2024年北师大新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2024年北师大新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷257考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、通过动物细胞核移植技术获得的新个体称为克隆动物。下列克隆动物的描述，错误的是（）A.由于卵母细胞体积大、易操作、营养物质多，其细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质等，所以常用作受体细胞B.克隆动物的性状由细胞核供体、细胞质供体和代孕母体共同决定C.克隆动物的获得充分证明了动物细胞核具有全能性D.生物膜的流动性是核移植技术的原理之一2、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为G↓GATCC和A↓GATCT．研究中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒。相关叙述正确的是（）A.限制酶切开的是磷酸二酯键，DNA连接酶催化氢键的形成B.目的基因经BamHI切割后形成的黏性末端是-CTAGGC.分别用不同种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒D.经两种限制酶处理并连接得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别3、犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(CpvMcAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。下列相关叙述，错误的是A.在CpvMcAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术B.给幼犬注射CPV后，CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应C.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可直接生产CpvMcAbD.对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜4、下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图；有关叙述错误的是（）

A.在配制步骤②③的培养基时，应先调pH再高压蒸汽灭菌B.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，获得单菌落C.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力5、某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，将青蒿素合成过程的某－－关键酶基因fps在野生青蒿中过量表达，其过程如下图所示。有关叙述错误的是（）

A.经图示过程得到的fps基因不含启动子和终止子B.酶1、酶2和酶3作用的化学键都是磷酸二酯键C.图中含fps基因的DNA片段中有酶2的识别序列D.导入fps基因的青蒿植株中该基因都能过量表达6、如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如图1（以EcoRI酶切为例），其中已知碱基序列如图2．现对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列，下列DNA单链序列中（虚线处省略了部分核苷酸序列），结果正确的是（）

A.5'-AACTATGCG——AGCCCTT-3'B.5'-AATTCCATG——CTGAATT-3'C.5'-GCAATGCGT——TCGGGAA-3'D.5'-TTGATACGC——CGAGTAC-3'7、下列关于制作传统发酵食品的叙述，错误的是（）A.制作腐乳利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶B.发酵温度过低可能会导致制泡菜“咸而不酸”C.制作果酒时，需每隔一定时间打开瓶盖放气D.制作果醋时，醋酸杆菌能以乙醇作为碳源和能源8、下表为常用的限制性核酸内切酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断的以下说法中，正确的是（）。限制酶名称识别序列和切割位点|限制酶名称识别序列和切割位点BarmHIG↓GATCCKpnIGGTAC↓CEcoRIG↓AATTCSau3AI↓GATCHindIGTY↓RACSmaICCC↓GGG

（注：Y＝C或T，R＝A或G）A.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B.限制酶切割后一定形成黏性末端C.不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端D.限制酶的切割位点在识别序列内部9、RNA干扰是指通过RNA的介导，特异性降解相应mRNA，从而导致的基因沉默现象。miRNA能介导RNA干扰。筛选来源于伊蚊的负向调节自身免疫的miRNA，构建表达伊蚊miRNA的工程菌株，可防治伊蚊。下列叙述错误的是（）A.RNA干扰导致基因沉默使相关基因虽能转录但无法翻译B.使用伊蚊来源的miRNA进行菌株改良容易使伊蚊产生抗性C.使用伊蚊特异miRNA可提高工程菌的寄主靶向性和特异性D.伊蚊存在能负向调节自身免疫的miRNA说明免疫具有稳态评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)10、植株甲金花菜是一种多年生开花植物，具有多种优良性状，另一种远缘植株乙青花菜存在抗除草剂基因，欲将植株乙细胞中抗除草剂基因引入植株甲中，进行了如下操作。下列相关叙述，正确的是（）

A.过程A取顶芽细胞的操作有利于获得脱毒苗B.过程B中常用PEG诱导原生质体融合C.两个细胞融合完成的标志是再生出细胞壁D.该杂种植株的获得利用了植物细胞的全能性11、转基因作物的推广种植，大幅度提高了粮食产量，取得了巨大的经济效益和生态效益硕果累累的转基因成果在带给人们喜悦的同时，也促使人们关注转基因生物的安全性问题。下列有关转基因作物的安全性的叙述，正确的是（）A.转入抗性基因的植物可能成为“入侵物种”，影响生态系统的稳定性B.抗性基因可能会随花粉传播到田间近缘野生植物体内，造成基因污染C.若目的基因来自自然界，则培育出的转基因植物不会有安全性问题D.大面积种植抗虫棉，有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增大12、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3'-端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上13、如图是单克隆抗体制备过程示意图，1～3代表相关过程，a～e代表相关细胞，其中c是两两融合的细胞。以下叙述错误的是（）

A.过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠产生特异性免疫反应B.过程2的促融方法可采用电融合技术，该技术能击穿核膜促使核融合C.c细胞有三种，每种细胞染色体组数不相等，e细胞是杂交瘤细胞D.过程3是进行抗体检测，并克隆产生阳性细胞的过程14、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶15、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中16、抗菌肽又名多肽抗生素，广泛存在于昆虫以及两栖类动物、哺乳动物体内，具有广谱抗菌活性。其作用原理是在细菌细胞膜上形成跨膜的离子通道，造成细胞内容物泄漏，最终导致细菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽对癌细胞甚至感染了病毒的宿主细胞均具有杀伤作用。下列相关叙述正确的是（）A.从免疫调节的方式分析，抗菌肽参与特异性免疫过程B.抗菌肽改变了细胞膜的通透性，使细胞不能保持正常渗透压而死亡C.利用转基因技术生产抗菌肽时，常选用大肠杆菌作为受体菌D.对抗菌肽的研究可为治疗癌症、新型冠状病毒肺炎等提供新思路17、淀粉经淀粉酶水解后得到的产物是重要的工业原料；但工业化生产常需在高温条件下进行，而现有的淀粉酶耐热性不强，科研人员发现将淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替换为天冬氨酸能产生耐热性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因，将其导入芽孢杆菌内，具体过程如下图所示。最终结果表明，与导入质粒B相比，导入质粒C的芽孢杆菌培养液中更易获得并提纯AmyS2．下列说法错误的是（）

A.获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过基因工程实现的B.构建质粒C时需用限制酶Eco52I和BamHI同时切割质粒B和信号肽基因C.信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网和高尔基体D.可用PCR技术检测芽孢杆菌的DNA上是否插入了AmyS2基因评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)18、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。19、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？____________________________20、回答下列问题。

（1）目前人类对基因________及基因间的________________尚缺乏足够的认识，要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的____________病，既与基因有关，又与环境和________________有关。

（2）生物武器种类包括__________、________、__________，以及经过___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下_____________、_____________、______________生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。21、纤维素酶是一种__________，一般认为它至少包括三种组分，即__________、___________和_______________，前两种酶使纤维素分解成___________，第三种酶将纤维二糖分解成_____________。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被__________成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同样，也可以为人类所利用。22、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。23、第三步：将目的基因导入______24、为了避免外源DNA等因素污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行_____________。而使用的缓冲液并在__________℃存储。25、应用：______（微型繁殖、作物脱毒、神奇的人工种子）、______、细胞产物的工厂化生产。26、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。评卷人得分四、判断题(共1题，共2分)27、对微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最广泛和取得实际应用成果最多的领域，是因为微生物具有生理结构和遗传物质简单、生长繁殖快、对环境因素敏感和容易进行遗传物质操作等优点。（选择性必修3P101）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共7分)28、研究表明生物制剂W对不同种类动物细胞的分裂均有促进作用。有同学设计相关实验来验证这个观点。请根据以下提供的实验材料；完善该实验步骤，并预测实验结果。

实验材料：培养液；正常肝组织、肝癌组织、W、胰蛋白酶。

（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力；只进行原代培养且培养条件适宜）

（1）实验步骤：

①用_________分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。培养液需要中加入__________等营养物质和__________用以灭菌。

②在显微镜下用_____________直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③取灭菌后的培养瓶若干个均分为A、B两组，A组加入正常肝细胞悬液；B组加入_________。从A、B组中各取出一半培养瓶作为C、D组，分别加入_________。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入_____________后摇匀；在显微镜下计数并记录细胞数量。

⑤重复④若干次。

⑥统计并分析所得数据。

（2）预测实验结果（用坐标系和曲线示意图表示）_____________评卷人得分六、综合题(共4题，共24分)29、下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图；据图回答下列问题。

(1).图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是____________。该过程要在培养液中加入的特殊物质是__________，②不同于植物细胞的方法是_____________。经两次筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_______________；

(2).单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_________________________。

(3).克隆羊的成功体现了__________，其生殖方式为____________，若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗?_____________。原因是______________________。

(4).图乙过程的技术具有多种用途，但是不能___________。A．有选择地繁殖某一性别的家畜B．繁殖家畜中的优良个体C．用于保存物种D．改变动物的核基因30、脱水素（DHN）是植物细胞中一种与抗涝害能力密切相关的蛋白质；由DHIN基因编码。研究人员将牡丹的DHN基因转移至拟南芥中，以研究脱水素对植物抗涝性能的影响。请回答下列问题：

（1）从牡丹叶片细胞中提取总RNA，以此为模板进行逆转录，获得__________文库，此类基因文库和基因组文库中的基因在结构上的主要区别是______________________________。

（2）利用PCR技术对目的基因进行扩增，扩增的前提是需要利用一段____________________，以便合成引物。以1个目的基因片段为模板进行扩增，经过5次循环后，消耗的引物数量为__________。

（3）将获得的基因插入质粒，构建基因表达载体，其目的是使目的基因____________________，并可以遗传给下一代；基因表达载体中还要有标记基因，标记基因的作用是__________。

（4）用花粉管通道法将目的基因转入拟南芥，此方法中，基因表达载体借助__________进入受体细胞；为观察转基因拟南芥的抗涝能力，需要将______________________________植株进行涝害处理，观察其生理状态的变化。31、乳糖不耐症是由于乳糖酶（LCT）分泌少；不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科研工作者利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛新品种，给患乳糖不耐症患者带来福音。下图1为转基因低乳糖奶牛培育流程，图2是使用限制酶BamHⅠ切割DNA产生的结果。请分析回答问题：

（1）科学家在构建重组质粒T时；首先采用PCR技术对LCT基因进行扩增，在扩增目的基因的操作过程中，加入的物质有：模板DNA；引物、4种脱氧核苷酸以及________________酶；若一个该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，需要________个引物，产物中共有________个等长的LCT基因片段。

（2）图1中的培育转基因低乳糖奶牛采用的技术有___________。

（3）据图2分析；BamHⅠ的识别序列以及切割位点（用“↓”表示）是___________。

（4）图1中，切割质粒S用的酶是___________，切割后形成1.8kb和8.2kb（1kb＝1000对碱基）两种片段。若用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶切割重组质粒T，获得1.6kb和8.8kb两种片段，则转入的LCT基因长度为________kb。

（5）在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中；可检测到的物质有________（填字母）。

A.LCT基因B.LCTmRNAC.LCT32、2006年；世界上第一头携带了抗疯牛病基因的克隆牛在我国山东淄博诞生，其培育过程如右图所示，据图回答：

（1）从甲牛采集的细胞A在体外培养时一般不超______代。

（2）目前还不能将细胞A用类似植物组织培养的方法获得完整动物个体，原因是______。

（3）细胞B常为乙牛卵巢中采集的______细胞，细胞C一般处于______期，因为此时细胞质中的物质有助于重组细胞分裂分化、恢复______的全能性。目前核移植中普遍使用的去核方法是______。

（4）过程①所用的培养液除了无机盐、有机盐、激素、氨基酸等营养成分外，还需加入______等天然成分。当胚胎发育到______期，可应用______技术；将其植入到丙牛子宫内发育成健康小牛。

（5）胚胎分割技术可提高胚胎的利用率，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意______。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】【分析】

生物体通过无性繁殖所生成的群体或个体称为克隆；由动物体内一个细胞经过无性生殖过程进而发育形成的动物个体为克隆动物。体细胞克隆即取出一个双倍体细胞核移入一个去核的卵细胞，并在一定条件下进行核卵重组，再植入代孕母体中发育成新个体的过程。

【详解】

A；选用卵母细胞作为受体的原因是：卵母细胞体积大、易操作、营养物质多；其细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质等，A正确；

B；代孕母体的作用是在孕育过程中为克隆动物提供营养；不能决定生物的性状，B错误；

C；克隆动物是利用了动物细胞核移植技术；且获得个体，说明了动物细胞核具有全能性，C正确；

D；核移植过程中需要用电刺激促进细胞融合；运用了生物膜的流动性原理，D正确。

故选B。

【点睛】2、D【分析】【分析】

关于限制酶；考生可以从以下几方面把握：

（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。

（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（3）结果：形成黏性末端或平末端。

【详解】

A；限制酶能使磷酸二酯键断裂；DNA连接酶能够使磷酸二酯键重新形成，即这两种酶的作用部位均为磷酸二酯键，A错误；

B；根据题意可知；限制酶BamHⅠ的识别序列及切割位点为G↓GATCC，因此目的基因经BamHI切割后形成的黏性末端是-GATC，B错误；

C；分别用两种限制酶切割；由于形成的黏性末端相同，因此并不能保证目的基因定向插入质粒，C错误；

D；根据题意可知；用BamHⅠ切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，即经两种限制酶处理并连接得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别，D正确。

故选D。3、C【分析】【分析】

由题文和选项的描述可知；该题考查学生对单克隆抗体的制备过程及动物细胞培养的相关知识的识记和理解能力。

【详解】

在单克隆抗体的制备过程中，使用的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合技术，A正确；给幼犬注射CPV后，会激发体液免疫，产生相应的抗体，因此若CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应，B正确；经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞并不都符合人们需要，还需经过克隆化培养和抗体检测，筛选出能分泌CPVMcAb的杂交瘤细胞，C错误；对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜，D正确。4、C【分析】1；培养基的概念、种类及营养构成：

（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出的供其生长繁殖的营养基质。

（2）种类：固体培养基和液体培养基。

（3）营养构成：各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

2；微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种；划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；配制培养基时；应先调pH值后高压蒸汽灭菌，防止杂菌污染，A正确；

B；步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌通过涂布平板法分散；获得单细胞菌落，B正确；

C；步骤③筛选分解尿素的细菌；培养基中应以尿素为唯一氮源，不能加入牛肉膏蛋白胨，C错误；

D；步骤④鉴定细菌分解尿素的能力时；挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，D正确。

故选C。5、D【分析】【分析】

据图分析；酶1可以催化逆转录过程，表示逆转录酶，酶2是限制酶，酶3是DNA连接酶，据此分析作答。

【详解】

A；真核细胞的mRNA转录后通过加工剪切了启动子和终止子；故反转录得到的基因不含启动子和终止子，A正确；

B；酶1促进逆转录的过程；故为逆转录酶，酶2、酶3用于切割目的基因和质粒，为限制酶和DNA连接酶，都能连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键，B正确；

C；酶2是限制酶；限制酶对于DNA序列的识别具有特异性，故图中含fps基因的DNA片段中有酶2的识别序列，C正确；

D；导入fps基因的青蒿植株中基因不一定能过量表达；故必须检测转基因青蒿植株中的青蒿素产量，若产量增高，则说明达到了目的，D错误。

故选D。6、B【分析】【分析】

限制性核酸内切酶(限制酶)能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。EcoRI识别的序列是GAATTG且在G与A之间切割。

【详解】

对PCR产物测序；得到了片段F的完整序列，由于片段F具有被限制酶EcoRI剪切的黏性末端，EcoRI识别的序列是GAATTG且在G与A之间切割，所以5'端应该是AATTC，3'端是GAATT，B正确，ACD错误。

故选B。7、C【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。

【详解】

A；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；制作腐乳利用了毛霉等产生的蛋白酶、脂肪酶，A正确；

B；泡菜“咸而不酸”可能是食盐浓度过高；发酵温度过低抑制乳酸菌产生乳酸所致，B正确；

C；果酒发酵时；为了排出产生的气体，需要将瓶盖拧松放气，但不能打开，否则会被杂菌污染，C错误；

D；制作果醋时；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，该过程中醋酸杆菌能以乙醇作为碳源和能源，D正确。

故选C。8、C【分析】【分析】

限制酶的特点：识别特定的脱氧核苷酸序列；并在特定的位点进行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。

【详解】

A；由图可知；由于Y＝C或T，R＝A或G，因此HindⅠ可以识别多种核苷酸序列，A错误；

B；限制酶切割后可能形成黏性末端或平末端；B错误；

C；不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端；如BamHⅠ和Sau3AⅠ，C正确；

D；限制酶的切割位点在识别序列内部或外部；如Sau3AⅠ，D错误。

故选C。9、B【分析】【分析】

RNA干扰是指通过RNA的介导；特异性降解相应mRNA，从而阻碍了表达的过程。

【详解】

A；由题干可知；RNA干扰是指通过RNA的介导，特异性降解相应mRNA，mRNA是翻译的模板，所以RNA干扰导致基因沉默使相关基因虽能转录但无法翻译，A正确；

B；使用伊蚊来源的miRNA进行菌株改良；该菌株能表达伊蚊miRNA，所以不易使伊蚊产生抗性，B错误；

C；构建表达伊蚊miRNA的工程菌株；该菌株能表达伊蚊miRNA，所以可提高工程菌的寄主靶向性和特异性，C正确；

D；伊蚊存在能负向调节自身免疫的miRNA；当伊蚊自身免疫强烈是可缓解自身免疫，说明免疫具有稳态，D正确。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)10、A:B:C:D【分析】【分析】

分析图可知；该图为植物体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可用酶解法；B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇（PEG）处理；C为培养筛选出所需的杂种细胞；D为照分化，据此答题即可。

【详解】

A；顶端分生组织几乎不带毒；因此，过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗，A正确；

B；B为诱导原生质体融合；可使用聚乙二醇（PEG）促融，B正确；

C；两个植物细胞融合完成的标志是再生出细胞壁；C正确；

D；植物体细胞杂交技术利用了细胞膜的流动性和植物细胞的全能性等原理；D正确。

故选ABCD。11、A:B:D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题包括：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；转基因生物具有某些特殊性质；他们在某地区的竞争能力较强，可能成为“外来入侵物种”，威胁生态系统中其他生物的存在，从而影响生态系统的稳定性，A正确；

B；转基因作物的基因可以通过花粉传播到田间近缘野生植物体内；该近缘物种在通过授粉会造成基因进一步扩散和污染，B正确；

C；即使目的基因来自自然界；培自出的转基因植物仍然可能会有潜在的安全性向题，C错误；

D；大面积种植转基因抗虫棉；有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增加，D正确。

故选ABD。12、B:C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的；若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'-端进行子链合成；B错误；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上，将基因转入动物细胞常用显微注射法，D错误。

故选BCD。13、B:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备涉及细胞融合；细胞培养和细胞筛选；从题干信息图可看出，过程1代表的是注射特异性抗原使小鼠免疫，从而获得能产生相应抗体的B淋巴细胞；过程2是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程；过程3是克隆培养筛选后的阳性细胞，一共需要进行两次，最终获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，此后在培养基或小鼠腹腔中培养。

【详解】

A；图中过程1是通过注射抗原或抗原蛋白来获得产生相应抗体的B淋巴细胞；A正确；

B；过程2是促进细胞融合的过程；其中电融合技术是用低压电流击穿细胞膜促使细胞融合，B错误；

C；c细胞为杂交瘤细胞；有三种，分别是骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞-B淋巴细胞、B淋巴细胞-B淋巴细胞，其中骨髓瘤细胞和B淋巴细胞都有两个染色体组，融合后的细胞都含有4个染色体组，其中e细胞是杂交瘤细胞，C错误；

D；过程3是专一抗体检测及克隆培养筛选后获得阳性细胞；该过程需要多次进行，D正确。

故选BC。14、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。15、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。16、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一样；具有繁殖、遗传、变异、进化的特点，病毒是一种体积非常微小，结构极其简单的生物，仅由蛋白质外壳和内部的遗传物质组成，没有细胞结构。不能独立生活，只能寄生在活细胞内，并在寄主细胞内进行繁殖。一旦离开了活细胞，病毒就无法生存，就会变成结晶体。

2；真菌较细菌作为受体细胞的优势是真菌为真核微生物；含有内质网和高尔基体可对蛋白进行加工和修饰。

【详解】

A；通过题干信息可知；抗菌肽具有广谱抗菌活性，抗菌肽不参与特异性免疫过程，A错误；

B；根据题干信息；抗菌肽“在细菌细胞膜上形成跨膜的离子通道，造成细胞内容物泄漏，最终导致细胞死亡”，即改变了细胞膜的通透性，使细胞不能保持正常渗透压而死亡，B正确；

C；抗菌肽“是广泛存在于昆虫以及两栖类动物、哺乳动物体内的抗菌活性物质”；即来源于真核细胞，如利用转基因技术提高抗菌肽的产量，但最好选择真菌作为受体菌，因为真菌是真核细胞，繁殖速度快，遗传物质少，C错误；

D；根据题干信息；“某些抗菌肽对癌细胞甚至病毒等均具有强有力的杀伤作用”，则对抗菌肽的研究可为治疗癌症、新型冠状病毒肺炎等提供新思路，D正确。

故选BD。

【点睛】17、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的筛选与获取；构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

分泌蛋白的合成：首先；在游离的核糖体中以氨基酸为原料开始多肽链的合成。当合成了一段肽链后，这段肽链会与核糖体一起转移到粗面内质网上继续合成过程，并且边合成边转移到内质网腔内，再经过加工；折叠，形成具有一定空间结构的蛋白质。内质网膜鼓出形成囊泡，包裹着蛋白质离开内质网，到达高尔基体，与高尔基体融合，高尔基体对蛋白质做进一步的加工，然后形成包裹着蛋白质的囊泡转运到细胞膜，与细胞膜融合。

【详解】

A；科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因；因此获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过蛋白质工程和基因工程实现的，A错误；

B；BamHI会破坏AmyS2基因；B错误；

C；在分泌蛋白的合成过程中；信号肽序列可帮助肽链进入内质网，在内质网被切割，因此信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网，但不能引导其进入高尔基体，C错误；

D；可用PCR技术检测芽孢杆菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果经过PCR扩增，不出现扩增产物，说明没有插入基因，反之，则成功插入，D正确。

故选ABC。三、填空题(共9题，共18分)18、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法19、略

【解析】避免接种环温度太高，杀死菌种20、略

【分析】【分析】

【详解】

（1）人类对基因的结构；基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关。

（2）生物武器种类包括致病菌；病毒、生化毒剂、以及经过基因重组的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器。【解析】①.结构②.相互作用③.多基因④.生活习惯⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒剂⑧.基因重组⑨.不发展⑩.不生产⑪.不储存21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】复合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖水解22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】受体细胞24、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】高压灭菌—2025、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】植物繁殖的新途径作物新品种的培育（单倍体育种、突变体利用）26、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。四、判断题(共1题，共2分)27、A【分析】【详解】

微生物具有生理结构和遗传物质简单的优点，便于研究，生长周期短，具有生长繁殖快的优点，遗传物质简单，具有容易进行遗传物质操作的优点，对环境因素敏感，因此对微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最广泛和取得实际应用成果最多的领域，这句话是正确的。五、实验题(共1题，共7分)28、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液；以清除代谢废物；

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质；

（3）适宜的温度和pH；

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

2；实验操作步骤的安排一般如下：第一步：取材随机均分为几组；编号；第二步：不同组自变量的处理；第三步：把上述各组放在无关变量相同且适宜等条件下处理一段时间；第四步：观察并记录比较相应的因变量。根据题意可知，本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用，则该实验的自变量是细胞的种类及是否加入生物制剂W，因变量是细胞悬液中细胞的数目，对细胞直接计数可以采用血球板计数法。

【详解】

（1）①动物细胞培养前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。动物细胞的培养液中需要加入葡萄糖；氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；为了保证无菌的条件，一般在培养液中加入一定量的抗生素。

②在显微镜下可以采用血球计数板直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用；根据题干所给实验材料可知，不同细胞是指正常肝细胞和癌细胞，因此该实验应该设置四组，变量为细胞的种类及是否加入生物制剂W，具体如下：

A组：培养液中加入正常肝细胞悬液；B组：培养液中加入与之等量癌细胞悬液；从A；B组中各取出一半培养瓶作为C、D组；C、D两组：培养液中加入等量的生物制剂W。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④该实验的因变量是计数细胞悬液中细胞的数量；因此各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶摇匀，将细胞分散成单个，然后在显微镜下计数。

（2）预测实验结果；若较长时间培养，因为正常细胞的增殖次数有限，故A组中细胞数量最少，由于W促进细胞增殖的作用，因此C组细胞数量多于A组；而癌细胞可以无限增殖，且由于其细胞膜上的糖蛋白减少，易于扩散和转移，同时失去接触抑制，可大量培养增殖，故B；D两组中细胞数量明显更多，且由于W的促进作用，D组多于B组；由于此实验是验证实验，所以实验结果是加入生物制剂W的实验组比对照组细胞数多，同时癌细胞分裂能力比正常细胞高，故绘制坐标曲线具体如下:

【点睛】

本题考查验证实验，要求学生明确实验的目的，正确区分实验的变量，能够根据题意判断自变量和因变量，然后根据设计实验的单一变量和等量原则，同时结合题干所给的实验材料完善实验设计，并能预测实验结果和绘制相关曲线图表示实验的结果。【解析】胰蛋白酶（胶原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清抗生素血球计数板等量肝癌细胞悬液等量生物制剂W胰蛋白酶（胶原蛋白酶）六、综合题(共4题，共24分)29、略

【分析】【分析】

分析甲图：图甲为单克隆抗体制备过程；图中①表示给小鼠注射特定的抗原蛋白，②表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，③表示筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，④表示杂交瘤细胞的体内培养。

分析乙图：图乙表示克隆羊培育过程，图中a表示细胞核移植，b表示胚胎移植技术。【小问1】

图甲是单克隆抗体制备过程；图乙是克隆羊培育过程，都必须用到动物细胞培养。动物细胞培养时，通常要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染；植物体细胞杂交可以采用物理（离心；振动、电刺激）和化学（聚乙二醇）的方法，动物细胞融合过程中，除了利用这两种方法以外，还可以用灭活的病毒诱导。两次筛选获得的杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖又可分泌特异性抗体。【小问2】

单克隆抗体能定向攻击癌细胞；主要是利用其特异性。【小问3】

克隆羊的成功体现了动物细胞核具有全能性；其生殖方式为无性繁殖，若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状不是全部像白面绵羊，因为卵细胞细胞质中的线粒体遗传物质也能控制某些性状。【小问4】

动物体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程；促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等，但是不能改变动物的核基因，只有通过可遗传变异改变动物的核基因。故选D。

【点睛】

本题结合图解，考查单克隆抗体的制备、核移植等知识，要求考生识记单克隆抗体制备的具体过程；识记核移植的具体过程，能结合所学的知识准确作答。【解析】【小题1】①.动物细胞培养②.抗生素③.灭活的病毒④.既能无限增殖又可分泌特异性抗体。

【小题2】特异性。

【小题3】①.动物细胞核具有全能性②.无性繁殖③.不是④.卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状。

【小题4】D30、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）

利用RNA逆转录形成的基因文库为cDNA文库（部分基因文库）；cDNA文库中的基因不含启动子；终止子和非编码（或内含子）序列。

（2）

引物需要根据一段已知目的基因的核苷酸序列来合成；经过5次扩增后，DNA分子的数量由1个变为25＝32个；新增2×（32－1）＝62条DNA链，故需要消耗62个引物。

（3）

将获得的基因插入质粒；构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代；标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

（4）

花粉