检验科梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-056版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第1页共3页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01梅毒甲苯胺红不加热血清试验标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：RPR；组合项目申请：RPR+TPPA，临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.8下列标本为不合格标本2.1.8.1标本量不足。2.1.8.2严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.8.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.8.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1标本保存时间：立即测定或放置2～8℃冰箱内。2.2.2已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。3、方法原理采用性病实验室抗原混悬于含有特制的甲苯胺红溶液中，血清或血浆中的反应素与性病实验室抗原结合，在白色纸卡上形成肉眼可见的红色凝集颗粒，而且通过稀释血清后再试验可进行半定量测定。4、试剂及其他用品准备试剂组成含量TRUST抗原混悬2．5ml×1瓶阳性对照血清1ml×1支阳性对照血清1ml×1支试验专用卡片120人份10mmol/l专用滴管和针头1套使用说明书1份5质控品与室内质控规则5.1质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。5.2质控品测定：在每一批标本中测定阴性和阳性对照各一次。5.3质控规则：阴性和阳性对照符合即可。5.4如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。6操作步骤6．1血清定性试验：（1）分别吸取50ul阴性对照血清和阳性对照血清均匀铺加在纸片的两个圆圈中。（2）吸取待检血清或血浆（不必加热56℃灭活）50ul均匀铺加加在卡片另一圆圈内。（3）将盒内TRUST抗原悬液轻轻摇匀，拧开上盖，用专用滴管和针头，垂直向每个待检血清圈内加1滴抗原。（4）用转动器或手摇卡片（100转/分钟）8分钟后，立即在明亮光线下用肉眼观察结果。2．血清半定量试验：待检血清用生理盐水在小试管中作以下6个稀释度：原血清、1：2、1：4、1：8、1：16、1：32……吸取每个稀释度血清50ul加在卡片圈内，按定性试验进行测定和判断结果，如效价高于1：32，应测定1:64、1:128、1:256稀释度，以最高稀释度达到阳性或弱阳性反应作为凝集效价。7结果判断摇完卡片后在三分钟内按以下说明判断。1．阳性反应（＋＋＋～＋＋＋＋）：可见中等或较大的红色凝集块；2．弱阳性反应（+～＋＋）：可见散在的小红色凝集块；3．阴性反应（一）：可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。8临床意义初筛梅毒试验。其半定量结果与疗效有关.9注意事项9.1本试验在23℃-29℃室温中进行，试剂及待检血清由冰箱取出应恢复至室温后再作试验，如在低于20℃或高于30℃环境中作试验，出现弱阳性或可疑者，应在规定的室温中进行复试，以排除因室温可能出现的假阳性反应。9.2试验卡片为一次性使用，但结果可长期保存。9.3摇完卡片后应在三分钟内观察结果，因随时间延长，其反应性可逐渐增强。9.4使用专用滴管和针头滴加试剂时应采用垂直位置，使每滴大小均匀一致。9.5本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。9.6TRUST抗原悬液使用前应充分摇匀。9.7本试验系非特异性反应，在自身免疫性疾病、某些感染性疾病患者和孕妇等人群中，会有假阳性结果出现，需结合临床进行分析，必要时需做梅毒螺旋体抗体特异性试验。10结果审核以及分析与相关项目的联系10.1由资深专业人员负责检验结果的审核。10.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。10.3相关项目：如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。11有关引用程序与文件11.1检验结果审核程序。11.2标本