病理检验技术（第3版）课件 第13章 电子显微镜技术_第1页
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文档简介

电子显微镜技术第十三章学习目标1.了解电镜的类型、基本结构以及成像原理。2.熟练透射电镜和扫描电镜生物样品制备技术、电镜低温制样技术、电镜细胞化学的基本方法以及免疫电镜胶体金标记技术。思维导图第一节概述

电子显微镜，简称电镜，利用电子射线来代替可见光制成的显微镜。与光学显微镜比较光学显微镜以可见光为介质，电子显微镜以电子束为介质。电子显微镜的分辨率（约0.2纳米）远高于光学显微镜的分辨率（约200纳米）。光学显微镜的最大放大倍数约为2000倍，而现代电子显微镜最大放大倍数可达到百万倍。电子显微镜购买和维护的价格都比较高。第一节概述一电镜的类型第一节概述二电镜的基本结构第一节概述三电镜的成像原理扫描电镜是用极细的电子束在样品表面扫描，将产生的二次电子用特制的探测器收集，形成电信号运送到显像管，在荧光屏上显示物体。透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像，投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。

第二节透射电镜与超薄切片技术一超薄切片术透射电镜，即透射电子显微镜（TransmissionElectronMicroscope，简称TEM），是使用最为广泛的一类电镜。由于电子易散射或被物体吸收，故穿透力低，必须制备更薄的超薄切片（通常为50～100nm）。

其制备过程与石蜡切片相似，但要求极严格。取材固定漂洗后固定脱水浸透聚合切片捞片和染色超薄切片机第一节透射电镜与超薄切片技术二超薄切片染色技术常用的染色剂:醋酸铀和柠檬酸铅。染色方法：(1)组织块染色在脱水至70%乙醇时，将组织块放在用70%乙醇配制的饱和醋酸铀溶液中，染色时间2小时以上，或在冰箱中过夜。

(2)超薄切片染色第三节扫描电镜技术一扫描电镜的工作原理扫描电镜一种新型的电子光学仪器。它具有制样简单、放大倍数可调范围宽、图像层次丰富、景深好等特点。红细胞扫描电镜图第三节扫描电镜技术

二扫描电镜的标本制备样品的初步处理取材→清洗→固定→脱水→置换样品的干燥扫描电镜观察样品要求在高真空中进行。无论是水或脱水溶液，在高真空中都会产生剧烈地汽化，不仅影响真空度、污染样品，还会破坏样品的微细结构。因此，样品在用电镜观察之前必须进行干燥。样品的导电处理

金属镀膜法第四节电镜低温制样技术400目铜网第五节电镜细胞化学技术基本原理基本要求基本步骤第六节免疫电镜技术免疫电镜技术是将电镜的高分辨能力与抗原抗体反应的特异性相结合，在亚细胞水平上对抗原物质进行定位分析的一种高度精密而灵敏的方法。免疫铁蛋白技术，免疫胶体金技术思考题1.

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