DB32T 3762.17-2021 新型冠状病毒检测技术规范 第17部分：核酸检测用假病毒阳性质控品　　

DB32TechnicalspecificationsforSARS-CoV-2detePart17:Pseudoviruspositivecontrolma江苏省市场监督管理局发布I 1 1 1 2 2 3 3 3 5 5——第6部分：血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检1本文件适用于新型冠状病毒核酸检测用假病毒类弱阳性质控品的技术要求以及评价方GB/T6682分析实验室用水规假病毒质控品pseudoviruscontrolma计量溯源性metrologicaltrace2假病毒质控品在特定的保存条件和保存时间内，4缩略语DMEM：Dulbecco改良培养基（Dulbecco’smodifiedeagle’smedium）PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreactioqPCR：荧光定量聚合酶链式反应（quantitativepolymerasechainreactRT-PCR：逆转录聚合酶链式反应（reversetranscriptionpolymerasechainreactioRT-qPCR：逆转录荧光定量聚合酶链式反应（reversetranscriptionquantitativepolymerasechain5.1假病毒质控品的技术要求主要分为两个方面，包含对假病毒原液的技术要求，如假病毒内靶标a)用于制备质控品的原料假病毒含有与新冠核酸检测的靶标RNA序列一d)质控品的靶标RNA浓度为试剂盒检出限的1.5-3倍左右，且定值结果具有计量溯源性；3g)质控品适用于至少8款获批上市的新型冠状病毒核酸检测6.2PCR、RT-PCR、RT-qPCR、数字PCR相关6.5无RNA酶的各型号枪头、EP管、PC6.6本文件中所有的化学试剂，除特别说明外，全部为分析纯级别试剂。4表1中国疾病预防控制中心、世界卫生组织推荐的新型冠状病毒核酸检测引物和FRPNFRPEFRP将的产物测序。测序结果与相应的新型冠状病毒核酸检测靶标RNA的参考序列进行比在RT-PCR阴性对照和阳性对照都a)若满足假病毒RNA的RT-PCR产物的电泳结果为阳性且测序结果比对一分别以未做核酸提取的假病毒原液和假病毒中提取的RNA为模板，使用推荐的或自行设计的引物和探针或商品化试剂盒进行qPCR扩增。设置以水为模板的阴性对照，以重组质粒为模板的阳性对a)若未提取的假病毒原液和/或假病毒提取的RNA的qPCR结果为b)若未提取的假病毒原液和假病毒提取的RNA的qPCR结果为阴性，即未起峰或9质控品的制备5采用核酸提取方法提取假病毒质控品的RNA，采用RT-qPCR法或数字PCR法对靶标RNARNA浓度的定值方法均应通过适宜的国家有证标准物质的验证方可采用。使用RT-qPCR法进行定量时，所使用的具体方法应为针对新型冠状病进行RT-qPCR反应，根据各梯度标准品的CC（1）C—质控品中靶标RNA的原始浓度A—数字PCR反应体系中靶标RNA的稀释倍数；定值结果采取10.1.2或10.1.检测试剂盒检出限的1.5-3倍左6装单元进行均匀性检测。对质控品进行核酸提取后，按10.1.2或10.1.3的方法进行靶标RNA浓度均匀性良好，即为合格。若存在显著性差异，即为均匀对不同时间点或Rnas1343的统计学要求进行检