DB13-T 5988-2024 土壤中多种农药及代谢物残留量的测定

ICS13.080CCSZ1813DB13/T5988—2024I本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由河北省农业农村厅提出。本文件起草单位：河北蕴鸿检测科技有限公司、河北省农药检定监测总站、河北农业大学植物本文件主要起草人：武丽芬、杨殿贤、李瑞军、刘云肖、王继英、周静、谢欢、牛海林、白凤虎、刘明、许昊、孙新锁、张立君、吴志勇、王雪娟、赵国存、唐甜绮、宋红英、李春艳。DB13/T5988—20241本文件规定了土壤中多种农药及代谢物残留量测定的原理、试剂与材料、仪器和设备、试样采集和制备、测定步骤、结果计算、精密度、定量限等技术要求。本文件适用于利用液相色谱-质谱联用法、气相色谱-质谱联用法测定土壤中37种农药及代谢物2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6379.1测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第1部分：总则与定义GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T395农田土壤环境质量监测技术规范3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理试样用乙腈提取，经分散固相萃取净化，液相色谱-质谱联用仪、气相色谱-质谱联用仪测定，外标法定量。5试剂与材料除另有说明外，所用试剂均为色谱纯试剂，水为GB/T6682规定的一级水。5.1试剂5.1.1乙腈（CH3CN，CAS号：75-05-8）。5.1.2甲酸（HCOOH，CAS号：64-18-6）。5.1.3甲醇（CH3OH，CAS号：67-56-1）。5.1.4甲酸铵（HCOONH4，CAS号：540-69-2）。5.1.5无水硫酸镁（MgSO4，CAS号：7487-88-9），分析纯。5.1.6氯化钠（NaCl，CAS号：7647-14-5），分析纯。5.1.7柠檬酸钠二水合物（C6H5Na3O7·2H2O，CAS号：6132-04-3），分析纯。5.1.8柠檬酸二钠盐倍半水合物（C6H6Na2O7·1.5H2O，CAS号：6132-05-4），分析纯。5.2溶液配制5.2.1甲酸铵-甲酸水溶液（2mmol/L称取0.1261g甲酸铵，用0.01%甲酸水溶液溶解并稀释至1000mL，摇匀。5.2.2甲酸铵-甲酸甲醇溶液（2mmol/L）：称取0.1261g甲酸铵，用0.01%甲酸甲醇溶液溶解并稀释至1000mL，摇匀。DB13/T5988—202425.3标准品37种农药及代谢物标准品名称，见附录A。5.4标准溶液配置5.4.1标准储备溶液（100mg/L将标准品用乙腈(5.1.1)分别配制成100mg/L的标准储备液，摇匀。于-18℃条件下避光保存，有效期6个月。5.4.2混合标准溶液（5mg/L）：吸取一定量的农药标准储备溶液于容量瓶中用乙腈（5.1.1）定容至刻度，配制成5mg/L混合标准溶液，使用不同仪器进行测定的标准溶液分别进行配制，于0℃~4℃条件下避光保存，有效期1个月。5.5材料5.5.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：粒径40μm～60μm。5.5.2微孔滤膜（有机相0.22μm。5.5.3陶瓷均质子：2cm(长)×1cm（外径）。6仪器和设备6.1液相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配电喷雾离子源（ESI）。6.2气相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配电子轰击源（EI）。6.3分析天平：感量0.01g和感量0.0001g。6.4氮吹仪：可控温至80℃。6.5离心机：转速不低于4000r/min。6.6漩涡混合器。6.7标准筛：孔径2mm。7试样采集和制备土壤样品的采集和保存按NY/T395的要求执行。风干后拣出杂质，研磨后过2mm标准筛，取250g～500g装入洁净的容器内待测。8测定步骤8.1前处理8.1.1提取称取5g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加5mL水，放置半小时，加10mL乙腈，涡旋提取4min，加入4g无水硫酸镁、1g氯化钠、1g柠檬酸钠二水合物、0.5g柠檬酸二钠盐倍半水合物以及2颗陶瓷均质子，涡旋4min后，以4000r/min离心5min。8.1.2净化吸取6mL上清液加到内含0.9g硫酸镁、0.15gPSA的15mL离心管中，涡旋4min，以4000r/min离心5min，准确吸取4mL上清液于10mL试管中，氮吹仪80℃吹至近干，加入乙腈定容至2mL，漩涡混合器混匀，过微孔滤膜，待上机测定。8.2仪器参考条件8.2.1液相色谱-三重四极杆质谱联用仪参考条件色谱柱：C18（2.1mmI.D.×100mm，3μm），或能达到同样分离效果的色谱柱；流动相：A相为甲酸铵-甲酸水溶液（5.2.1B相为甲酸铵-甲酸甲醇溶液（5.2.2梯度洗脱程序见表1；流速：0.4mL/min；DB13/T5988—20243柱温：40℃;表1流动相洗脱程序min流动相A/%流动相B/%090905955959090离子源类型：电喷雾离子源；离子源温度：300℃;检测器电压：1.94kv；雾化气：3.0L/min；加热气：15.0L/min；多反应监测：每种农药分别选择至少2个子离子。所有需要检测的子离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见附录B.1。8.2.2气相色谱-三重四极杆质谱联用仪参考条件色谱柱：键合交联5%二苯基/95%二甲基聚硅氧烷；30m×0.25mm×0.25μm，或能达到同样分离效果的色谱柱；色谱柱温度(℃)：100℃保持1min，以20℃/min升到280℃,保持11min；载气：氦气；流速：1.39mL/min；进样方式：不分流进样；检测器电压：1.17kv；离子源类型：电子轰击源；传输线温度：250℃;溶剂延迟：3min；多反应监测：每种农药分别选择至少2个子离子。所有需要检测的子离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见附录B.2。8.3标准曲线选择与被测样品性质相同的空白土壤样品按照8.1进行前处理，得到空白基质溶液。精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L和0.5mg/L的基质匹配工作溶液，根据仪器性能和检测需要选择不少于5个浓度点，供仪器测定。以37种农药及代谢物的质量浓度为横坐标，以定量离子的色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，基质标准工作溶液应现用现配。DB13/T5988—202448.4定性测定在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选离子均出现，样品中目标农药的定性离子和定量离子的相对丰度比与浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表2规定的范围，则可判定样品中存在目标农药。定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差详见表2。表2定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度>50%>20%至50%（含）>10%至20%（含）8.5定量测定本文件采用外标法定量。待测样品溶液中的农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，超出线性范围应根据测定浓度与基质标准溶液同步稀释后再进行分析。37种农药及代谢物多反应监（MRM）质量色谱图见附录C。8.6平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验。8.7空白试验空白样品除不加试样外，采用与试样测定完全相同的试剂、设备和测定步骤进行操作。9结果计算试样中各农药残留量以质量分数ω计，单位以毫克每千克（mg/kg）表示，按式（1）计算。………………（1）Ω——土壤试样中被测农药的残留量，单位为毫克每千克(mg/kg)；V1——提取溶剂总体积，单位为毫升(mL)；A--试样溶液中被测农药的色谱峰面积；V3——试样溶液定容体积，单位为毫升(mL)；ρ——标准溶液中农药的质量浓度，单位为毫克每升(mg/L)；V2——分取用于检测的提取溶液的体积，单位为毫升(mL)；A——标准溶液中被测农药的色谱峰面积；m——试样的质量，单位为克(g)。计算结果应扣除空白样品，以重复性条件下独立测定结果的算数平均值表示，保留三位有效数10精密度本文件精密度数据是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的，获得重复性限和再现性限的值以95%的可信度来计算的。本文件方法的精密度数据见附录D。11定量限本方法的定量限为0.01mg/kg～0.02mg/kg，见附录A。DB13/T5988—2024537种农药及代谢物中英文名、CAS号、分子式和方法定量限37种农药及代谢物中英文名、CAS号、分子式和方法定量限，见表A.1～A.2。表A.117种农药及代谢物中英文名、CAS号、分子式和方法定量限（液相色谱-三重四极杆质谱联用仪）序号农药中文名称农药英文名称CAS号分子式定量限mg/kg1phoximCHNOPS2metalaxylCHNO3CHNO4CHNO5CHClNOS6CHNO7CHClNO8CHClNOS93-羟基克百威CHNOCHClN克百威CHNOCHOPS苯甲酸盐CHNOCHO烯酰吗啉CHCLNOpyrimethanilCHNpyraclostrobinCHClNOprochlorazCHClNODB13/T5988—20246表A.220种农药及代谢物中英文名、CAS号、分子式和方法定量限（气相色谱-三重四极杆质谱联用仪）序号农药中文名称农药英文名称CAS号分子式定量限mg/kg1灭线磷CHOPS2phorateCHOPS3phoratesulfoneCHOPS4毒死蜱CHClNOPS5倍硫磷CHOPS6氟虫腈硫醚CHClFNS7二甲戊灵40487-42-1CHNO8氟虫腈CHClFNOS9腐霉利procymidoneCHClNOCHFNO氟虫腈砜CHClFNOS丙溴磷profenofos41198-08-7CHBrClOPS三唑磷TriazophosCHNOPS联苯菊酯Bifenthrin82657-04-3CHClFO氯氟氰菊酯91465-08-6CHCIFNO氯氰菊酯CHCLNOboscalidCHClNO氰戊菊酯CHClNO苯醚甲环唑CHClNO₃溴氰菊酯CHBrNODB13/T5988—2024737种农药及代谢物保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数37种农药及代谢物保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见表B.1～B.2。表B.117种农药及代谢物保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数（液相色谱-三重四极杆质谱联用仪）序号保留时间min定量离子对碰撞电压V定性离子对碰撞电压V1-31-242-10-253404.1>372.0-25404.1>329.0-284-9-275-20-306-39-347-17-148-12-1493-羟基克百威-14-20-27223.1>56.1-15克百威-30-20-10-34-25886.5>82.1-55烯酰吗啉-30-25-25-29-20-35-11-17DB13/T5988—20248表B.220种农药及代谢物保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数（气相色谱-三重四极杆质谱联用仪）序号保留时间min碰撞电压V定性离子对碰撞电压V定量离子对1灭线磷628364毒死蜱5倍硫磷6氟虫腈硫醚419.9>350.97二甲戊灵88氟虫腈9腐霉利氟虫腈砜丙溴磷三唑磷8联苯菊酯886666氰戊菊酯-1 DB13/T5988—2024 937种农药及代谢物多反应监测（MRM）质量色谱图37种农药及代谢物多反应监测（MRM）质量色谱图见图C.1。 2000000 1750000 1500000 1250000 1000000 750000 500000 250000 0 010030000002500000200000015000001000000 500000 0 600000500000400000 300000 200000 600000500000400000 300000 200000 10000002.55.0EQ\*jc3\*hps12\o\al(\s\up9(20000EQ\*jc3\*hps12\o\al(\s\up9(20000),10000)EQ\*jc3\*hps12\o\al(\s\up9(0),0)5000000400000030000008000000700000060000000.0101250000 1000000 750000 500000 1000000 750000 500000 250000 0EQ\*jc3\*hps12\o\al(\s\up7(EQ\*jc3\*hps12\o\al(\s\up7(0000),5000)500000045000004000000350000030000002500000200000015000002.55.0EQ\*jc3\*hps12\o\al(\s\up7(EQ\*jc3\*hps12\o\al(\s\up7(0000),5000)500000045000004000000350000030000002500000200000015000000.02500000250000022500002000000175000015000001250000100000075000050000025000002.55.0500000400000025000002000000350000030000001500000100000002.85.0 1000000 750000 500000 250000 09000008000007000006000005000009000008000007000006000005000004000003000002000001000000噻2.55.030000003000000250000020000001500000100000050000005.07.1图C.137种农药及代谢物多反应监测（MRM）质量色谱图DB13/T5988—2024EQ\*jc3\*hps12\o\al(\s\up8(50000),25000)25000002250000200000017500001500000125000010000007500005.02500000250000020000001500000100