DB34T 4208-2022 草地贪夜蛾抗药性监测技术规范

34GuidelineforinsecticideresistancemonitoringofthefallarmywormI本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定成、蒋山、高全、肖金京、郑兆阳、吴向辉、马书芳、徐丽娜、陈浩梁、张前进、1草地贪夜蛾抗药性监测技术规范本文件规定了草地贪夜蛾[Spodopterafrugiperda(J.E.Smith)]抗药性监测的化学药剂、监测点NY/TNY/TNY/T4化学药剂氯虫苯甲酰胺、溴氰虫酰胺、乙基多杀菌素、虱螨脲和其它取得登记在长江以南草地贪夜蛾迁飞过渡区选取1个～2个市县、江淮之间26.2试虫的采集和饲养选取代表性玉米田3块～5块，每块田采用“W”型五点取样，每个监测点采集草地贪夜蛾卵块200块以上，或采集幼虫、蛹500头以上，或利用诱虫灯诱集活成虫200头以上。采集的卵块孵化后，幼虫生长至3龄初，可直接用于生物测定。其他虫态室内饲养至F1代，3龄初幼虫用于生物测定。饲养条件为(26±1)℃,相对湿度为40%～70%,光周期L/D=16h/8h,幼虫采用人工饲料饲养，人工饲料的配方参见附录A所示，成虫饲喂10%蜂蜜水。6.3药剂的配制6.3.1母液配制6.3.2饲料混毒法使用同一溶剂稀释母液，配制系列浓度的工作液，再与人工饲料按照质量比1:99均匀混合，加入药液量不少于2g。将母液用0.1%Triton-100水溶液梯度稀释至工作液浓度，每个浓度药液量不少于400mL。6.4.2饲料混毒法选取生长一致、健康的3龄初幼虫作为试虫。在12孔培养板中加入适量混毒人工饲料，并接入1头试虫。12头为一个重复，每个浓度重复3次；每个药剂设置5个～7个浓度梯度。以添加相同溶剂处理的饲料作为对照。处理后的试虫转移至(26±1)℃、相对湿度为40%～70%、光周期L/D=16h/8h选取生长一致、健康的3龄初幼虫作为试虫。用微量点滴器将0.2μL药液点滴在幼虫的胸部背板，从低浓度到高浓度依次处理。12头试虫为一个重复，每个浓度重复3次，每个药剂设置5个~7个浓度梯度。以点滴相同溶剂的试虫作为对照。处理后的试虫转移至12孔培养板饲养，每孔1头，并加入适量人工饲料或新鲜玉米叶片，于(26±1)℃、相对湿度为40%～70%、光周期L/D=16h/8h的选取生长一致、健康的3龄初幼虫作为试虫。采集未接触任何农药的新鲜玉米叶片，用打孔器打成直径略小于12孔培养板孔径的叶碟，浸入待测药液中10s,取出置于吸水纸自然晾干，每孔放入33个叶碟，接入1头试虫。12头试虫为一个重复，每个浓度重复3次，每个药剂设置5个～7个(26±1)℃、相对湿度为40%～70%、光周期L/D=16h/8h的条件下饲养。的LCo值(T),按公式(1)计算监测地区种群的抗性倍数(RR),计算公式如下：中等水平抗性4A.2B组份称取琼脂26g，加入蒸馏水400A.5煮沸后冷却至70℃~80℃,加入C组并搅拌均匀。A.6待冷却至50℃~60℃,加入微量元素组合4mL，并搅拌均匀，微量元素组合见表。1234盐酸硫胺素（Thiaminehydroc5盐酸吡哆醇（Pyridoxinehydroc678钴胺素（Cobalamin,vitam注：准确称取以上各组分，加入蒸馏水160mLA.7将配制完成的饲料倒入16.7cm×12.3cm×5 12312312