T-WFSX 007.8-2024 动物法医学司法鉴定 涉案动物病理学检材的提取、固定、取材及保存规范鉴定标准

ICCSB41动物法医学司法鉴定涉案动物病理学检材的提取、固定、取材及保存规范鉴定标准2024-08-26发布2024-09-04实施T/WFSX007.8一2024 一、范围 二、术语和定义 1三、病理检材的提取 1、提取准备 2、提取时机 3、提取方法 2四、病理检材的固定 31、固定剂选择 32、固定方法 4五、病理检材的取材 41、取材准备 42、取材要求 53、取材方法 5六、病理检材的保存 51、保存条件 52、保存容器 63、保存期限 6T/WFSX007.8一2024本文件按照按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第一部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责。本文件由潍坊市兽医协会标准化委员会与动物司法鉴定委员会提出。本文件由潍坊市兽医协会归口。本文件技术支持单位：潍坊市市场监管发展服务中心。本文件起草单位：潍坊市金山兽医院有限公司、山东牧院、潍坊市临朐县农业农村局寺头畜牧兽医站、安丘市石堆镇畜牧兽医站、山东骏琳马术学院、潍坊学院、青岛市宝发动物医院有限公司、潍坊市兽医协会动物法医学委员会、青州爰佳宠医院、潍坊安宠宠物医院、山东晟华检测技术有限公司、潍坊市兽医协会、辽宁国托检测有限公司、江苏国托检测有限公司、潍坊咪果宠物医院。本文件主要起草人：王金山、王升宝、刘文学、唐璐、刘海源、马廷法、张召彬、玄承烨、姚冬芹、付文卿、范晶晶、张悦、张春光、杨万郊、郭宝发、于志辉、丘玉海、囯兴伟、殷治玉、孙大海、李智慧、王璐、韩海洋、韩成良、王升鑫、王凯越、管琳、刘秋晨、沙楚、宋蕙男、刘艳、单春乔、翟宏旭、李良佳。本文件为首次发布。1T/WFSX007.8一2024涉案动物病理学检材的提取、固定、取材及保存规范鉴定标准从动物机体获取的，用于病理学检查、分析和诊断的组织、运用适当的技术和方法，从动物体采集病理采用化学试剂或物理方法使病理检材中的生物大分子保持原有状态和从已固定的病理检材中选取适宜部分用于后续运用适当的条件和方法对病理检材进行储存，以维持其质准备解剖刀、手术剪、镊子、止血钳、注射器、采样管、无菌棉签、载玻片、离器械和工具使用前应进行清洁、消毒和灭菌处操作人员应穿戴一次性无菌手术衣、手套、口罩、护目镜、帽子等防护装备，防止自准备好记录表格、标签、记号笔等，用于记录检材的来源、种类、采集时间T/WFSX007.8一2024对于自然死亡的动物，应在死亡后尽快（一般不超过6-24小时，变类型等因素确定）进行检材提取。在高温、潮湿等环境条件下，应尽快缩短提取时对于实验动物，应根据实验设计和研究目的，在预定的时间点进行检材提取。如果实验对于临床病例，应在动物接受治疗前或治疗过程中，根据疾病的发展和诊断需要，适时根据动物的种类、体型、病变部位和研究目的，选择合适的解剖部位和切口位置。在在切取组织检材时，应避免过度牵拉、挤压和损伤组织，保持组织的原有形态和结构。或不同类型的病变，应分别提取检材，并做好标记和记录，注明检材的来源、病变类型完整地摘取病变器官或目标器官，在摘取过程中应注意保护器官的血管、神经和去除器官表面的结缔组织、脂肪、筋膜和其他附着物，用生理盐水轻轻冲洗将摘取的器官检材放入无菌容器或保鲜袋中，做好标记和记录，尽），22G针头），在无菌操作条件下进行穿刺采集。穿刺部位应选择在积液较多选择在肋间隙、腹腔穿刺可选择在脐与耻骨联合在穿刺过程中，应缓慢进针，避免损伤内脏器官和血管。当针头进入体腔后，缓慢抽取），T/WFSX007.8一2024采集完成后，立即将离心管密封，做好标记和记录，尽快进行离心处理使用无菌刮片、毛刷或吸管等工具，采集病变部位的细胞，将细胞均匀涂抹在载玻对于液体样本（如血液、脑脊液、尿液等），可采用离心涂），采集血液时，可通过静脉穿刺、心脏穿刺、动脉穿刺等方法进行。对于小型动物（），），前肢静脉、后肢静脉或颈静脉穿刺的方法采集血液；对于大），前腔静脉或尾静脉穿刺的方法采集血液；对于实验动物的心脏穿刺采血，应在麻醉状态血液采集完成后，根据检测目的和后续处理方法，将血液收集到抗凝管（如肝素二钾抗凝管等）或促凝管中。抗凝管中的血液应轻轻颠倒混匀，防止血液凝固；促对于麻醉状态下的动物，可采用输尿管插管法或膀胱造瘘法采集尿液。输尿管插管法是尿管，将尿液引流到收集容器中；膀胱造瘘法是在动物的膀胱上进行手术造瘘，将尿对于小型动物，可使用唾液收集管或吸附棉棒等工具，刺激动物口腔分泌唾液，收集唾动物，可使用口腔引流装置或唾液收集器等10%中性福尔马林溶液是一种常用的固定剂，T/WFSX007.8一2024性保存较好，适用于免疫组织化学、原位杂交等需要检测抗原和核根据特殊的研究目的和检测要求，还可选择戊二醛、醋将提取的组织或器官检材放入装有固定剂的在固定过程中，应定期轻轻搅动固定剂，使检材与固定剂充分接触，确保固定均匀。固），T/WFSX007.8一2024准备好取材所需的工具，如锋利的切片刀、剪刀、镊子、直尺、载玻片、包取材应在清洁、通风良好的实验室或专用取材室进行，避免环境污染和交叉污取材部位应根据病变的特点和研究目的进行选择，包括病变中心、病变与正常正常组织等。对于多灶性病变或弥漫性病变，应在多个部取材组织块的大小应根据后续制片和检测方法确定。一般来说，用于常0.2cm×0.2cm×0.2cm-0.3cm×0.3cm×0.3cm；用于冰冻切片的组织块大小为0.5cm×0.5cm根据研究需要和病变的复杂性，确定取材的数量。一般来说，对于单个病变部位，应至织；对于多个病变部位或不同类型的病变，应分别取材，使用切片刀或剪刀，从固定后的组织或器官中切取所需的组织块。取材时应注意保向，避免过度牵拉和挤压组织。对于质地较硬的组织，可先将组织进行软化处），将切取的组织块放入包埋盒中，做好标记和记录，注明组织的来源、病变类型、取材部对于细胞涂片，使用镊子或吸管将涂片从载玻片上取下，放入包埋盒中。对于离心后的），T/WFSX007.8一20