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文档简介
玉环县人民医院检验科文件编号:JYK-3-SH-056版本/修订号:C/0主题内容生化室作业指导书生效日期:20110701第1页共3页编写制定日期审核审核日期:核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01梅毒甲苯胺红不加热血清试验标准操作规程1检验申请单独检验项目申请:RPR;组合项目申请:RPR+TPPA,临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。2.1.8下列标本为不合格标本2.1.8.1标本量不足。2.1.8.2严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.8.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.8.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1标本保存时间:立即测定或放置2~8℃冰箱内。2.2.2已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。3、方法原理采用性病实验室抗原混悬于含有特制的甲苯胺红溶液中,血清或血浆中的反应素与性病实验室抗原结合,在白色纸卡上形成肉眼可见的红色凝集颗粒,而且通过稀释血清后再试验可进行半定量测定。4、试剂及其他用品准备试剂组成含量TRUST抗原混悬2.5ml×1瓶阳性对照血清1ml×1支阳性对照血清1ml×1支试验专用卡片120人份10mmol/l专用滴管和针头1套使用说明书1份5质控品与室内质控规则5.1质控液重建方法:液态质控血清,即开即用,无需特殊准备。5.2质控品测定:在每一批标本中测定阴性和阳性对照各一次。5.3质控规则:阴性和阳性对照符合即可。5.4如出现失控情况,按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正,并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。6操作步骤6.1血清定性试验:(1)分别吸取50ul阴性对照血清和阳性对照血清均匀铺加在纸片的两个圆圈中。(2)吸取待检血清或血浆(不必加热56℃灭活)50ul均匀铺加加在卡片另一圆圈内。(3)将盒内TRUST抗原悬液轻轻摇匀,拧开上盖,用专用滴管和针头,垂直向每个待检血清圈内加1滴抗原。(4)用转动器或手摇卡片(100转/分钟)8分钟后,立即在明亮光线下用肉眼观察结果。2.血清半定量试验:待检血清用生理盐水在小试管中作以下6个稀释度:原血清、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32……吸取每个稀释度血清50ul加在卡片圈内,按定性试验进行测定和判断结果,如效价高于1:32,应测定1:64、1:128、1:256稀释度,以最高稀释度达到阳性或弱阳性反应作为凝集效价。7结果判断摇完卡片后在三分钟内按以下说明判断。1.阳性反应(+++~++++):可见中等或较大的红色凝集块;2.弱阳性反应(+~++):可见散在的小红色凝集块;3.阴性反应(一):可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。8临床意义初筛梅毒试验。其半定量结果与疗效有关.9注意事项9.1本试验在23℃-29℃室温中进行,试剂及待检血清由冰箱取出应恢复至室温后再作试验,如在低于20℃或高于30℃环境中作试验,出现弱阳性或可疑者,应在规定的室温中进行复试,以排除因室温可能出现的假阳性反应。9.2试验卡片为一次性使用,但结果可长期保存。9.3摇完卡片后应在三分钟内观察结果,因随时间延长,其反应性可逐渐增强。9.4使用专用滴管和针头滴加试剂时应采用垂直位置,使每滴大小均匀一致。9.5本试剂盒应视为有传染性物质,请按传染病实验室检查规程处理。9.6TRUST抗原悬液使用前应充分摇匀。9.7本试验系非特异性反应,在自身免疫性疾病、某些感染性疾病患者和孕妇等人群中,会有假阳性结果出现,需结合临床进行分析,必要时需做梅毒螺旋体抗体特异性试验。10结果审核以及分析与相关项目的联系10.1由资深专业人员负责检验结果的审核。10.2认真审核每一个测定结果,审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责,并在报告单的审核者处签名。10.3相关项目:如出现与临床不符甚至相悖的情况,应分析与查找原因。11有关引用程序与文件11.1检验结果审核程序。11.2标本
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