)在利用基因工程大规模生产胰岛素时；将胰岛素合成基因与质粒重组后导入大肠杆菌进行了表达。以上过程除了证明质粒可以作为载体外，还证明了_______；_________等。

(2)构建基因表达载体时；常用的工具酶是_________，他们作用的化学键是___________。基因工程中，不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌，其原因是__________。

(3)检测胰岛素合成基因是否导入受体菌时；常用_______作探针。

(4)胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时，遗传信息的传递方向是_____。经检测，胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性，导致这种差异的原因可能是表达产物未经______的加工。25、【生物—选修3：现代生物科技专题】治疗性克隆是指把患者体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞中；构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞；肌肉细胞和血细胞），用于治疗。请回答下列问题：

（1）ES细胞是胚胎干细胞的简称，在形态上，表现为__________________：在功能上，具有发育的全能性。将重组胚胎在体外培养到________时期，从该时期的_____中进行分离；从而获得ES细胞。

（2）在培养液中加入___可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞或器官，该过程研究的意义在于解决____问题。

（3）科学家将患者的体细胞核植入去核的卵母细胞中，而不是直接用体细胞进行细胞培养的原因是___。

（4）科学家将体外培养的ES细胞进行诱导使其定向分化为胰岛B细胞，并进行了胰岛素释放实验：控制培养液中__________的浓度，检测细胞分泌的胰岛素的量，如图为实验结果，据此分析确认ES细胞诱导成功，得到此结论的依据是________。评卷人得分六、综合题(共4题，共28分)26、辣椒素受体（TRPV1）广泛分布于感觉神经元等多种细胞的膜上；与人类感知疼痛；热有关。它的发现者获得2021年诺贝尔生理学或医学奖。

(1)在食用辣椒时，辣椒素与TRPV1结合，导致感觉神经元产生_______电位，最终传至_______产生热；痛感；即辣觉。

(2)在TRPV1的发现历程中，研究者利用大鼠能够感知疼痛的神经元为材料，提取细胞中的总RNA，通过逆转录得到_______，将扩增的基因片段构建成表达载体，分别导入辣椒素_______（选填“敏感”或“不敏感”）细胞；再经辣椒素处理后，通过特定技术手段，确定了可被辣椒素激活的TRPV1.

(3)骨关节炎（OA）发病机制复杂；主要是由多种类型的细胞分泌过量的细胞因子引起（下图左），症状表现为关节肿胀；疼痛等。上述细胞表面存在大量TRPV1，进一步研究发现，TRPV1在缓解OA症状方面具有明显作用（下图右）。

请在答题纸相应位置上补充由辣椒素激活TRPV1后，减轻OA症状的作用机制。____

(4)请从A~F中挑选最合适组合，以验证阻断N蛋白入核会引起IL-6等细胞因子含量的升高____。A．加入辣椒素B．不加辣椒素C．阻断N蛋白与K蛋白分离的药物XD．阻断N蛋白入核的药物YE．检测细胞核内N蛋白的含量F．检测IL-6等细胞因子的含量27、回答下列（一）；（二）小题：

（一）平板浇注法是常用的菌种分离纯化方法；是将待分离的样品用无菌水作梯度系列稀释后，取合适稀释度的少量菌悬液加至无菌培养皿中，立即倒入融化的固体培养基，经充分混匀后，置室温下培养。下图是研究人员用平板浇注法从土壤样品中分离以工业废甲醇为碳源的酵母菌，并进行大量培养的操作流程，请回答下列问题：

（1）为分离培养该酵母菌；配制培养基时应以___________为唯一碳源，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解；定容后，调节培养基的pH，及时对培养基进行分装，并进行_____________灭菌。

（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中；在步骤③中将温度约__________（在25℃；50℃或80℃（3个中选择）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。经培养，可在培养基的_____________部位出现许多单菌落。

（3）挑取平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线分离。下列叙述不合理的是_______。A．为保证无菌操作，接种环使用前必须进行灼烧灭菌B．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落C．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量D．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和____________供应。为监测酵母的细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，用25×16（2mm×2mm×0．lmm）型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，细胞的个数应不少于_____________，才能达到每毫升至少含2×109个细胞的预期密度。

（二）回答与基因工程及其应用有关的问题：

（1）博耶（H．Boyer）和科恩（S．Coben）将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达；该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了_____________________（答出两点即可）。

（2）体外重组的质粒可通过Ca2+参与的方法导入大肠杆菌细胞；而体外重组的噬菌体DNA通常需与_________组装成完整噬菌体后；才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞，在细菌；心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是___________。

（3）真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞内表达时，产生出的蛋白质可能会被降解。为防止大肠杆菌内的蛋白质被降解，在实验中应选用___________的大肠杆菌作为受体细胞。在提取纯化蛋白质的过程中应添加________，防止目的蛋白质被降解。28、癌胚抗原（CEA）是某些癌细胞表面产生的一种糖蛋白；临床上通过制备CEA的单克隆抗体来诊断癌症。回答下列问题：

（1）制备CEA的单克隆抗体时，首先将癌胚抗原注入小鼠体内，使小鼠产生免疫反应。然后从产生免疫反应小鼠脾脏中获取____细胞，将其与骨髓瘤细胞融合，该融合过程体现了细胞膜的_____特点，因为融合率不是100%，且融合过程具有随机性，所以要对融合后的细胞进行筛选，筛选出的杂交瘤细胞还要经过多次筛选，最终获得______________（答两个特点）的杂交瘤细胞。

（2）获得杂交瘤细胞后，将其注射到小鼠腹腔内增殖或_______，之后从中提取大量CEA抗体。CEA单克隆抗体具有的三个主要优点是__________。29、2020年11月17日，习近平总书记在金砖国家领导人会议上承诺我国力争2030年前达到碳达峰（CO2排放量达到峰值）。如图为某生态系统碳元素流动模型；图中数字表示生理过程或化学反应过程，回答下列问题：

(1)生态系统的基石是______（用图中的字母回答），请用图中的数字将碳中和的量的关系构建成数学表达式，即____________。

(2)实现碳达峰、碳中和，海洋是重要手，但研究发现深海区的下层几乎没有初级生产量，原因是______。

(3)北京冬奥会打造了首个真正实现“碳中和”目标的奥运会。

①冬奥核心区绿化造林成活率达99％以上，设计上有“宣乔则乔，宣灌则灌”理念。涉及生态工程的______原理。冬奥核心区的绿化造林既涵养水源、净化空气，也能供人们休闲娱乐、放松身心，这体现了生物多样性的______价值。

②严格做好垃圾分类和处理。废旧电池中的重金属离子等物质若进入土壤后会被植物吸收，会沿______逐级积累；最后可能造入人体。

(4)请写出两点符合“低碳生活”（低碳消耗、低碳排放的生活方式）理念的日常生活习惯：____________。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、C【分析】【分析】

分析题图：用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点并进行切割；进而将基因Ⅱ切除，连接基因Ⅰ和Ⅲ，形成新的B基因。

【详解】

A；sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点；因此基因定点编辑前需要设计与被切割基因两端碱基序列配对的sgRNA，A正确；

B；核酸内切酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的化学键；即磷酸二酯键，B正确；

C；被编辑后的B基因与编辑前的B基因由于位于同源染色体的相同位置；所以它们互称为等位基因，C错误；

D；通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因原有的功能；D正确。

故选C。2、C【分析】【分析】

植物经X射线处理后；会引发基因突变，从而产生新的基因。生物的变异是不定向的，但自然选择是定向的。外来物种入侵能影响生物的多样性，同时改变生物进化的速度和方向.生物与生物之间，生物与环境之间在相互影响中不断进化和发展，共同进化。

【详解】

A；某植物经X射线处理后未出现新的性状；可能是由于遗传密码的简并性，而X射线处理后可能会发生基因突变，所以可能已有新基因产生，A错误；

B；在基因工程中目的基因进入受体细胞不一定能成功表达；B错误；

C；生物的变异不一定会引起基因频率的改变；如单纯的基因重组不改变基因频率，C正确；

D；基因频率是指种群基因库中；某个基因占全部等位基因数目的比例，D错误。

故选C。3、A【分析】【分析】

1；调查人类遗传病时；最好选取群体中发病率相对较高的单基因遗传病，如色盲、白化病等；若调查的是遗传病的发病率，则应在群体中抽样调查，选取的样本要足够的多，且要随机取样；若调查的是遗传病的遗传方式，则应以患者家庭为单位进行调查，然后画出系谱图，再判断遗传方式。

2；遗传病的监测和预防（1）产前诊断：胎儿出生前；医生用专门的检测手段确定胎儿是否患某种遗传病或先天性疾病，产前诊断可以大大降低病儿的出生率。（2）遗传咨询：在一定的程度上能够有效的预防遗传病的产生和发展。

【详解】

A；近亲带有相同隐性遗传致病基因的可能性较大；近亲结婚所生的孩子患有隐性遗传病的可能性较大，因此禁止近亲结婚主要是为减少隐性遗传病的发生，A正确；

B；研究单基因遗传病的遗传方式需在患者家系中调查；研究单基因遗传病的发病率需在足够大的群体中随机抽样调查，B错误；

C；通过基因诊断确定胎儿不携带致病基因；但也有可能患染色体异常遗传病，C错误；

D；先天性心脏病是多基因遗传病；个体是否患病与基因有关，易受环境因素影响，D错误。

故选A。4、C【分析】【分析】

据图可知，重组细胞的细胞核来自细胞a，细胞质来自细胞b；重组细胞c类似于受精卵，经早期胚胎培养和胚胎移植到代孕猴d可获得克隆猴“中中”e。

【详解】

A、体细胞核移植过程中通常采用去核的MⅡ期卵母细胞作为受体细胞，因此上图中的卵子（b）需要培养到MⅡ时期；再通过显微操作去除细胞核，A正确；

B；重组细胞（c）需用物理或化学方法激活重组细胞；使其完成细胞分裂和分化进程，才能发育成囊胚，B正确；

C、细胞a能为重组细胞提供细胞核，不考虑突变，中中（e）的各种性状与提供细胞（a）的个体大体相同，但细胞质中来自卵子B，因此少部分性状与提供细胞b的个体相同；C错误；

D；首例体细胞克隆猴“中中”的诞生；这也是世界首例通过体细胞克隆技术诞生的灵长类动物，此技术可以克隆出特定疾病模型的动物，为进一步研究提供实验材料，对于构建非人灵长类动物模型、研究人类疾病等具有重要意义，D正确。

故选C。5、D【分析】试题分析：动物胚胎移植常用桑椹胚或囊胚进行胚胎移植；A正确；受体母畜必须处于与供体母畜必须进行同期发情处理，B正确；一般要对母本需先注射促性腺激素促进其超数排卵，C正确；由该技术培育而成的动物胚胎可能来自受精卵，所以遗传物质不是全部来自一个亲本，D错误。

考点：本题考查动物胚胎移植的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。6、C【分析】【分析】

生态系统的稳定性包括扺抗力稳定性和恢复力稳定性两个方面。营养结构越复杂；其自我调节能力越强，抵抗力稳定性越强，而恢复力稳定性越差，负反馈调节是生态系统自我调节能力的基础。

【详解】

A；丙与丁的分布是由地形的起伏导致的；体现了群落的水平结构，A正确；

B；四种植物生活在水体——河岸带；都有发达的气腔，利于根系的呼吸，体现出生物对环境的适应，B正确；

C；不同位置上植物种类的选择；增强了它们之间的竞争程度，C错误；

D；生态恢复工程使该生态系统的营养结构更复杂；自我调节能力更强，抵抗力稳定性增强，D正确。

故选C。二、填空题(共8题，共16分)7、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码8、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。9、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】取代修补10、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存11、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆12、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用13、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖14、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。三、判断题(共5题，共10分)15、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。16、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。17、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。18、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。19、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。四、非选择题(共4题，共8分)20、略

【分析】试题分析：分析题图；图示为获得转基因菊花的技术流程图，先是目的基因（抗虫基因）和质粒构建基因表达；接着采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞；再采用植物组织培养技术将受体细胞培养成转基因植株。分析表格：实验组的死亡率明显高于对照组。

（1）质粒是小型环状DNA分子；是基因工程采用的运载体。

（2）根据图示限制酶M和N的识别序列可知；它们切割产生的黏性末端都是GATC（CTAG）；DNA连接酶能将具有相同黏性末端的DNA片段连接形成重组DNA分。

（3）将目的基因导入微生物细胞（农杆菌）时，常采用感受态细胞法，即用Ca2+（或CaCl2）处理农杆菌细胞；使其处于易于吸收周围环境中的感受态。

（4）由图可知；标记基因是卡那霉素抗性基因，因此可用含有卡那霉素的培养基来筛选转基因菊花。

（5）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据抗虫基因（目的基因）两端的部分碱基序列设计特异引物，假设目的基因扩增了n次，则需要引物的对数为2n-1，已知其中一种引物共用了31个，则2n-1=31；n=5。

（6）①实验设计要遵循对照原则和单一变量原则；本实验的目的是探究转基因菊花对菊天牛2龄幼虫的作用，可见自变量为是否加入转基因菊花嫩茎及叶片，因此对照组应饲喂等量的非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物。

②据表分析，实验组与对照组菊天牛死亡率差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。【解析】环状DNAGATCDNA连接酶氯化钙溶液（Ca2+)卡那霉素5等量非转基因菊花嫩茎及叶片实验组与对照组菊天牛死亡率21、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）VP1基因应插入Ti质粒上的T—DNA上；通过转化作用进入番茄细胞并插入染色体DNA，使VP1基因能够维持稳定并发挥作用。

（2）基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因；为便于目的基因的表达，应在质粒上插入启动子，启动子是RNA聚合酶的结合位点，能启动转录。

（3）口蹄疫病毒的遗传物质为RNA；要获得目的基因，应利用逆转录的方法，需要逆转录酶；PCR技术可在体外大量扩增目的基因；扩增的产物为DNA，与二苯胺（试剂）在沸水浴条件下呈蓝色。

（4）只用一种酶切割目的基因和质粒，得到的黏性末端都相同，VP1基因和Ti质粒可能会自身环化，目的基因（VP1基因）与质粒也可能反向连接，为避免出现这样的情况，可用BamHI、HindIII两种酶分别切割目的基因和质粒；由图可知，重组Ti质粒中卡那霉素抗性基因完整，四环素抗性基因被破坏，所以用含卡那霉素和四环素的培养基能筛选出含重组Ti质粒的农杆菌。

（5）将目的基因导入受体细胞；并使其在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化；检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因使用的DNA分子杂交技术。

【点睛】

将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力。当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的Ti质粒的T-DNA（可转移的DNA)可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这种特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。【解析】T—DNA启动子反转录（或“逆转录”）PCR二苯胺（试剂）防止VP1基因自身环化或防止Ti质粒自身环化或防止目的基因（VP1基因）与质粒反向连接卡那霉素和四环素转化DNA分子杂交22、略

【分析】【分析】

分析题图：图示为利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的流程；其中①→③表示动物细胞培养过程，该过程需要用胰蛋白酶处理动物组织，使组织细胞分散开来；②是目的基因，②→③表示将目的基因导入受体细胞；④是囊胚，④→⑤表示胚胎分割；⑤→⑥表示胚胎移植过程；⑥→⑦表示妊娠产生转基因克隆牛的过程。

【详解】

（1）动物细胞培养时，需要先用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理动物组织以获得单个细胞；动物细胞培养过程中，需向培养液中通入一定量的CO2；其目的是维持培养液的pH。

（2）囊胚包括内细胞团和滋养层两种细胞；其中滋养层将发育成胎盘和胎膜，而内细胞团将发育成幼体的各种组织。

（3）在基因工程中；②表示目的基因；DNA探针是指用放射性同位素标记的；含目的基因的DNA单链；PCR技术可以大量扩增目的基因。

（4）图中涉及的技术手段有转基因技术；核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植；其中早期胚胎培养和胚胎移植技术属于胚胎工程领域。

【点睛】

解答本题的关键是基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，分析题图并准确判断图中各过程的名称，进而能结合所学的知识答题。【解析】胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）维持培养液的pH内细胞团目的基因用放射性同位素标记的、含目的基因的DNA单链PCR早期胚胎培养胚胎移植23、略

【分析】试题分析：本题考查基因工程；考查对基因工程的工具；操作程序的识记，解答此类题目应熟记基因工程各操作程序的方法或技术要点。

（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库（cDNA文库）。PCR技术利用DNA双链复制的原理；将基因的核苷酸序列不断加以复制。

（2）PCR技术需要热稳定DNA聚合酶；扩增过程中先用90～95℃左右高温处理使DNA变性（解旋），这一过程在细胞内是通过解旋酶的催化作用实现的。

（3）将人正常ada基因转入患者自身T细胞进行治病的方法叫做基因治疗。

（4）在该治疗方案中，病毒DNA起运载体（载体）作用，ada基因整合到病毒核酸上需使用限制酶和DNA连接酶。【解析】部分基因文库（cDNA文库）DNA双链复制热稳定使DNA变性（解旋）解旋酶基因治疗运载体（载体）限制酶和DNA连接酶五、实验题(共2题，共4分)24、略

【分析】【分析】

要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因；这是目的基因能否在真核细胞中稳定遗传的关键。检测的方法是采用DNA分子杂交技术，即将转基因生物的基因组DNA提取出来，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作标记，以此作为探针，使探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中。

【详解】

（1）在利用基因工程大规模生产胰岛素时；将胰岛素合成基因与质粒重组后导入大肠杆菌进行了表达，以上过程除了证明质粒可以作为载体外，还证明了体外重组的质粒可以进入大肠杆菌，真核外源基因可以在原核细胞中表达等。

（2）构建基因表达载体时；常用的工具酶是DNA连接酶和限制性核酸内切酶，他们作用的化学键是磷酸二酯键。基因工程中，不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌，其原因是胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞中不能稳定遗传和表达。

（3）基因是有遗传效应的DNA片段；检测胰岛素合成基因是否导人受体菌时，常用（放射性物质标记的）胰岛素合成基因（的一条链）作探针。

（4）基因的表达包括基因的转录和翻译；胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时，遗传信息的传递方向是DNA→（m）RNA→蛋白质。经检测，胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性，导致这种差异的原因可能是表达产物未经内质网；高尔基体的加工。

【点睛】

解答本题的关键是：明确基因工程中载体的种类，大肠杆菌作为受体细胞的原因，以及胰岛素基因在原核细胞中无生物活性的原因，再根据题意作答。【解析】体外重组的质粒可以进入大肠杆菌真核外源基因可以在原核细胞中表达等DNA连接酶和限制性核酸内切酶磷酸二酯键胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞中不能稳定遗传和表达(放射性物质标记的)胰岛素合成基因(的一条链)DNA→(m)RNA→蛋白质内质网、高尔基体25、略

【分析】【详解】

（1）ES细胞是胚胎干细胞的的简称；在形态上，表现为体积小；细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性。如果从重组胚胎中分离干细胞，需将重组胚胎培养到囊胚时期，从该时期的内细胞团中进行分离。（2）欲诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞，需要在在培养液中加入分化诱导因子。研究的意义在于解决临床上供体器官不足或器官移植后免疫排斥等问题。（3）已经分化的动物体细胞的全能性受到限制，体细胞核在体细胞中不能表现全能性，而卵细胞的细胞质可以给它提供表达全能性的环境，所以科学家将患者的体细胞核植入去核的卵细胞中,而不是直接用体细胞进行细胞培养。（4）在正常机体内，胰岛B细胞分泌胰岛素的量受血糖（血液中的葡萄糖）浓度的影响，因此，欲在体外进行由ES细胞定向诱导分化形成的胰岛B细胞释放胰岛素的实验：要控制培养液中葡萄糖的浓度。实验结果显示：在糖浓度高时，胰岛素分泌量多；在糖浓度低时，胰岛素分泌量减少，据此分析确认ES细胞诱导成功。

【考点定位】胚胎干细胞、克隆技术、胰岛素的生理作用【解析】体积小、细胞核大、核仁明显囊胚内细胞团分化诱导因子临床上供体器官不足或器官移植后免疫排斥等体细胞核在体细胞中不能表现全能性，而卵母细胞的细胞质可以给它提供表达全能性的环境（或“卵母细胞的细胞质中含有诱导体细胞核表达出全能性的物质”等）葡萄糖在糖浓度高时，胰岛素分泌多，在糖浓度低时，胰岛素分泌量减少六、综合题(共4题，共28分)26、略

【解析】27、略

【分析】【分析】

1；稀释涂布平板法在培养基上分离、培养出微生物的单个菌落；以便于计数、移植、分离，从而达到纯化培养的目的。

2；选择培养基是在培养基中加入某种化学物质；以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。从土壤样品中分离以工业废甲醇为碳源的酵母菌，那么培养基中要加入甲醇，且是唯一碳源。

3；据图分析；①称量土样，里面含有需要分离的酵母菌；②表示梯度稀释，③④表示平板划线法，进行纯化培养；⑤表示扩大培养，获得更多的酵母菌。

4；基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（一）（1）要想从土壤样品中分离以工业废甲醇为碳源的酵母菌；配制培养基时应以甲醇为唯一碳源，按照培养基配方准确称