2025年高考生物复习之小题狂练300题（选择题）：现代生物技术及应用（10题）

第1页（共1页）2025年高考生物复习之小题狂练300题（选择题）：现代生物技术及应用（10题）一．选择题（共10小题）1．研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，相关说法正确的是（）A．步骤①和⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和TREM2抗体 B．步骤③筛选得到的细胞需传代培养以防止出现接触抑制 C．植物组织培养需要的气体条件和步骤⑥相同 D．TREM2单克隆抗体的使用可以增强免疫系统的监视功能2．关于“DNA的粗提取与鉴定”（实验Ⅰ）和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”（实验Ⅱ）的实验操作，下列相关叙述正确的是（）A．实验Ⅰ中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA B．实验Ⅰ中，将白色丝状物直接加入二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA C．实验Ⅱ中，PCR实验所需的微量移液器、枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理 D．实验Ⅱ中，采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物，加样前应先接通电源3．尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如图所示。下列相关叙述错误的是（）A．分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成NH3 B．振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中 C．稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目 D．图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力4．科研人员将寒带地区海鱼中的抗冻基因转入千禧果细胞中，成功培育出抗冻千禧果。如图为培育过程中使用的Ti质粒示意图，其中Vir区的基因活化能促进T﹣DNA的加工和转移，下列叙述正确的是（）A．构建基因表达载体时，最好选择限制酶Ⅱ和Ⅲ来切割质粒 B．利用PCR扩增抗冻基因，需提前检测抗冻基因的全部碱基序列 C．Vir区的基因活化促进抗冻基因整合到千禧果细胞的染色体DNA上 D．利用含卡那霉素的培养基可筛选出成功导入抗冻基因的千禧果细胞5．原浆苹果醋的简要工艺流程为：苹果采摘→挑选清洗→破碎榨汁→酵母发酵→醋酸发酵→陈酿2年左右。下列有关叙述正确的是（）A．酵母发酵结束后，改变通气条件和升高温度有利于醋酸发酵 B．工艺流程中的“酵母发酵”发生在苹果细胞的细胞质基质中 C．酿醋过程中发酵液的pH逐渐降低，与酿酒制作过程中相反 D．醋酸发酵阶段中释放的CO2是由醋酸菌的线粒体基质释放的6．通过植物细胞工程对光果甘草进行培养以获得药物甘草西定，过程如图所示。下列相关叙述正确的是（）A．过程③④⑥细胞分裂方式相同，培养基中生长素与细胞分裂素比例也相同 B．过程④常用射线或化学物质处理即可获得大量所需的突变体植株丙 C．植株丁还可以直接用低温或秋水仙素处理愈伤组织后培养获得 D．过程⑥中甘草西定可通过植物细胞培养获得，该过程体现了植物细胞的全能性7．“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列相关叙述正确的是（）A．诱导甘蓝根尖细胞与白菜叶肉细胞原生质体融合，观察到叶绿体即可筛选出异种融合细胞 B．用灭活的仙台病毒处理B淋巴细胞与骨髓瘤细胞，用来筛选出杂交瘤细胞 C．培育耐盐转基因植株时，用特异性探针进行分子杂交显示出杂交带即可筛选耐盐植株 D．制备动物乳腺生物反应器时，对滋养层细胞进行SRY基因鉴定阳性可筛选出雄性胚胎8．塑化剂（DEHP，化学式为C24H3O4）可提高塑料制品的性能，在生产上被广泛使用。但残留于土壤、水源里的DEHP不易被降解，属于2B类致癌物。我国科研工作者已从土壤中成功筛选出可降解DEHP的降解菌，如铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌等，筛选实验的主要步骤如图。下列相关叙述错误的是（）A．接种前固体培养基和摇瓶内的培养基需高温灭菌以防杂菌污染，但土壤样品不能灭菌处理 B．图中虚线框培养瓶中的培养基属于液体选择培养基，DEHP应为唯一碳源 C．培养若干天后，应选择DEHP含量高的培养液进行接种以进一步扩增目的菌 D．若筛选出的目的菌为枯草芽孢杆菌，对其扩大培养易选用液体培养基，温度宜控制在30～37℃范围9．某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列分析不正确的是（）2%次氯酸钠处理时间（min）8101275%酒精处理时间（min）203040203040203040污染率（%）25.621.113.322.216.712.22017.88.9褐化率（%）008.905.614.47.816.716.7注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。A．消毒处理时间越长，组织培养成功率越高 B．消毒处理时间越长，外植体的污染率越低 C．诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中一般不需要光照 D．组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根10．黑猪具有耐粗饲、产仔率高、抗病力强等优良特征，加之皮薄骨细、肉质优、口感佳，因此备受消费者喜爱。然而，由于黑猪生长速度慢，几临濒危，急需进行种质资源保护。体细胞核移植技术因具有继承亲本完整性状、实验周期短、保种效力强的优点而备受关注。如图表示培育克隆猪的流程。下列叙述错误的是（）A．甲猪卵母细胞去核前，需将其在体外培养至MⅡ期，有助于细胞核全能性的表达 B．过程①可用电刺激或Ca2+载体等方法激活重构胚，重构胚具有发育成完整个体的潜力 C．过程②表示胚胎移植，进行该过程前需对代孕乙猪进行同期发情处理，使生理状态相似 D．幼仔猪细胞核遗传物质绝大部分来自黑猪，少部分来自甲猪

2025年高考生物复习之小题狂练300题（选择题）：现代生物技术及应用（10题）参考答案与试题解析一．选择题（共10小题）1．研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，相关说法正确的是（）A．步骤①和⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和TREM2抗体 B．步骤③筛选得到的细胞需传代培养以防止出现接触抑制 C．植物组织培养需要的气体条件和步骤⑥相同 D．TREM2单克隆抗体的使用可以增强免疫系统的监视功能【考点】单克隆抗体及其应用．【专题】模式图；克隆技术．【答案】D【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞；（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体；（3）克隆化培养和抗体检测；（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。【解答】解：A、步骤①向小鼠注射TREM2蛋白，让小鼠发生免疫反应，获得能产生抗体的B淋巴细胞；步骤⑤向小鼠腹腔注射杂交瘤细胞，目的是获得单克隆抗体，A错误；B、步骤③筛选得到的是杂交瘤细胞，能无限增殖，传代培养不会出现接触抑制，B错误；C、动物细胞培养过程中加入CO2用于调节培养液的pH值，而植物组织培养的过程中不需要CO2培养箱，C错误；D、TREM2单克隆抗体能与TREM2特异性结合，提高肿瘤免疫疗法的疗效，进而增强免疫系统的监视功能，D正确。故选：D。【点评】本题考查单克隆抗体的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力、运用所学知识综合分析问题的能力。2．关于“DNA的粗提取与鉴定”（实验Ⅰ）和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”（实验Ⅱ）的实验操作，下列相关叙述正确的是（）A．实验Ⅰ中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA B．实验Ⅰ中，将白色丝状物直接加入二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA C．实验Ⅱ中，PCR实验所需的微量移液器、枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理 D．实验Ⅱ中，采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物，加样前应先接通电源【考点】DNA的粗提取与鉴定；DNA片段的扩增与电泳鉴定．【专题】正推法；基因工程．【答案】A【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被呈现蓝色。【解答】解：A、实验Ⅰ中，DNA不溶于酒精溶液，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA，A正确；B、实验Ⅰ中，将白色丝状物溶解在NaCl溶液中，然后再加入二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA，B错误；C、微量移液器不需要高压灭菌处理，C错误；D、采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物，应先加样后接通电源，D错误。故选：A。【点评】本题主要考查DNA的粗提取与鉴定和DNA片段的扩增及电泳鉴定等相关知识点，意在考查学生对相关知识点的理解和实际应用的能力。3．尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如图所示。下列相关叙述错误的是（）A．分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成NH3 B．振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中 C．稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目 D．图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用．【答案】D【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30～300之间的实验组平板进行计数。【解答】解：A、分解尿素的细菌能合成脲酶，在脲酶的催化下能将尿素分解成NH3和二氧化碳，A正确；B、振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中，有利于后续的梯度稀释，B正确；C、稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目，一般情况下该方法统计的活菌数目比实际值偏低，C正确；D、图中纯化培养得到的微生物未必都具有分解尿素的能力，因此还需要对得到的微生物进行鉴定，D错误。故选：D。【点评】本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。4．科研人员将寒带地区海鱼中的抗冻基因转入千禧果细胞中，成功培育出抗冻千禧果。如图为培育过程中使用的Ti质粒示意图，其中Vir区的基因活化能促进T﹣DNA的加工和转移，下列叙述正确的是（）A．构建基因表达载体时，最好选择限制酶Ⅱ和Ⅲ来切割质粒 B．利用PCR扩增抗冻基因，需提前检测抗冻基因的全部碱基序列 C．Vir区的基因活化促进抗冻基因整合到千禧果细胞的染色体DNA上 D．利用含卡那霉素的培养基可筛选出成功导入抗冻基因的千禧果细胞【考点】基因工程的操作过程综合．【专题】模式图；基因工程．【答案】C【分析】1、PCR是一种在体外快速扩增DNA的技术，其原理是DNA双链复制，包括变性、复性、延伸三个步骤。2、基因工程的基本操作程序是：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。【解答】解：A、使用限制酶Ⅱ会破坏Vir区的基因，Vir区的基因活化能促进T−DNA的加工和转移，是T−DNA转移整合到受体细胞DNA上必不可少的，不能选限制酶Ⅱ，A错误；B、使用PCR技术扩增抗冻基因，只需要知道抗冻基因两端碱基序列设计引物即可，B错误；C、农杆菌侵染植物细胞后，Ti质粒上的T−DNA能转移到被侵染的细胞并整合到该细胞的染色体DNA上，所以Vir区基因活化可促进抗冻基因整合到千禧果细胞的染色体DNA上，C正确；D、成功的植株染色体DNA上整合了T﹣DNA区，应用含四环素的培养基进行筛选，D错误。故选：C。【点评】本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。5．原浆苹果醋的简要工艺流程为：苹果采摘→挑选清洗→破碎榨汁→酵母发酵→醋酸发酵→陈酿2年左右。下列有关叙述正确的是（）A．酵母发酵结束后，改变通气条件和升高温度有利于醋酸发酵 B．工艺流程中的“酵母发酵”发生在苹果细胞的细胞质基质中 C．酿醋过程中发酵液的pH逐渐降低，与酿酒制作过程中相反 D．醋酸发酵阶段中释放的CO2是由醋酸菌的线粒体基质释放的【考点】果酒、果醋的制作．【专题】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】A【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。【解答】解：A、醋酸发酵需要通入氧气，且温度比果酒发酵温度高，所以酵母发酵结束后，改变通气条件和升高温度有利于醋酸发酵，A正确；B、果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，其场所是细胞质基质，因此工艺流程中的“酵母发酵”发生在酵母菌的细胞质基质中，B错误；C、果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中产生二氧化碳，发酵液pH也逐渐降低，C错误；D、醋酸菌属于原核细胞，只有核糖体一种细胞器，没有线粒体，D错误。故选：A。【点评】本题主要考查果酒、果醋的制作等相关知识点，意在考查学生对相关知识点的理解和掌握。6．通过植物细胞工程对光果甘草进行培养以获得药物甘草西定，过程如图所示。下列相关叙述正确的是（）A．过程③④⑥细胞分裂方式相同，培养基中生长素与细胞分裂素比例也相同 B．过程④常用射线或化学物质处理即可获得大量所需的突变体植株丙 C．植株丁还可以直接用低温或秋水仙素处理愈伤组织后培养获得 D．过程⑥中甘草西定可通过植物细胞培养获得，该过程体现了植物细胞的全能性【考点】植物的组织培养．【专题】常规题型；模式图；植物的组织培养．【答案】C【分析】据图所知：①为外植体接种，②脱分化，③再分化，④诱变育种，⑤植物体细胞杂交，⑥获得药物。【解答】解：A、⑥还是在愈伤组织培养基中培养，③④是诱导生根生芽的培养基，其激素比例不相同，A错误；B、突变具有不定向性，不一定获得大量丙，后期还需筛选，B错误；C、低温和秋水仙素处理可以让染色体加倍，C正确；D、⑥过程没有形成完整植株或其他各种细胞，不能体现植物细胞的全能性，D错误。故选：C。【点评】本题考查知识点较多，学生应注意掌握培养基的配制、突变的特点、植物组织培养和植物细胞培养的区别知识。7．“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列相关叙述正确的是（）A．诱导甘蓝根尖细胞与白菜叶肉细胞原生质体融合，观察到叶绿体即可筛选出异种融合细胞 B．用灭活的仙台病毒处理B淋巴细胞与骨髓瘤细胞，用来筛选出杂交瘤细胞 C．培育耐盐转基因植株时，用特异性探针进行分子杂交显示出杂交带即可筛选耐盐植株 D．制备动物乳腺生物反应器时，对滋养层细胞进行SRY基因鉴定阳性可筛选出雄性胚胎【考点】植物体细胞杂交技术及应用；单克隆抗体及其应用；体外受精和胚胎移植．【专题】正推法；基因工程；克隆技术．【答案】D【分析】1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：项目细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性，（细胞的全能性）去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后，诱导细胞融合离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导制备单克隆抗体的技术之一2、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【解答】解：A、诱导甘蓝根尖细胞与白菜叶肉细胞原生质体融合，观察到叶绿体不一定能筛选出异种融合细胞，也可能是白菜叶肉细胞自身融合的细胞，A错误；B、用灭活的仙台病毒处理B淋巴细胞与骨髓瘤细胞，用来诱导两者融合，但不能用于筛选出杂交瘤细胞，B错误；C、培育耐盐转基因植株时，用特异性探针进行分子杂交显示出杂交带只可筛选含有耐盐基因的植株，但含有耐盐基因的植株中的耐盐基因不一定能表达，因此不一定能筛选耐盐植株，C错误；D、只有雄性个体的Y染色体上含有SRY基因，因此制备动物乳腺生物反应器时，对滋养层细胞进行SRY基因鉴定阳性可筛选出雄性胚胎，D正确。故选：D。【点评】本题考查细胞工程、基因工程的相关知识，要求考生识记诱导细胞融合的方法；识记基因工程的技术及应用，能结合所学的知识准确答题。8．塑化剂（DEHP，化学式为C24H3O4）可提高塑料制品的性能，在生产上被广泛使用。但残留于土壤、水源里的DEHP不易被降解，属于2B类致癌物。我国科研工作者已从土壤中成功筛选出可降解DEHP的降解菌，如铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌等，筛选实验的主要步骤如图。下列相关叙述错误的是（）A．接种前固体培养基和摇瓶内的培养基需高温灭菌以防杂菌污染，但土壤样品不能灭菌处理 B．图中虚线框培养瓶中的培养基属于液体选择培养基，DEHP应为唯一碳源 C．培养若干天后，应选择DEHP含量高的培养液进行接种以进一步扩增目的菌 D．若筛选出的目的菌为枯草芽孢杆菌，对其扩大培养易选用液体培养基，温度宜控制在30～37℃范围【考点】选择培养基；微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用．【答案】C【分析】选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。【解答】解：A、接种前固体培养基和摇瓶内的培养基需高温灭菌以防杂菌污染，土壤不能灭菌以免杀死微生物，A正确；B、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基，要筛选降解DEHP的微生物，DEHP应为唯一碳源，培养基为选择培养基，B正确；C、培养若干天后，应选择培养瓶中DEHP含量低（说明被分解的多）的培养液接入新培养液中以扩增目的菌，C错误；D、枯草芽孢杆菌为细菌，其培养温度为30～37C范围，故若筛选出的目的菌为枯草芽孢杆菌，对其扩大培养易选用液体培养基，温度宜控制在30～37℃范围，D正确。故选：C。【点评】本题考查微生物实验室培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。9．某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列分析不正确的是（）2%次氯酸钠处理时间（min）8101275%酒精处理时间（min）203040203040203040污染率（%）25.621.113.322.216.712.22017.88.9褐化率（%）008.905.614.47.816.716.7注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。A．消毒处理时间越长，组织培养成功率越高 B．消毒处理时间越长，外植体的污染率越低 C．诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中一般不需要光照 D．组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根【考点】植物的组织培养．【专题】数据表格；植物的组织培养．【答案】A【分析】表格分析：本实验的自变量为次氯酸钠处理时间和酒精处理时间，因变量为污染率和褐化率。【解答】解：A、由表格信息可知，消毒处理时间越长褐化率越高，死亡率越高，组织培养成功率越低，A错误；B、表中数据显示消毒处理时间越长污染率越低，B正确；C、导愈伤组织形成过程中一般不需要光照，因为光可以诱导产生微管组织，不利于愈伤组织形成，C正确；D、生长素和细胞分裂素的比值大时有利于根的形成，因此提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根，D正确。故选：A。【点评】本题以表格的形式，考查了植物组织培养的相关知识，要求学生理解植物组织培养的过程包括脱分化和再分化，以及各过程的培养条件。10．黑猪具有耐粗饲、产仔率高、抗病力强等优良特征，加之皮薄骨细、肉质优、口感佳，因此备受消费者喜爱。然而，由于黑猪生长速度慢，几临濒危，急需进行种质资源保护。体细胞核移植技术因具有继承亲本完整性状、实验周期短、保种效力强的优点而备受关注。如图表示培育克隆猪的流程。下列叙述错误的是（）A．甲猪卵母细胞去核前，需将其在体外培养至MⅡ期，有助于细胞核全能性的表达 B．过程①可用电刺激或Ca2+载体等方法激活重构胚，重构胚具有发育成完整个体的潜力 C．过程②表示胚胎移植，进行该过程前需对代孕乙猪进行同期发情处理，使生理状态相似 D．幼仔猪细胞核遗传物质绝大部分来自黑猪，少部分来自甲猪【考点】动物细胞核移植技术；体外受精和胚胎移植．【专题】模式图；胚胎工程．【答案】D【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。【解答】解：A、从甲猪获取卵母细胞后，需将其在体外培养至MⅡ期，通常用显微操作法去核，有助于细胞核全能性的表达，A正确；B、过程①可用用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，重构胚具有发育成完整个体的潜力，B正确；C、将重构胚培养至桑葚胚或囊胚期后，需经胚胎移植至代孕母猪子宫内进一步发育为个体。过程②表示胚胎移植，进行该过程前需对代孕乙猪进行同期发情处理，使生理状态相似，C正确；D、幼仔猪细胞核遗传物质来自黑猪，细胞质遗传物质来自甲猪，D错误。故选：D。【点评】本题考查胚胎工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。

考点卡片1．果酒、果醋的制作【知识点的认识】（1）利用酵母菌制作果酒的原理是：在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O6+6O26CO2+12H2O+能量在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量（2）利用醋酸菌制作果醋的原理当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。C6H12O6+2O2CH3COOH（醋酸）+2H2O+2CO2+能量C2H5OH+O2CH3COOH（醋酸）+H2O+能量（提示：在变酸的酒的表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的）【命题方向】下列关于果酒、果醋制作的叙述，错误的是（）A．糖源不足时乙醇可以作为果醋发酵的底物B．酵母菌和醋酸杆菌都属于异养型微生物C．乙醇发酵后期可向培养液中加入无菌水进行适当稀释再制作果醋D．在变酸的果酒表面观察到的菌膜是酵母菌在液面大量繁殖形成的分析：1、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。2、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。解答：A、当缺少糖源时和有氧条件下，醋酸菌可将乙醇（酒精）氧化成醋酸，故糖源不足时乙醇可以作为果醋发酵的底物，A正确；B、酵母菌和醋酸杆菌都属于异养型微生物，需要利用现成的有机物维持生命活动，B正确；C、乙醇发酵后期就大量的二氧化碳和酒精，可向培养液中加入无菌水进行适当稀释再制作果醋，醋酸菌可将乙醇氧化成醋酸，C正确；D、在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，D错误。故选：D。点评：本题考查传统发酵技术的相关知识，要求考生识记果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作原理等知识，意在考查考生的识记和分析能力。【解题思路点拨】掌握果酒、果醋的制作的相关知识是解题的关键。2．选择培养基【知识点的认识】培养基按照用途可分为类型和作用选择培养基和鉴别培养基。选择培养基是指只允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。【命题方向】下列关于微生物的选择培养的叙述，错误的是（）A.用纤维素作为唯一碳源的选择培养基分离获得纤维素分解菌B.用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离获得尿素分解菌C.用缺少有机碳源的选择培养基分离获得自养型微生物D.用含有青霉素的选择培养基分离获得酵母菌和细菌分析：生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。培养基一般都含有水、碳原、氮源和无机盐等营养物质。牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。解答：A、筛选纤维素分解菌需以纤维素作为唯一的碳源，A正确；B、筛选尿素分解菌需以尿素作为唯一氮源，B正确；C、自养型微生物可以自身合成有机物，比如一些微生物可以利用光合作用，利用大气中的二氧化碳合成有机物，对于这类微生物的培养，培养基中可以不加有机碳源，利用空气中的二氧化碳即可。故用缺少有机碳源的选择培养基分离获得自养型微生物，C正确；D、青霉素是一种抗生素，抑制细菌的生长和增殖，对真核细胞不起作用，酵母菌可以在含有青霉素的选择培养基分离出来，但细菌不可分离出来，D错误。故选：D。点评：本题考查培养基的相关知识，要求考生识记培养基的种类及功能，能结合所学的知识准确判断各选项。【解题思路点拨】分清选择培养基和鉴别培养基的特点，针对题干具体分析，不要混淆。3．微生物的选择培养（稀释涂布平板法）【知识点的认识】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：1．分离菌株的思路（1）自然界中目的菌株的筛选①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。（2）实验室中目的菌株的筛选①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源．缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素．配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。2．统计菌落数目的方法（1）稀释涂布平板法（间接）①当样品的稀释庋足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。（2）利用显微镜直接计数3．分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。4．实验流程土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。【命题方向】自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中氮气的细菌，科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图所示。下列叙述正确的是（）A.培养自生固氮菌时，可用牛肉膏蛋白胨培养基，接种完成后培养皿应倒置B.该纯化培养的方法是稀释涂布平板法，统计细菌数量时通常会低于真实值C.步骤①获取土壤一般来自深层土壤，为防止其他杂菌污染可对获取土壤灭菌处理D.若④的平板上菌落平均数为58个，则每克土壤中含有的固氮菌约5.8×105个分析：培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对特殊营养物质和氧气的要求。解答：A、培养自生固氮菌时，一般不需要添加氮源，而牛肉膏蛋白胨培养基含有氮源，A错误；B、该纯化培养的方法是稀释涂布平板法，由于多个细菌连在一起时长出来的是单个菌落，因此统计细菌数量时通常会低于真实值，B正确；C、步骤①获取土壤一般来自浅层土壤，对土壤灭菌处理时也杀死了固氮菌，C错误；D、10g土壤加到90mL无菌水后，稀释了10倍，在④中相当于稀释了104倍，若在④的平板上统计的菌落的平均数量为58个，则每克土壤中含有的固氮菌为58÷0.1×104＝5.8×106个，D错误。故选：B。点评：本题主要考查微生物培养的相关知识，难度适中。【解题思路点拨】掌握稀释涂布平板法的相关步骤，结合题干进行分析解答4．植物的组织培养【知识点的认识】（1）植物组织培养：将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。（2）植物组织培养的原理是：植物细胞的全能性（3）在一定的激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞失去特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块（愈伤组织）的过程。愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程，称为再分化。（4）生长素与细胞分裂素的用量比值高，有利于根的分化，抑制芽的形成；用量比值低，有利于芽的分化，抑制根的形成；用量比值适中，促进愈伤组织的形成。【命题方向】下列有关植物组织培养的说法中，错误的是（）A．再分化过程中，不同的细胞内合成了部分功能不同的蛋白质B．脱分化与再分化过程所使用的培养基中激素的浓度及比例不同C．再分化过程在实验室或植物组织培养车间进行，需要避光处理D．再分化过程中，核遗传物质没有发生改变，但mRNA有变化分析：离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。解答：A、再分化过程中，细胞会进行分化，细胞内基因选择性表达，不同细胞内合成了功能不同的特异性蛋白质，A正确；B、在植物组织培养培养过程中，使用不同的植物激素能够人为地控制细胞的脱分化和再分化，故脱分化与再分化二者使用的培养基主要是激素用量及比例的不同，B正确；C、脱分化需要避光，而再分化的过程中会形成根和芽，芽的形成需要光照，有光照才能使其形成叶绿素，故再分化过程需要光照处理，C错误；D、再分化过程中，细胞会进行分化，细胞内基因选择性表达，核遗传物质没有发生改变，但在表达不同的细胞中转录出的信使mRNA会不同，D正确。故选：C。点评：本题考查植物组织培养，要求考生掌握植物组织培养激素，识记实验原理、操作步骤及注意事项，结合选项进行作答。【解题思路点拨】掌握植物的组织培养的相关知识是解题的关键。5．植物体细胞杂交技术及应用【知识点的认识】（1）植物体细胞杂交技术：将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。（2）去除植物细胞壁，获得原生质体的方法：酶解法（纤维素酶和果胶酶处理）。（3）诱导原生质体融合的方法：物理法：电融合法、离心法；化学法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+_高pH融合法。（4）植物体细胞杂交的原理原生质体融合的过程利用了细胞膜的流动性，杂种细胞发育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。（5）植物体细胞杂交的意义打破生殖隔离，克服了远缘杂交育种，培育植物新品种。【命题方向】拟矮牵牛的原生质体在X培养基（A）上只能形成小细胞团，不能形成植株，在含放线菌素﹣D的X培养基（B）上培养结果相同；矮牵牛的原生质体在A上能分化成植株，但在B上不能生长。在A、B上利用植物体细胞杂交技术均可培养出可育杂种矮牵牛。下列说法错误的是（）A．酶解法制备原生质体时，应在等渗或稍微高渗溶液中进行B．只有杂种细胞能在B上形成植株C．获得的杂种矮牵牛可育，说明拟矮牵牛和矮牵牛属于同一物种D．植物体细胞杂交技术应用的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性分析：植物体细胞杂交的具体过程：解答：A、酶解法去壁制备原生质体应在等渗或略高渗透压的溶液中进行，防止原生质体在低渗溶液中会吸水涨破，A正确；B、根据题干信息“拟矮牵牛的原生质体在X培养基（A）上只能形成小细胞团，不能形成植株，在含放线菌素﹣D的X培养基（B）上培养结果相同；矮牵牛的原生质体在A上能分化成植株，但在B上不能生长”，说明只有杂种细胞能在含放线菌素﹣D的X培养基上形成植株，B正确；C、通过植物体细胞杂交获得的杂种矮牵牛，不论拟矮牵牛和矮牵牛是否属于同一物种，杂种矮牵牛都可育，C错误；D、植物体细胞杂交技术利用了细胞膜的流动性和植物细胞的全能性的原理，D正确。故选：C。点评：本题考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的具体过程及意义，能结合所学的知识准确判断各选项。【解题思路点拨】6．单克隆抗体及其应用【知识点的认识】1、抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体．从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差．2、单克隆抗体的制备（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞（2）获得杂交瘤细胞①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体．（3）克隆化培养和抗体检测（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取3、单克隆抗体的应用（1）作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点．（2）用于治疗疾病和运载药物．7．动物细胞核移植技术【知识点的认识】体细胞核移植过程（以克隆高产奶牛为例）：【命题方向】如图为核移植实验过程示意图，根据图示分析，下列叙述错误的是（）A．胚胎和动物细胞的培养均需提供95%的O2和5%的CO2B．核移植技术的基础是动物细胞培养C．受体动物超数排卵后为胚胎提供了相同的生理环境D．成年动物细胞核移植成功率比胚胎细胞核移植成功率低分析：1、将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞的细胞核具有全能性。2、体细胞核移植过程（以克隆高产奶牛为例）：解答：A、胚胎和动物细胞的培养均需提供95%的空气（有利于细胞呼吸，进行正常代谢活动）和5%的CO2（维持培养液的pH），A错误；B、体细胞核移植需要对移植后的动物细胞进行培养，因此基础是动物细胞培养，B正确；C、受体动物进行同期发情处理后为胚胎提供了相同的生理环境，C错误；D、由于分化程度不同，即胚胎细胞的分化程度低于体细胞，因此成年动物细胞核移植成功率比胚胎细胞核移植成功率低，D正确。故选：AC。点评：本题考查细胞核移植技术，要求考生识记细胞核移植技术的概念、过程、类型及应用，能结合所学的知识准确答题。【解题思路点拨】掌握动物细胞核移植技术的相关知识是解题的关键。8．体外受精和胚胎移植【知识点的认识】胚胎移植（1）胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术．其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”．（供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种．）地位：如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”．（2）胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力．（3）生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的．这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境．②早期胚胎在一定时间内处于游离状态．这就为胚胎的收集提供了可能．③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应．这为胚胎在受体的存活提供了可能．④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响．（4）基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理．选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种．并用性激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理．②配种或人工授精．③对胚胎的收集、检查、培养或保存．配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）．对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段．直接向受体移植或放入﹣196℃的液氮中保存．④对胚胎进行移植．⑤移植后的检查．对受体母牛进行是否妊娠的检查．9．DNA的粗提取与鉴定【知识点的认识】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。【命题方向】下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（）A．植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水涨破，释放DNAB．在新鲜猪血中加入适量的柠檬酸钠，混合均匀后离心取血细胞液C．在含有DNA的2mol/L的氯化钠溶液中加入蒸馏水，搅拌出现丝状物后停止加水D．鉴定DNA时，将丝状物溶解于2mol/L的氯化钠溶液中，再加入二苯胺试剂进行沸水浴分析：DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。解答：A、植物材料需先用洗涤剂破坏细胞膜，再吸水涨破，释放DNA，A错误；B、哺乳动物（猪血）成熟的红细胞没有DNA，不能用于提取DNA，在新鲜鸡血中加入适量的柠檬酸钠，目的是防止血液凝固，混合均匀后离心，取血细胞的沉淀物，B错误；C、在含有DNA的2mol/L的氯化钠溶液中加入蒸馏水，NaCl的浓度逐渐降低，DNA析出，待丝状物不再增加后停止加水，C错误；D、鉴定DNA时，将丝状物溶解于水中，再加入二苯胺试剂进行沸水浴，出现蓝色，D正确。故选：D。点评：本题主要考查的是DNA的粗提取与鉴定的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。【解题思路点拨】掌握DNA的粗提取与鉴定的相关知识是解题的关键。10．基因工程的操作过程综合【知识点的认识】基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品．基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术．（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”﹣﹣限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的．（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．2、“分子缝合针”﹣﹣DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键．②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低．（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键．3、“分子运输车”﹣﹣载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存．②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入．③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择．（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子．（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因．2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法．3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DN