2025年仁爱科普版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年仁爱科普版选择性必修3生物上册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、下图为制备人工种子部分流程示意图；下列叙述正确的是（）

A.胚状体是外植体在培养基上脱分化形成的一团愈伤组织B.该过程以海藻酸钠作为营养成分，以CaCl2溶液作为凝固剂C.可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖，为胚状体的发育提供营养D.包埋胚状体的凝胶珠能够隔绝空气，有利于人工种子的储藏2、干眼症是由于泪液分泌减少导致的眼睛干涩的病症。通过将有关基因导入已分化的体细胞获得类似胚胎干细胞（ES细胞）的诱导多能干细胞（iPS细胞），进而培养得到眼结膜组织，可分泌泪液成分“粘液素”，有望治疗干眼症。下列说法错误的是（）A.导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力B.利用iPS获得眼结膜组织时应加入分化诱导因子C.iPS细胞核移植比体细胞核移植更容易表现全能性D.利用ES细胞治疗人类疾病的前景优于iPS细胞3、MRSA是一种能引起皮肤感染的“超级细菌”；对青霉素等抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如表所示。下列说法正确的是（）

。组别培养基中的添加物MRSA1100mg/mL蛋白质H生长正常220mg/mL青霉素生长正常32mg/mL青霉素＋100mg/mL蛋白质H死亡A.该实验还需设计用2mg／mL青霉素做处理的对照组B.蛋白质H有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素C.细菌是否死亡可以通过光学显微镜的高倍镜观察来确定D.第2组和第3组对比表明使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA4、基因编辑技术CRISPR/Cas9系统包括两个组分：一个是人工合成的短链RNA（sgRNA）和一个来自细菌的核酸酶Cas9。sgRNA与目的基因中希望被编辑的DNA序列相结合，然后Cas9切割该DNA序列，使DNA双链断裂，此时向细胞中加入大量可用于修复的模板DNA，细胞就会以这些片段为模板合成DNA，从而使特定的碱基序列被引入基因组中、下列说法错误的是（）A.Cas9决定了基因编辑的位点和基因编辑的效率B.基因编辑技术可以破坏某个基因使其失去功能C.基因突变是不定向的而基因编辑能定向改变基因D.Cas9类似限制酶能够使双链DNA中的磷酸二酯键断裂5、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列叙述正确的是（）

A.用限制酶BsaBI和DNA聚合酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞即为成功转入目的基因的细胞D.用PCR技术检测GNA和ACA基因成功导入棉花细胞后，棉花就一定表现抗蚜虫性状6、蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的地设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物，中华是一种濒危野生动物。研究者试图通过蛋白质工程改造中华体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境。下列有关说法错误的是（）A.蛋白质工程可定向改变蛋白质分子的结构B.改造蛋白质可通过改变基因结构实现C.改造后的中华鳄和现有中华鳄仍是同一物种D.改造后的中华鳄的后代不具有改造后的蛋白质评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)7、下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述，正确的是（）A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数C.在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同D.在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染8、荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸检测。其原理是：先由病毒的RNA逆转录得到cDNA，然后对得到的DNA进行PCR扩增。在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每个DNA分子扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。Ct值（循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法错误的是（）

A.扩增过程中引物先于探针结合到模板DNA上B.若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，经n次循环后，需要消耗荧光探针2n-1个C.C值越大表示被检测样本中病毒数目越多D.若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性9、下列关于发酵工程的应用，叙述正确的是（）A.柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，可以通过黑曲霉发酵制得B.可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗C.利用发酵工程生产的白僵菌特异性强，只能用来防治一种农林害虫D.一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病10、厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质，易腐烂变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验，并得出下图的实验结果。下面叙述错误的是（）

A.巨大芽孢杆菌生长过程中需要氮源，圆褐固氮菌生长过程中不需要氮源B.要统计活菌数量可采用平板划线法和稀释涂布平板法C.将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为3．9×105D.处理该类厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比为1：111、大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述正确的是（）

A.提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解B.将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定C.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理D.根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点12、关于现代生物工程技术应用的安全性，下列说法正确的是（）A.对待生物武器的态度应明确而坚定，即坚决禁止生物武器B.对转基因植物的外源DNA要认真选择，避免产生对人体有害或过敏的蛋白质C.我国不反对治疗性克隆，允许有限制地进行克隆人实验D.一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物13、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶14、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)15、人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质一一培养基。其中，配制成的_______________的基质称为液体培养基，配制成的固体状态的基质称为________________________。在液体培养基中加入凝固剂_______________________后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。微生物在_________________培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。（琼脂是一种从红藻中提取的____________________。琼脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态。）16、20世纪70年代以后；以基因工程为代表的一大批生物技术成果，进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，但是与其他高新技术一样，生物技术也同样具有双刃剑效应。如同其他高新技术一样，转基因成果和转基因技术也需要你的理性看待。在转基因生物安全方面；

（1）你认为转基因生物有哪些优点，①____________②___________③__________。

（2）你认为转基因生物有哪些缺点，①____________②___________③__________。

（3）你对于转基因生物的态度是__________。17、第一步：______18、其它载体：_______19、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。20、通常将DNAD的羟基（—OH）成为_______________端，而磷酸基团的末端成为___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向总是从_________________延伸。21、大多数蛋白质不能忍受60—80℃的高温，而DNA在_________℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解或破坏_______，食盐能____________细胞膜。22、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。23、不同国家的政府对待生殖性克隆人的态度是不同的｡我们认同我国政府对待生殖性克隆人研究的态度吗？为什么？_____。评卷人得分四、判断题(共1题，共8分)24、内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共28分)25、豆豉是中国传统特色发酵豆制品调味料。豆豉以黑豆或黄豆为主要原料；利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，经复杂工序制作而成。程序如下：黑豆→筛选→洗涤→浸泡→沥干→蒸煮→冷却→接种→制曲→洗豉→浸→拌盐→发酵→晾干→成品（干豆豉）。请回答下列问题：

（1）蒸煮目的是_________，冷却后再接种的原因是_____________。

（2）观察发现发酵容器中上层豆类的发酵效果比底层的好，说明该菌是________。

（3）制作过程中要加入适量的盐，盐能______________；避免变质。

（4）从黑豆到豆豉。它的成分会发生一定的变化。其中最显著的变化是________。

（5）豆豉制作过程中用到的菌种与课本上_________________________制作的菌种最接近，从细胞结构看，它们属于___________生物。26、科研人员利用营养菌（只能利用乳糖；但不能降解四环素）和抗性菌（不能利用乳糖，但能降解四环素）对细菌间的相互作用进行了探究。

(1)将两种菌液分别用______法单独接种于加入含四环素并以乳糖为唯一碳源的______（选填“固体”或“液体”）培养基中，培养一段时间后，培养皿中均未出现菌落，推测两种菌______（填“发生”或“未发生”）可遗传变异。

(2)将两种菌混合后接种在与上述成分相同的培养基中，培养一段时间后，培养基中两种菌落均有生长，推测两种菌实现了“互利共生”，其原因最可能是：抗性菌增殖，______，为营养菌存活提供保障；营养菌增殖，______；代谢产物为抗性菌生长提供碳源。

(3)为进一步验证上述现象；科研人员设计了如图所示装置进行实验。

①实验操作：在接种了营养菌和抗性菌混合菌液的培养板，左侧加入以乳糖为唯一碳源的培养基，右侧加入含______的培养基；培养基可从与两侧逐渐扩散到混合菌液培养板上。一段时间后检测混合菌液培养板上两种菌的数量情况。

②预期结果：左侧______；右侧______。27、《本草纲目》记载；“蝉花可治疗惊痫，夜啼心悸，功同蝉蜕”。蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人员从天然蝉花中分离纯化蝉拟青霉菌株进行人工培养。

(1)制备培养基：

①该实验选择马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基，配方如下：马铃薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，琼脂20g，用蒸馏水定容至1000mL，自然pH，培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供_____等营养成分（至少写出2种），该培养基的自然pH为______性范围。

②为了便于筛选蝉拟青霉菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生长。该培养基从功能上分类属于______培养基。

③配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_______。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_____。

(2)蝉拟青霉的分离纯化：取新鲜蝉花，挑取虫体胸腔中的少量菌丝采用_______法接种至PDA培养基上进行培养。

(3)发酵生产：发酵生产中常用液体培养基扩大培养。下表为发酵菌丝体和天然蝉花的主要成分及含量的测定结果，据表判断_______（填“能”或“不能”）用发酵菌丝体替代天然蝉花，判断的理由是_______。粗蛋白（%）粗纤维（%）灰份（%）水分（%）虫草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）发酵菌丝体25．388．327．878．9233．278．9天然蝉花19．653．127．849．8128．553．628、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。评卷人得分六、综合题(共2题，共16分)29、绿色荧光蛋白在紫外线的照射下能发出绿色荧光；最初是在一种海蜇中被发现的。转绿色荧光基因（Gfp）的幼鼠在紫外光下能发出绿色荧光。进一步研究发现，绿色荧光蛋白可以帮助了解细胞工作的机制，通过寻找荧光便可知道基因何时以及为什么“开启”，这项成就被称为“21世纪的显微镜”。下图表示转基因绿色荧光小鼠的培育过程，图中Neo基因编码的产物能分解G418，G418是一类对原核细胞和真核细胞都有毒性的抗生素。回答下列有关问题：

(1)将绿色荧光蛋白基因与目的基因连接组成的融合基因转入细胞内，表达出的蛋白质就会带有经色荧光，观察绿色荧光就可以追踪目的基因编码的蛋白质，直观地揭示微观世界的运动规律。这项技术中需要_______等工具酶。

(2)从______中可以提取胚胎干细胞；步骤②和⑤都需要用_______法；分别实现将基因表达载体导入胚胎干细胞；将转基因细胞导入囊胚。

(3)步骤⑤应把转基因胚胎干细胞导入囊胚的_______，让转基因干细胞与这些细胞一起发育成胎儿；若幼鼠_________；则说明Gfp基因在幼鼠体内成功表达。

(4)据图分析，Neo基因在转基因绿色荧光小鼠的培育过程中发挥作用的机理是_________。30、不同动物细胞膜表面的分子标签（MHC；主要组织相容性抗原）具有特异性，使得即使在相同抗原的刺激下，与人类相比，所产生的免疫反应也有很大的差异性，为此，构建人MHC转基因小鼠模型并应用于疫苗研发，具有重要的价值。如图是人MHC转基因小鼠模型的构建过程。

(1)过程①用__________处理可以获取更多的卵（母）细胞，过程③所用的技术是___________。将早期胚胎植入代孕母鼠前，需对受体进行______________。

(2)图中X表示__________过程。从基因组数据库中查询人MHC的mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成_________用于PCR扩增，PCR扩增过程第一轮循环的模板是______________。

(3)通过上述途径和杂交选育虽然可获得含有人源MHC基因的纯合子代小鼠，但该模型小鼠还不是理想的模型动物，理由是____________________，表达的产物会干扰疫苗的筛选或评价。欲获得理想的模型动物，后续的实验设想是______________________。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、C【分析】【分析】

1、据图分析，支柱组织培养诱导形成胚状体，用海藻酸钠溶液包埋胚状体，注射到CaCl2溶液中形成稳定结构；用无菌水冲洗形成人工种子。

2；人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；通过人工薄膜包装得到的种子。

3；人工种子包括胚状体、人工胚乳和人工种皮；其中胚状体是通过脱分化和再分化过程形成的；人工胚乳可为种子提供营养；人工种皮具有保护作用（可添加植物生长调节剂以调节植物的生长发育。）

【详解】

A；外植体在培养基上脱分化形成的愈伤组织；再分化才能形成胚状体，A错误；

B、该过程以海藻酸钠作为包埋材料，以CaCl2溶液作为凝固剂；B错误；

C；可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖；为胚状体提供碳源和能量，C正确；

D；包埋胚状体的凝胶珠能够保护胚状体；有利于人工种子的储藏，D错误。

故选C。2、D【分析】【分析】

胚胎干细胞简称ES或EK细胞；是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞，iPS与ES细胞一样，可通过定向诱导分化修补某些功能异常的细胞来治疗疾病。

【详解】

A；根据题文；导入的基因能促使已分化的体细胞成为诱导多能干细胞（iPS细胞），体细胞无分裂能力，而干细胞是一类有分裂能力的细胞，故导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力，A正确；

B；iPS可分化为多种细胞；加入分化诱导因子才能获得相应的组织或器官，B正确；

C；iPS细胞分裂能力强；分化程度低，所以iPS细胞核移植比体细胞核移植更容易表现全能性，C正确；

D；iPS技术不使用胚胎细胞或卵细胞；只需对体细胞进行操作及适当的培养即可，没有伦理学的问题，还可以避免免疫排斥，故利用iPS细胞治疗人类疾病的前景优于ES细胞，D错误。

故选D。3、A【分析】【分析】

实验设计的变量包括自变量；无关变量、因变量。本实验的自变量是青霉素的浓度和是否添加蛋白质H；因变量是MRSA的生长情况。

【详解】

A；由于第2组的青霉素浓度是20mg／mL；而第3组的青霉素浓度是2mg／mL，所以该实验还需设计用2mg／mL青霉素进行处理的对照组，A正确；

B；蛋白质H不是一种新型抗生素；是人母乳中新发现的蛋白质H，该实验设计只得出低浓度青霉素和高浓度蛋白质H的混合物可杀死MRSA，B错误；

C；通过光学显微镜的高倍镜观察细菌；不能鉴定细菌的死活，C错误；

D；第2组和第3组有两个自变量即青霉素的浓度和是否加蛋白质H；不能对比说明使用低浓度青霉素即可杀死MRSA，D错误。

故选A。4、A【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；测与表达。

2；从分子水平上检测目的基因的方法：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因－－DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA－－分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质－－抗原－抗体杂交技术。

【详解】

A；由题干可知；Cas9只能切割与sgRNA结合的DNA序列，所以决定基因编辑位点的是sgRNA，而不是Cas9，A错误；

B；基因编辑技术可以修改特定基因的碱基排列顺序；因此可以通过去除启动子等方式使得某个基因无法进行表达，B正确；

C；基因突变具有不定向性；而基因编辑技术可以对特定基因进行特定的修改，是定向改变，C正确；

D；Cas9和限制酶一样；都可以切割DNA，使得DNA双链断裂，说明二者都能使得DNA中的磷酸二酯键断裂，D正确。

故选A。5、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4)）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术和PCR技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由图可知；GNA、ACA都含有限制酶BsaBI的酶切位点，故用限制酶BsaBI和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因，DNA聚合酶是催化单个核苷酸连接，而DNA连接酶是催化DNA片段连接，A错误；

B；图中质粒与ACA-GNA上都含有KpnI和XhoI的酶切位点；与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确，避免反向连接，B正确；

C；由于载体上含有卡那霉素抗性基因；在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞为成功转入目的基因的细胞或含有普通质粒的细胞，C错误；

D；PCR技术可用于基因探针的制备；可用来检测目的基因是否导入受体细胞，基因GNA和ACA导入棉花细胞后不一定正常表达，所以不一定具有抗虫性状，D错误。

故选B。

6、D【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

【详解】

A；蛋白质工程可以通过改造基因来定向改变蛋白质分子的结构；A正确；

B；改造蛋白质可通过改变基因结构实现；因为基因能控制蛋白质的生物合成，因此基因工程又叫做第二代基因工程，B正确；

C；通过蛋白质工程改造中华鳄体内的某些蛋白质；使其更加适应现在的水域环境。改造后的中华鳄具有新的性状，但其和现有中华鳄仍是同一物种，C正确；

D；蛋白质工程改造的是基因；可以遗传给子代，因此改造后的中华鳄的后代也具有改造后的蛋白质，D错误。

故选D。

【点睛】二、多选题(共8题，共16分)7、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中；需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。

【详解】

A；倒置培养的原因是可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染；经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置，以防止杂菌污染，A正确；

B；为使实验结果更准确；同一稀释度下可以多涂布几个平板，至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数，求平均值，B正确；

C；细菌在分裂生殖中也会产生基因突变；虽然一个菌落是由一个活菌繁殖而来，但是个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同，C错误；

D；证明选择培养基没有被杂菌污染的方法是对培养基进行空白培养；即选取未接种的培养皿与接种样品的培养皿同时培养，在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染，D正确。

故选ABD。8、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶链式反应扩增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2；PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

【详解】

A；基因扩增过程中需要特定的引物；该引物的作用是定位基因的位置，与模板链结合并为子链的延伸提供起点，扩增过程中引物和探针应同时结合到模板DNA上，A错误；

B、若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，每个DNA分子需要1个探针，扩增n次，可得到2n个DNA分子，则共需要消耗2n-1个探针；B错误；

C；由题可知C值越大；该反应管内的荧光信号到达设定阈值经历的循环数越大，即每次循环出现的荧光信号越少。每次循环出现的荧光信号越少，代表被检测样本中的病毒数目越少，C错误；

D；如果样本内的病毒RNA被降解；会导致无法检测出样本内的正确病毒数目，D正确。

故选ABC。9、A:B【分析】【分析】

发酵工程是指采用现代工程技术手段；利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育；培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。

【详解】

A；柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂；可以通过黑曲霉发酵制得，A正确；

B；可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗；B正确；

C；利用发酵工程生产的白僵菌可以用来防治80多种农林害虫；C错误；

D；一种放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病；D错误。

故选AB。

【点睛】10、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接种的方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。若要对微生物进行取样计数，接种方法只能是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

【详解】

A；微生物的生长需要碳源、氮源、无机盐等物质；只是有些固氮菌由于能利用氮气作为氮源，不需要在培养基中添加氮源，A错误；

B；平板划线法不能用于计数；B错误；

C、将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C错误；

D；根据图示可知；两菌种的接种量比为1:1时比两菌种的接种量比为2:1时效果好，但由于该实验设置的两菌种的接种量比例的组数过少，所以无法判断处理该类厨余垃圾废液的两菌种的最佳接种量比，D错误。

故选ABCD。11、A:B:C【分析】【分析】

DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA时可加入酒精，是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确；

B；将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B正确；

C；DNA带负电；电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；

D；因为质粒的本质是环状的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。

故选ABC。12、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器又是生物制剂、载体和分散手段的综合利用。生物武器自诞生以来；给人类的生存安全构成了严重威胁。

2；转基因生物的安全性问题包括食物安全、生物安全和环境安全。

3；“治疗性克隆”将使人胚胎干细胞（简称ES细胞）造福于人类的一种非常重要的途径。治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎；体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。

【详解】

A；对待生物武器的态度应明确而坚定；即在任何情况下都不发展、不生产、不储存生物武器，坚决禁止生物武器，A正确；

B；转基因要注意基因安全；对外源DNA要进行认真选择，避免产生对人体有害的或过敏的蛋白质，B正确；

C；中国对于克隆人的态度是不反对治疗性克隆；禁止进行克隆人的实验，C错误；

D；一旦发现转基因生物出现了安全性问题；包括食品安全、生物安全和生态安全，要马上停止试验，并销毁重组生物，D正确。

故选ABD。13、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。14、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。三、填空题(共9题，共18分)15、略

【解析】①.液体状态②.固体培养基③.琼脂④.固体⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋子生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理是基因重组；其优点是打破了生殖隔离。但由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的结构；基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果。

【详解】

（1）转基因生物具有以下优点：

作物产量高；能解决粮食短缺问题；利用基因工程生产的抗虫作物能够减少农药使用，减少环境污染；利用基因工程培育的生长迅速；营养品丰富的生物，能增加食物营养，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能够生产稀缺的生化药物。

（2）转基因生物受限于科学发展水平；可能会产生以下问题：

转基因生物与同种生物杂交；可能产生重组病菌；重组病毒或超级杂草；导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出对人类或其他生物有害的病原体，可能使疾病的传播跨越物种障碍。

（3）转基因技术取得了巨大的成果；但科学技术是把双刃剑，面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。

【点睛】

本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解。【解析】解决粮食短缺问题减少农药使用，减少环境污染增加食物营养，提高附加值能产生有毒蛋白或新过敏原可能产生重组病菌、重组病毒或超级杂草可能使疾病的传播跨越物种障碍趋利避害不能因噎废食17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的获取18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】噬菌体、动植物病毒19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能从头开始合成，而只能从3，端延伸DNA子链的5，端向3，端21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80细胞膜溶解22、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。23、略

【分析】【详解】

对待生殖性克隆人的研究，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。【解析】认同。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。四、判断题(共1题，共8分)24、A【分析】【详解】

内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。

正确。五、实验题(共4题，共28分)25、略

【分析】豆豉的制作原理与腐乳的制作类似：起主要作用的是真菌中的毛霉；适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸；甘油和脂肪酸。

【详解】

（1）黄豆煮熟的目的主要破坏黄豆内部结构；使蛋白质变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用，冷却后再接种的原因是防止高温杀死菌种；

（2）发酵装置的上层含氧量比较高；发酵装置内上层黄豆的发酵效果比底层好，说明该发酵菌是需氧菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；

（3）盐能抑制微生物生长所以制作豆豉过程中要加入适量的盐；避免变质；

（4）大豆到豆豉的过程中；主要利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，所以其中最显著的变化是蛋白质被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸；

（5）腐乳的制作过程也是利用了毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用；毛霉、曲霉等微生物都是真核生物。

【点睛】

本题考查了豆豉制作的相关知识，要求考生能够识记豆豉制作的原理；能够利用酶的专一性解答蛋白酶和脂肪酶作用的产物是解答本题的关键。【解析】破坏大豆内部分子结构，使蛋白质适度变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用防止高温杀死菌种好氧菌抑制微生物生长蛋白质转变成氨基酸和肽。腐乳真核26、略

【分析】【分析】

接种最常用的方法是平板划线法和稀择涂布平板法；接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养甚表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体菌落。

【详解】

（1）为了观察菌落；需用固体培养基，接种方法为平板划线法或稀释涂布平板均可，培养皿中均未出现菌落，说明未发生可遗传变异。

（2）混合接种能形成菌落的原因是相互产生或创造了各自所需的物质或条件；所以推测两种菌最可能是：抗性菌增殖，降解了四环素，为营养菌存活提供保障；营养菌增殖，分解了乳糖，代谢产物为抗性菌生长提供营养所需。

（3）①由题意可知；营养菌只能利用乳糖，但不能降解四环素，抗性菌不能利用乳糖，但能降解四环素，故在接种了营养菌和抗性菌混合菌液的培养板，左侧加入以乳糖为唯一碳源的培养基，右侧应加入四环素但不含乳糖的培养基，培养基可从与两侧逐渐扩散到混合菌液培养板上。

②根据两种菌能实现了“互利共生”，左侧添加以乳糖为唯一碳源的培养基后营养菌和抗性菌都能生长。右侧加入含四环素的培养基，因没有碳源则两种菌都不能生长。【解析】(1)（稀释）涂布平板或平板划线固体未发生。

(2)降解了四环素分解了乳糖。

(3)四环素但不含乳糖营养菌和抗性菌都能生长两种菌都不能生长27、略

【分析】【分析】

为了杀灭培养基中的微生物；实验所配制的培养基必须进行灭菌处理；可将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，以检测培养基的灭菌效果，若培养基中无菌落长出，说明培养基的灭菌是合格的；在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

【详解】

（1）①马铃薯中含有淀粉；蛋白质和无机盐等物质；故培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供碳源、氮源、无机盐等营养成分；

培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性；培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，即培养蝉拟青霉的培养基的自然pH为酸性范围。

②氯霉素等抗生素可以通过抑制肽聚糖（细菌细胞壁的主要成分）的合成来抑制细菌的生长；而对真菌的生长无影响。为了便于筛选蝉拟青霉（真菌）菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制细菌的生长，该培养基从功能上分类属于选择培养基。

③为了杀灭培养基中的微生物；配制的培养基必须进行灭菌处理；将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，若培养基中无菌落长出，说明固体培养基的灭菌是合格的。

（2）蝉拟青霉的分离纯化：由（1）的题干信息可知；PDA为固体培养基，在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）根据题意“蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并结合表格信息可知，发酵菌丝体中各种活性成分的含量明显高于天然蝉花，故能用发酵菌丝体来替代天然蝉花。【解析】(1)碳源；氮源、无机盐酸细菌选择杀灭培养基中的微生物将灭菌的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间；观察是否长出菌落。

(2)平板划线（稀释涂布平板）

(3)能发酵菌丝体活性成分的含量明显高于天然蝉花28、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4