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41I 2 2 3 4本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件起草单位：平顶山市农业科学院鲁山县瑞祥种植农民专业合作社平顶山市农业农村局平栗苗苗、张九林、李蕴莹、王新兰、郭克歌、冯晓艺、蒋钦群、肖婉露、法1蓝莓组培快繁技术规程4培养基的选择与改良将改良WPM培养基的化学成份按附录A所示的五大类分别用蒸馏水溶解后，配制成质量比为1:20、标注名称、配制倍数和日期，置于2℃~4℃冰箱保存，铁盐应存放在棕色容器中。将实验所需的玉米素(zeatin，ZT)、萘乙酸((1-naphtahaleneacetinacid，NAA)、吲哚丁酸(indole-3-butyric，IBA)用1mol/L的HCl或95％酒精溶解，再用蒸馏水稀释后分别配制成100mg/L的母液，装入棕色广口瓶中，置于2℃~4℃冰箱保存。按所需容量的70％加蒸馏水，再加入0.65％的琼脂，加热搅拌融化琼脂。琼脂融化后，加入3％蔗4.4.2添加母液糖溶解后，按培养基的配方及所需数量，依次加入改良WP24.4.3定容、调pH值增殖培养基：改良WPM+ZT1.0mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L。生根培养基：1/2改良WPM+IBA0.1mg/L+蔗糖25g/L,琼脂粉6.5g/L。5外植体的选择与接种5.1外植体的选择装入洁净的塑料袋封口带回实验室，2℃~4℃冰箱保湿存放，所取材料2d内使用完毕。5.1.2外植体预处理用剪刀将嫩枝上的叶片剪下，用洗涤剂刷洗后，经自来水冲洗30min~40min,无菌滤纸吸干水分在用酒精消毒过的超净工作台面上，将清洗后的叶片一起先放入75%乙醇溶液中振荡浸润30s~40s,无菌水冲洗4次，无菌滤纸吸干水分后，用0.1%的升汞消毒6min~8min,再用无菌水冲洗5次~66苗木培养6.1芽诱导培养及方法将外植体叶片接种到灭菌过的芽诱导培养基中培养，培养温度为25℃±2℃,光照强度60μmol·m-2·s-1~100μmol·m-2·s-1、光照时间12h/d~16h/d,初代诱导培养6.2增殖培养及方法3.0cm长的茎段，接种在增殖培养基中培养，培养温度为25℃±2℃、光照强度60μmol·m-2·s-1~6.3生根培养及方法3-2·-2·-1、光照时间12h/d～16h/d。经3周～4周培养，苗子长到6cm～8cm高-2·基质一般由泥碳土、珍珠岩、蛭石按3：1：1的比例混合而成，或用粗粒蛭石与沙以3:1的比例混合，装入50孔黑色PS标准穴盘，并稍压紧，用0.5g/L的多菌灵（80％可湿性粉剂）溶液喷穴盘栽满后用600倍的百菌清或多

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