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DB32Technicalspecificationformoleculartypingoftoxin-producingfusariumspeciesinwheat江苏省市场监督管理局发布I1小麦产毒镰刀菌种群分子分型技术规范本标准规定了小麦产毒镰刀菌种群以及产毒素化学型区分中镰刀菌DNA的提取、PCR扩增、电泳本标准适用于产毒镰刀菌种群及产毒化学类型的定性PGB4789.15食品安全国家标准食品微生物检验霉菌Tris-HCl（pH8.0），121℃高压灭菌20min，储存于2℃~8℃。4.5RNA酶溶液（5μg/μ）；4.10区分禾谷镰刀菌和亚洲镰刀菌引物Fg16R:5′-GGTAGGTATCCGACATGGCA预期亚洲镰刀菌扩增片段大小为497bp；预期禾谷镰刀菌2Tri11-CON:5′-GACTGCTCATGGAGACTri11-3ADON:5′-TCCTCATGCTCGGTGGACTCTri11-15ADON:5′-TGGTCCAGTTGTCCGTATri11-NIV:5′-GTAGGTTCCATTGCTT4.15TaqDNA聚合酶、PCR扩4.1650×TAE缓冲液：称取484gT从培养平皿上刮取菌丝0.2g~0.5g于1.5）；36.3.1区分禾谷镰刀菌和亚洲水—1×2.5µL1.5µL2.0µL0.75µL0.75µL0.025U/µL—2.0µL25.0µLLadder作参照，9v/cm恒压电泳，电泳40min~60min，电泳结束后，置于凝胶成像仪上或紫外透射仪4水—1×2.5µL1.5µL2.0µL0.75µL0.75µL0.75µL0.75µL0.025U/µL 2.0µL25.0µL“—”表示体积不确定，如果PCR缓冲液中含有氯化镁，则不加氯化镁溶液，根据TaLadder作参照，9v/cm恒压电泳，电泳40min~60min，电泳结束后，置于凝胶成像仪上

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