《生化分析仪》课件

完整版ppt1光学基本知识生化分析仪器是利用光谱分析方法的仪器之一，它主要工作在紫外光和可见光光波谱区内。以仪器的原理看，它基本是由一台比色计或一台分光光度计组成。所以了解一些基本的光学知识。无论对生化分析仪原理的理解和对仪器的维修及计量都十分必要。故这里对光的基础知识做一些简单介绍。完整版ppt2光的基本性质

光具有波动性和微粒性,统称为光的波粒两象性或两重性.各种不同波长的光,按其波长和频率的不同可以分为若干个谱区。人们日常所见的白光如日光,光的波长范围为400—760纳米的混合电波,它是由红橙黄绿青蓝紫等颜色的光按一定比例混合而成的复合光。不同波长的光被人感觉的颜色是不同的完整版ppt3

光对物质的选择吸收

一、光对物质的选择吸收不同溶液呈现不同的颜色,这是由于物质对光选择性吸收的缘故物质对光吸收最大处叫吸收峰,不同物质对光吸收的吸收峰不同。吸收曲线反映了溶液对光吸收的选择性。吸收程度随浓度增加,因此,可以选择一部分波长被吸收程度即吸光度来测定溶液的浓度。完整版ppt4

比色分析的基本理论许多化学物质具有颜色,有些无色的化合物也可以和显色剂作用,生成有色物质。事实证明,当有色溶液的浓度改变时,颜色的深浅也随之改变。浓度越大,颜色越深；浓度越小,颜色越浅。因此,可以通过比较溶液颜色深浅的方法来确定有色溶液的浓度,对溶液中所含的物质进行定量分析。溶液颜色的深浅与浓度之间的关系可以用吸收定律来描述。完整版ppt5吸收定律Ｉ0＝Ｉa＋Ｉr＋ＩtＴ＝（Ｉt／Ｉ0）％Ａ＝ＫＣＬ朗伯－比尔定律吸光度Ａ与透射比Ｔ的关系如下:Ａ＝－lgＴ完整版ppt6全自动生化分析仪BS-300全自动生化分析仪主要用于定量测定血清、血浆、尿液、脑脊液等的临床生化项目、免疫项目、治疗性药物浓度监测及药物滥用监测等。完整版ppt7

光的互补若把两种不同的光,接一定的强度比例混合,可以得到“白光”,这两种光叫做互为补色。由于有色物质对光的吸收具有选择性,因此在测定溶液吸光度时,只能用光波中能被有色溶液吸收的一部分光线,即应用特定的单色光进行。至于不被有色溶液吸收的光线,则应设法在未透过有色溶液之前将其消除。完整版ppt8仪器构成

完整版ppt9完整版ppt10

光的传播一、光的反射与折射完整版ppt11三、透镜

完整版ppt12四、光的色散完整版ppt13二、平面镜和球面镜三、透镜

完整版ppt14光的干涉完整版ppt15光的衍射完整版ppt16单色器一、滤光片λ1λ2λm完整版ppt17干涉滤光片色散棱镜衍射光栅

二极管完整版ppt18

生化分析仪工作原理及基本结构

一、概述生化分析仪（Biochemicalanalyzer,Clinicalchemistryanalyzer）自20世纪50年代末面世以来,发展十分迅速。它可用于药品、水质、食品和临床分析等领域。在临床分析方面,生化分析仪主要用来对人的血液和其他体液中的各种生化指标如血红蛋白、胆固醇、转氨酶、葡萄糖、淀粉酶、尿素氮、白蛋白、总蛋白、无机磷、尿酸、钙等进行分析。由于生化分析可以给医生提供受检者的综合性信息,近些年来,生化分析仪已成为临床分析最常用的检验仪器之一。完整版ppt19优点如精度高,可达0.001A；重复性好,可达0.002A；功能齐全,能进行吸光度、浓度以及酶活力的测定；能使用终点法、动力学法和初速度法等方法进行分析；可进行自动、半自动、快速、微量测定等。完整版ppt20要求分析方法多、测试项目多、样品及试剂用量少、准确、快速、微量、耐用等完整版ppt21分类从不同的角度来分类。如按照结构形式来分,可分为连续式、离心式和分立式三种。按自动化程度来分,生化分析仪可以分为全自动和半自动两种。按仪器同时测定的项目分,可分为单通道和多通道两种。单通道型的生化分析仪,每次进样只能测定一个项目,多通道一次进样可以同时测量多个项目。按仪器复杂程度来分,可以分为大型、中型和小型三种。大型生化分析仪均为多通道、全自动型的,可以同时测定10个以上的项目,且分析项目可以自由选择.近些年还出现了一种干片式生化分析仪。这种分析仪结构简单、用血量少、标本不必预先处理、直接用全血测量、操作简便快速、结果准确,特别适合儿科、急诊、野外等使用。完整版ppt22生化参数肝功1白蛋白ALB2总蛋白TP3球蛋白GLB4白蛋白/球蛋白ALB/GLB5总胆红素TBILI6直接胆红素DBILI7间接胆红素IBILI8谷草转氨酶AST9谷丙转氨酶ALT10谷草转氨酶/谷丙转氨酶AST/ALT11L－r谷氨酰移换酶GGT12碱性磷酸酶ALP13乳酸脱氢酶LDH14乳酸脱氢酶/谷草转氨酶LDH/AST15L—r谷氨酰移换酶/谷草转氨酶GGT/AST16总胆汁酸TBA17前白蛋白PALB18葡萄糖（OXI）GLU 接上表肾功1尿素UREA2肌酐CR3尿酸UA4总蛋白TP5白蛋白ALB6葡萄糖GLU心肌酶1肌酸激酶CK2肌酸激同工酶CK-MB3谷草转氨酶AST4乳酸脱氢酶LDH血脂分析1胆固醇CHOL2甘油三脂TRIG3高密度脂蛋白胆固醇HDL-C4低密度脂蛋白胆固醇HDL-C5载脂蛋白AApoA6载脂蛋白BApoB7载脂蛋白A/载脂蛋白BApoA/ApoB8载脂蛋白EApoE血铁分析1铁IRON2总铁结合率TIBC离子及其他1钾K2钠Na3氯Cl4钙Ca5镁Mg6无机磷P7铜Cu8锌Zn9葡萄糖GLU10淀粉酶AMS11脂肪酶LPS完整版ppt23生化分析仪工作原理及基本结构一、工作原理目前,绝大多数生化分析仪都是基于光电比色法进行工作的。尽管所有的生化分析仪最基本的工作部件是一台比色计或分光光度计,但生化分析仪并不仅仅是一台普通的光电比色计或分光光度计,而是集加样、稀释、混合、进样、反应、比色、计算、记录、打印全部或部分功能于一身的自动化仪器。此外,它还需要和试剂、方法学紧密结合起来进行工作。完整版ppt24各类生化分析仪原理连续式生化分析仪离心式生化分析仪分离式生化分析仪干片式生化分析仪1）反射光度法2）差示电位法完整版ppt25仪器基本结构

完整版ppt26重要部件1.稀释器完整版ppt27完整版ppt282.进样盘装置完整版ppt293.打印机1）针式打印机2）热敏打印机3)喷墨打印机4)激光打印机完整版ppt30热敏打印机示意图完整版ppt31

生化分析仪的分析方法一、终点法:一点终点法二点终点法比浊法:比浊法也是一种终点法,不过是一种浊度测定,而不是比色测定。双波长法:同时用两个波长检测,用主波长的吸光度减去副波长的吸光度,标准物与待测物同等对待,计算待测物的浓度连续监测法:属于动态法监测的一种,适用于酶活性和代谢物检测,多有酶的参与。完整版ppt32双项同测法:多项同测法是指在反应过程的不同时间向同一个比色杯中加人几种试剂,并能够测定两个或两个以上的项目。双项同测连续监测法三点双项同测法完整版ppt33一点终点法完整版ppt34二点终点法完整版ppt35连续监测法完整版ppt36同波长双项同测法

完整版ppt37不同波长双项同测连续监测法完整版ppt38几种生化分析仪简介

ISP型半自动生化分析仪

完整版ppt39技术指标

1、测量范围:越大越好2、分辨力:越小越好3、显示：本机采用六位液晶显示。第一位是功能符号显示。第二位只能显示0和1。后四位显示测量数值。4、波长范围：（300～1000）nm5、波长选择：干涉滤光片。其半宽度为（8～12）nm6.光源：石英碘灯12V、20W7、打印机：可打印字母和数字，每行20个字符。8、电源：220V（或110V）±22V（或11V）9、泵：泵的吸入量为（25～1500）µl。设置时，输入25µl的倍数值。10、流动比色皿：为可拆式石英比色皿，容量为32µl。11、环境温度：（10～30）℃完整版ppt40工作原理

完整版ppt41仪器结构1、光路部分:1）光源灯2）滤光片3）流动比色皿4）光电池2、电路部分:主电路板、控制电路板、打印机控制电路板、显示电路板以及插在主电路板上的存储电路板。3.吸液部分:吸液部分由吸液嘴、流动池、电磁阀、管路连接器以及小马达带动的泵体部件所组成。完整版ppt42ISP小型生化分析仪管路图完整版ppt43本机使用的是B6P型热敏式打印机,所谓热敏式打印,是通过加热电路将热敏打印头上的半导体加热点加热,加热点在受热显色的热敏纸上烫出字符。打印机完整版ppt44电路分析完整版ppt45主电路板1）前置放大器完整版ppt462）电压/对数转换器完整版ppt47

电压对数转换原理由朗伯-比尔定律可知:A=–1og（It/I0）设前置放大器测得的空白液的电压信号为V0，测得的样品信号电压为VX。在前置放大电路中，在增益系数K0相同的条件下，A=-logIt/I0=-logK0VX/K0V0=-logVX/V0使空白液输出为10V。这样上式可变换为；A＝1–logVX完整版ppt48对数曲线发生器RC放电电路波形。VP＝10e-ktt＝（1-logVP）/kloge若令kloge=1则:t＝l-logVP即RC放电电路中电容器C上的电压Vp和时间呈对数关系。完整版ppt49时间与吸光度的关系将测量电压VX和电容器的放电电压Vp连接到比较器CMP1的两个输入端，其输出端控制一个触发器，此触发器再去控制一个计数器、当RC放电时，VX便开始按对数曲线下降，计数器也开始计数。由比较器的性质可知:当Vp下降到等于VX时，比较器CMP1翻转，使触发器改变状态，计数器停止计数。此时:t＝l-logVp＝1-logVX＝A由式中可以看出，吸光度A与时间t呈正比关系，t越大，计数值越大.完整版ppt50电源电路完整版ppt51光源电路完整版ppt52使用方法1.面板介绍显示的字符及其意义:A—吸光度b—调零C—浓度d—吸光度/分钟或吸光度F—因数n—样品号P—步骤或参数 S—标准t—时间（秒） E0000—低于范围E9999—超出范围HELP—仪器有故障，需要排除完整版ppt53发光二极管指示灯:kinetic动力学法endpoint终点法twopoint两点法measuringtime测量时间delay延迟时间 factor因数standard标准 reagent试剂sample样品 blank空白完整版ppt54编程序⑴动力学方法a．在40～69之间选一未使用的程序号。b．按proc＋return此时打印机打印出“PROGRAMMODETESTNUMBER（测试号）”c．输入编程序的号码。如输入40，则在测试号行打印出“40”d．输入测试项目（用英文输）。ISP的说明书中附有编码表。用不同数码的组合代表不同的英文字母。如33，34，35，…，58分别代表A，B，C，…，Z，26个大写英文字母；65～90分别代表a～z26个小写英文字母。在编程序的过程中需要输入英文字母时，应输入相应的编码。如39代表G，48代表P，52代表T，若欲输入GPT时，则需依次输入“39enter”“48enter”“59enter”，打印机便依次打出G、P、T。e．按enter键。此时打印机打印出:FILTER:（滤光片）。完整版ppt55f．输入测试项目所需要的滤光片的波长并在滤光片槽中换上相应的滤光片。如测GPT所需要的是340nm的滤光片，则需输入“340”，并在滤光片槽中换上340nm的滤光片即行。此时打印机在FILTER后面打印出:340，接着打出:SELECTSIPPERVOLUME（选择吸入容量）。g．输入所需要吸入的样品液量。如选350µl，则依次按“3”“5”“0”三个键即可。此时仪器在VOLUME后面打印出:350，接着打出SELECTTEMPERATURE（选择温度）。完整版ppt56j．如有因数，按yes键，并输入F值。F值可按以下公式计算:无标准时:例如:GPT因为GPT是负反应，该值应为负值，故应输入-1768有标准时:完整版ppt57k．有试剂空白输入yes，否则输入no。blank（空白）与reagent（试剂）指示灯同时闪烁。l．输入测量时间（秒）。GPT应输入20，enter。Measuingtime（测量时间）指示灯闪。m．输入延迟时间。GTP应输入40，enter。delay（延迟）灯闪。n．动力学方法结果计算:酶活力单位＝（样品每分钟酶活力变化－试剂空白每分钟酶活力变化）×因数如果程序中不输入试剂空白，则认为试剂空白每分钟吸光度的变化为0。假如反应方式是吸光度下降，应在同数前面加负号。完整版ppt58h.输入测试所需设的温度。如需30℃，则按30enter。此时，打印机在TEMP后面打印出30，接着打印出来SELECTPROCANDSETPARAMTER（选择程序和设置参数）。i.此时仪器右方操作板最上方的三个指示灯闪亮、显示器显示“P”。提示操作者在这三个参数中选一个。在测GTP时，因使用的是动态法，应选kinetic旁边的代号“1”，即按“1enter”。此时2和3两个指示灯灭，指示灯1即kinetic亮，显示器显示“P1”。接下来factor指示灯闪，询问是否需要因数。完整版ppt59常见故障1.仪器的检查与调校在检查与调校之前应先将仪器预热15分钟以上，并使比色池中吸入蒸馏水。用4位半数字电压表测量电压。1）先用手按住proc键再打开电源开关，直至仪器显示“H……0”止2）电压测量。以主电路板上的数字“地”，即C点为参考点，测量以下各点（主电路印刷板上已注明）的电压。完整版ppt60常见故障的排除1）不吸液。2）使用其他滤光片时正常,但使用340nm滤光片调零时,仪器显示AE9999。3）打出来的字严重模糊或缺列。4）打印机不走纸。5）打印出的字对不齐。6）零点漂移严重,或重复性差。完整版ppt61美国RT1904C生化分析仪完整版ppt62仪器键盘完整版ppt63比色池及蠕动泵完整版ppt64

A-6半自动生化分析仪

完整版ppt65

主菜单测试项目维护管理编辑项目通讯功能结果数据质控管理完整版ppt66维护管理滤光片与吸光度检测光源灯与打印机管理蠕动泵管理控温管理时间管理光度计校正返回完整版ppt67光源灯的更换完整版ppt68蠕动泵泵管的更换完整版ppt69生化分析仪计量检定《中华人民共和国国家计量检定规程JJG464－96》

完整版ppt70仪器类型1．按仪器分光原理的不同可分为一、二类。2．按仪器技术性能水平的不同可分为A、B.，C是三级完整版ppt71检定项目1、外观检查2、零点漂移的测定3、吸光度准确度与重复性4、杂散光：5、线性误差的测量6.交叉污染的测定7、吸收池温度准确度的测定完整版ppt72生化分析仪检定用溶液标准物质本溶液标准物质作为量值传递的标准,用于手动、半自动、全自动各类生化分析仪的吸光度、杂散光、线性误差和交叉污染等项目的检定。国家标物中心生产.完整版ppt73仪器类型

类分类原理级一棱镜式或光栅式ABC二干涉滤光片或吸收滤光片ABC完整版ppt74仪器分类情况类分类原理级一棱镜式或光栅式ABC二干涉滤光片或吸收滤光片ABC完整版ppt75BS-300全自动生化分析仪。主要用于定量测定血清、血浆、尿液、脑脊液等的临床生化项目、免疫项目、治疗性药物浓度监测及药物滥用监测等。完整版ppt76分光光度计分光光度计的类型按工作波长范围不同来划分,分光光度计分为红外分光光度计、紫外分光光度计和可见（光）光分光光度计三类。按待分析物质对光的吸收性质不同,可分为分子吸收光分光光度计和原子吸收分光分光光度计两类。按待分析物质对光的作用效果来分,可分为发射光谱类分光分光光度计和吸收光谱类分光光度计两大类。完整版ppt77可见分光光度计的原理及结构工作原理吸收式分光光度计都是根据物质对不同波长的光具有选择性地吸收的特点而进行工作的,它们都以朗伯-比尔定律作为定量依据。T＝（Ｉt／Ｉ0）100%Ａ＝－lgＩt／Ｉ0＝ＫＣＬ通过对透射进行负对数计算,可以得到吸光度值。再将吸光度除以相应的系数,便可求出待测溶液的浓度。完整版ppt78基本结构一般的可见分光光度计由光源、单色器、比色皿、光电转换器、前置放大器、对数放大器、显示部件及电源电路组成.显示器光源灯单色器比色皿光电转换前置放大对数放大浓度调节电源电路TTTAAC完整版ppt79光源灯可见分光光度计的光源灯通常为钨丝灯和卤钨灯两种。前者的体积较大、寿命较短。并且随使用时间的延长,发光强度会慢慢变弱。卤钨灯可克服上述缺陷。这两种灯能产生从近紫外（320nm）到近红外（2500nm）之间的光谱。其发光稳定性与所加的电压有关。完整版ppt80单色器单色器又叫单色光器。其作用是把复合光分解成分析时所需要的单色光。其分光方式有棱镜式和光栅式两种。棱镜式分光的方式比较落后。近代分光光度计都采用光栅分光。光源灯产生的光通过单色器后,被分解成红橙黄绿青蓝紫的光谱带。投照在出光狭缝的内壁。改变波长调节装置,棱镜或光栅的角度随之变化,其分解后的光谱便在狭缝内壁移动,所需要的单色光便从狭缝中透出来。与此同时,波长显示装置出将所调节的波长显示出来。完整版ppt81比色皿比色皿有多种称呼:如比色杯、比色槽、比色池、吸收池、测量池等。其作用是用来盛装比色溶液。可见光区使用的比色皿都用光学玻璃制成，它只能用于可见光区。不能在紫外分光光度计上使用。比色皿有5mm、10mm、20mm、40mm等多种规格。其中10mm是最常用的标准规格。大于10mm用于溶液过稀的场合，小于10mm用于溶液过浓的场合。完整版ppt82光电检测器光电转换器又叫光电检测器,是用来将光能转换成电能的器件。分光光度计所使用的光电检测器均采用线性转换器件。常用的光电检测器的类型有光电池、真空光电管、光电倍增管以及半导体光电二极管、光敏电阻等完整版ppt83前置放大与对数放大光电检测器转换成的电信号,通常先送到前置放大器,前置放大后的信号与溶液的透射比T成正比。只有将透射比Ｔ作负对数放大后,才能线性地显示吸光度A.完整版ppt84浓度调节电路浓度调节电路通常由电位器组成。在比色皿中放入已知浓度的标准溶液后,调节浓度调节电路,使仪器显示其浓度值。而后,才能进行浓度测定。完整版ppt85显示装置可见分光光度计常用的显示装置有磁电式表头及数字式表头两种。完整版ppt86电源电路电源电路用于产生光源灯所需要的稳定电压及仪器放大电路所需要的其他直流电压。完整版ppt87721型和721A型分光光度计721分光光度计,除了光路部分较少变化外,其他部分则不尽相同。如除了指针式读数外,还有采用数字表头读数的721A型。721A型将显示部分改为数字表头显示,电路部分增加了对数放大器,可以线索性地读取吸光度,还可以读取浓度。其他部分变化不太大。完整版ppt88

一、技术指标

完整版ppt89721型分光光度计的使用方法

1.在仪器未接通电源时，电表的指针必须位于“0”刻线上。若不是这种情况，应卸下仪器上盖板，调节电表上的校正螺丝，使表头指在“0”位。2.将灵敏度旋钮调至“1”挡。此时，仪器的放大倍数最小，稳定性最好。3.调节仪器波长旋钮，调至所需波长处。4.打开试样室盖，开启电源。调“0％”旋钮，使电表指示“0”。盖上试样室盖，调“100％”旋钮使电表指示100附近。若调不到“100”，可调节灵敏度钮，增加灵敏度挡数。打开试样室盖，将仪器预热20分钟。5.在试样室盖打开的情况下，再次调节0％旋钮，使电表指示“0”。完整版ppt90使用方法

6.将装有参比溶液及样品液的比色皿放置于比色架中。参比液放一份，样品液可以放置三份。参比液通常放置于最前或最后位置。注意，比色皿外壁的液体一定要擦拭干净，否则，会造成大的测量误差。7.盖上试样室盖，将装有参比溶液的比色皿（有时以空气作参比）拉或推入光路，调节“100％”旋钮，使电表指示“100”。如果调不到“100”，则可适当增加灵敏度挡数。上述“调0”及“调100”步骤应反复调节两三次。8.将装有被测溶液的比色皿依次推或拉入光路中，然后，从指示表头上读出被测量溶液的透射比T或吸光度A值，并将其记录下来。完整版ppt91721型分光光度计使用注意事项

1.在能使参比液调到“100”的情况下，尽可能采用灵敏度较低的挡。在低挡时，仪器有更高的稳定性。所以使用时一般先放置在“1”挡，灵敏度不够时再逐渐升高。改变灵敏度后必须重新校正“0”和“100”。2.在大幅度改变波长或大幅度旋转“100％”旋钮后，需等待片刻后才能正常工作。因光能量急剧变化，光电管及钨丝灯均需一段响应平衡时间。3.根据溶液含量的不同，可以酌情选用不同光径长度的比色皿，目的是尽可能使电表读数或数字显示处于（0.2～0.8）A吸光度值内。在这一区域内的读数更准确完整版ppt92使用注意事项

4．本仪器还配有0.5A.1A及1.5A三块中性滤光片。这三块滤光片是在测量浓度过高的溶液时用的。例如，在测定吸光度为1.7A左右的溶液时，我们在电表指示上易造成过大的读数误差（721型）或数字显示吸光度值不稳（721A）。如果在测定时，在参比溶液处再加放一块1A的中性滤光片，则电表读数（721）或数字（721A）为0.74A，则实际值为1.74A。但是，要注意的是：这三块滤光片只是粗略的标称值。具体到在每个波长下的值或你需要的波长下的值是多少，都是未知数。使用前，需要在计量合格的更高一级的分光光度计上确定其数值后，才能这样使用。否则，有可能会引起更大的误差。完整版ppt93使用注意事项

5．取放比色皿时应拿其磨沙面，并经常检查所用的同一套比色皿是否配套正常。检查方法是:在比色皿中放入相同的溶液，在相同的波长下测量，测出的透射比误差不大于0.5%。否则，应对比色皿进行清洁处理。处理后若仍有不合格者，应将其剔除，不能再使用。需要注意的是，每个仪器的比色皿都是配套的，不能和其他仪器的比色皿单独调换。6．仪器使用完毕，应用塑料套罩住整个仪器，并在塑料套内放置数袋防潮硅胶。7．经常注意仪器底部旋入的两个干燥剂筒及试样室盒内的干燥剂袋内的硅胶是否变色，如发现变红，应及时将其取出调换或烘干至蓝色，等冷却后放回原处。8．比色皿每次使用完毕后，应立即用蒸馏水洗净，再用细软而易吸水的布或镜头纸擦干，存于比色皿的盒子内。完整版ppt94使用注意事项

5.在试样室盖打开的情况下，再次调节0％旋钮，使电表指示“0”。6.将装有参比溶液及样品液的比色皿放置于比色架中。参比液放一份，样品液可以放置三份。参比液通常放置于最前或最后位置。注意，比色皿外壁的液体一定要擦拭干净，否则，会造成大的测量误差。7.盖上试样室盖，将装有参比溶液的比色皿（有时以空气作参比）拉或推入光路，调节“100％”旋钮，使电表指示“100”。如果调不到“100”，则可适当增加灵敏度挡数。上述“调0”及“调100”步骤应反复调节两三次。8.将装有被测溶液的比色皿依次推或拉入光路中，然后，从指示表头上读出被测量溶液的透射比T或吸光度A值，并将其记录下来。完整版ppt95分光光度计的调校该仪器使用较长时间后,可能发生一些故障,或者仪器的性能指标有所变化。需要进行调校或修理。完整版ppt961.光源灯的调整打开试样室盖,