CCK8-MTT细胞活力and毒性检测试剂盒

新品推荐！CCK8/MTT细胞活力/毒性检测试剂盒一、实验原理dunhaoMTT全称为3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazoliumbromide，中文名噻唑蓝。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源底物MTT还原为不溶于水的蓝紫色甲臜(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。再利用二甲基亚砜(DMSO)等溶解剂溶解细胞中的甲臜沉积物，用酶标仪于490nm或570nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，甲臜形成的量与活细胞数成正比。MTT应用包括药物敏感性、细胞毒性、对生长因子的反应和细胞活化。MTT检测法具有高度的敏感性、可重复性，并适用于高通量筛选。CCK8作为MTT方法的优化升级，WST-8在电子耦合试剂的辅助下，能在线粒体内琥珀酸脱氢酶的作用下，迅速转化为高水溶性的橙黄色甲臜产物（formazan），其颜色的深浅直观反映了细胞的增殖活力与毒性水平——增殖越强，颜色越深；毒性越大，颜色则越浅。通过酶标仪在450nm波长下的精确测量OD值，即可间接量化活细胞数量，实现高效、灵敏的检测。MTT与CCK8是细胞增殖与毒性检测实验中代表性的高灵敏度检测试剂盒，应用范围极为广泛，包括但不限于药物筛选过程中的细胞反应评估、细胞增殖速率的精确测定、细胞毒性测试、肿瘤细胞的药敏性分析及生物活性因子的效能检测等，是科研工作者不可或缺的得力工具。CCK8法因其操作简便、灵敏度高、对细胞低毒性等优点，在更多领域得到了广泛应用。二、细胞活力/毒性检测试剂盒应用细胞活力/毒性检测试剂盒（MTT/CCK8）用于以96孔板的形式对细胞的增殖和活力进行非放射性的光谱检测：＞测量生长因子、激素、促分裂因子及各种营养物质对细胞增殖的影响＞细胞毒性和细胞抑制化合物分析，如抗癌药物和其他药物化合物的分析＞生长抑制性抗体和生理性调节因子的评估＞评估细胞的增殖能力，用于绘制细胞生长曲线、监测细胞增殖速度三、细胞活力/毒性检测试剂盒优势比较四、CCK8额外优势＞酚红和血清对CCK-8法的检测不会造成干扰；细胞毒性非常低，因此加入试剂显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间；＞同时也可以去除含CCK8的培养基，添加新鲜培养基；以使用细胞进行其他实验，MTT无法实现这种操作；＞MTT由于需要吸走培养基并更换DMSO溶解液，因此不适用于悬浮细胞检测，CCK8由于无需换液，完美适用悬浮细胞；五、细胞活力/毒性检测试剂盒产品示例以CCK8法为例：＞实验一、测试试剂线性接种已知数量的细胞，使用CCK8试剂孵育2h后采用酶标仪检测OD450，确定产品显色值与细胞数量线性关系，验证试剂盒工作是否正常。结果显示显色值（已减去空白孔本底OD值）与细胞数量呈良好线性关系，试剂盒可以有效工作。＞实验二、细胞因子刺激实验接种固定数量细胞，再添加不同浓度的细胞因子，检测细胞因子对细胞刺激效果。检测结果显示，试剂盒检出GM-CSF对TF-1细胞ED50约100