湖北省仙桃天门潜江2024-2025学年高二生物下学期期末考试试题

PAGEPAGE16湖北省仙桃、天门、潜江2024-2025学年高二生物下学期期末考试试题留意事项：1.本试卷共8页，三个大题，满分100分，考试时间90分钟。2.本试卷上不要答题，请按答题纸上的要求干脆把答案填写在答题纸上。答在试卷上的答案无效。一、单项选择题：本题共14小题，每小题2分，共28分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的。1.下图是基因工程主要技术环节中的一个基本步骤，这一步骤需用到的工具是A.限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.DNA聚合酶和限制性核酸内切酶C.DNA连接酶和解旋酶D.DNA聚合酶和RNA聚合酶2.利用PCR技术可获得目的基因，下列相关叙述正确的是A.PCR反应体系中须要添加耐高温的解旋酶B.PCR反应体系中须要添加4种含氮的碱基作为原料C.PCR反应体系中添加的DNA聚合酶的最适温度是92℃D.PCR反应体系方法扩增目的基因肯定要设计出2种引物3.下图为某科研小组采纳“基因靶向”技术，先将小鼠的棕褐毛色基因导人黑色纯种小鼠的胚胎干细胞(ES细胞)中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚接着发育成小鼠的过程。据图分析不正确的是A.该过程运用的工具酶是DNA连接酶、限制性核酸内切酶B.完成第Ⅱ步操作，得到由两个DNA片段连接成的产物，必定是载体与棕褐毛色基因形成的重组DNA分子C.第Ⅱ步操作完成后，还需筛选出目的基因已胜利导入的胚胎干细胞，并将该胚胎干细胞注射到囊胚中D.改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能接着发育成小鼠，其根本缘由是细胞核中含有一整套的遗传物质4.2024年诺贝尔生理学或医学奖授予了在“细胞感知和适应氧气供应”探讨中做出贡献的科学家。此项探讨以能够表达人类促红细胞生成索的小鼠模型为材料，并借助动物细胞培育技术进行探讨。下列相关叙述错误的是A.培育过程中，应定期更换培育液，以便清除细胞代谢产物B.培育过程中，要在培育基中加入--定量的血清，以防止培育过程中的污染C.培育过程中，添加CO2的目的是维持培育液的pHD.用该技术培育的动物细胞可以用于筛选抗癌药物5.下图表示单克隆抗体制备过程的各阶段。请据图分析，下列说法不正确的是A.单克隆抗体制备过程的依次是：B.融合后的杂交瘤细胞具有在体外大量繁殖、产生特异性抗体的特性C.从图中可以看出，此过程运用的技术手段有动物细胞融合和动物组织培育D.“生物导弹”的成分为单克隆抗体加药物6.中国科学院动物探讨所首席科学家、动物克隆与受精生物学学科带头人陈大元，曾主持科研攻关项目一“攀登”，进行大熊猫的异种克隆。他们将大熊猫的体细胞核放入兔子的去核卵母细胞之中，并使其胜利发育成囊胚，标记着异种核质相容的问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”，接下来至关重要的是选择一种合适的“代孕母体”。下图是该探讨的理论流程图。下列说法正确的是A.步骤甲、乙分别是指大熊猫体细胞核移植、胚胎收集B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞C.重组细胞发育成早期胚胎所需养分主要来源于养分液D.步骤甲和步骤乙中的供体和受体须要同期发情处理7.蓝莓中富含的花青素能有效地改善视力，下图为科学家利用植物组织培育大量培育蓝莓的详细流程图解。下列相关叙述正确的是A.以蓝莓的花药作为外植体培育的幼苗可干脆用于生产栽培B.培育基中加入蔗糖的主要目的是供应能量和维持渗透压C.上述过程中运用的培育基的主要成分是生长素和赤霉素D.形成愈伤组织过程中细胞的分化程度上升、全能性降低，长出丛芽生根过程为再分化8.牛的雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培育液中添加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是A.H-Y单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌B.若做DNA分析鉴定性别应选用桑椹胚时期滋养层细胞C.用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体D.鉴定后的雄性胚胎可干脆做胚胎移植9.哺乳动物如牛羊等是人类生活中重要的肉制品和皮毛制品的原料来源，但哺乳动物妊娠时间长，每胎产子数量少，繁殖速度比较慢。为了加快优良种畜的繁殖速度，目前采纳的方法中最好的是A.胚胎移植B.动物细胞融合C.动物细胞培育D.核移植10.在制作果酒的过程中，检测发觉发酵液的pH始终下降，缘由是A.乳酸菌无氧呼吸产生的乳酸呈酸性B.酵母菌无氧呼吸产生的酒精呈酸性C.酵母菌无氧呼吸产生的乳酸呈酸性D.酵母菌有氧和无氧呼吸均产生CO2，CO2溶于发酵液中使pH下降11.下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，下列叙述错误的是A.能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素B.图中逐级稀释的程度会干脆影响细菌培育基上的菌落数量C.培育基中可添加KH2PO4、Na2HPO4以供应无机盐和作为缓冲剂D.培育基①应以尿素为唯一氮源，培育基②的作用是纯化培育产脲酶细菌12.由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述不正确的是A.“瞄准装置”由识别癌细胞的单克隆抗体构成B.“弹头”由放射性同位素、化学药物或细胞毒素等物质构成C.“弹头”中的药物有选择性杀伤癌细胞的功能D.“生物导弹”是利用细胞工程技术制造出来的13.测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培育，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍的稀释液，其缘由是A.细菌个体小，真菌个体大B.细菌易稀释，真菌不易稀释C.细菌在土壤中的含量比真菌高D.随机的，没有缘由14.统计细菌数目的方法有①涂布平板法②干脆计数法③滤膜法A.①②③B.①③C.②③D.①②二、不定项选择题：本题共6小题，每小题3分，共18分。每小题给出的四个选项中，有的只有一个选项正确，有的有多个选项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。15.下图表示应用基因工程技术生产干扰素的三条途径，下列相关叙述错误的是A.途径甲中，过程Ⅰ应将干扰素基因和乳腺蛋白基因的启动子重组B.途径乙中，过程Ⅱ一般采纳农杆菌转化法C.途径丙中，过程Ⅱ可用Ca2+处理大肠杆菌，以制备感受态细胞D.在三条途径中，过程Ⅲ依据的生物学原理相同16.下图是“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是A.培育出的“白菜-甘蓝”植株能产籽B.愈伤组织的代谢是自养需氧型C.上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化过程D.“白菜-甘蓝”杂种植株具有两个亲本的全部性状17.梅花鹿属于单胎动物，季节性发情，育种工作者希望通过胚胎工程技术对优良品种进行扩大繁殖。下列有关叙述错误的是A.胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力B.培育早期胚胎的培育液中含有维生素、激素等多种能源物质C.当受体数量有限时，可采纳胚胎分割技术获得更多的后代D.梅花鹿的胚胎形成后始终处于游离状态，为胚胎收集供应可能18.野生黑芥(2n=16)具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜(2n=18)易患黑腐病而减产，探讨者用肯定剂量的紫外线处理黑芥原生质体使其染色体片段化，再诱导完整的花椰菜原生质体与紫外线处理的黑芥原生质体融合，流程如下图。下列相关叙述正确的是A.过程①需用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体B.过程①②③④均需在无菌无毒的环境中操作C.从过程③到过程④须要更换新的培育基D.体细胞中含有34条染色体的即为所需的杂种植株19.养殖池中存在的有毒物质主要是氨和亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌汲取利用。下列关于“养殖池底泥中硝化细菌的分别与计数”试验的叙述中，错误的是A.须要配制添加肯定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培育基，以筛选硝化细菌B.应对采集底泥运用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行C.可以采纳平板划线法进行接种，还需与未接种的空白培育基同时培育D.应将接种后的培育皿放在光照培育箱中培育，缘由是硝化细菌为自养微生物20.下图为“土壤中分解尿素的细菌的分别和计数”试验中样品稀释示意图。请据图分析，下列说法不正确的是A.③号试管的稀释倍数为103倍B.④号试管中稀释液进行平板培育得到的菌落平均数可能恰为⑤号试管的10倍C.⑤号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个D.该试验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目多三、非选择题：本题共5小题，共54分。21.(12分)WWP2基因在肿瘤细胞中高度表达，WWP2蛋白参加肿瘤细胞的生长、存活和转移等。为获得较多WWP2蛋白，利用基因工程技术设计引物，其中正向引物5'端含有EcoRⅠ酶切位点，反向引物5'端含有XhoⅠ酶切位点。将WWP2基因与相应载体构建重组质粒导入人胚肾细胞。请回答下列问题：(1)利用上述引物，以肺癌细胞的cDNA为模板，通过扩增的编码序列，获得须要的目的基因片段。(2)把获得的目的基因片段和相应的载体都用进行酶切，分别在5'端与3'端形成，避开自身环化。然后利用将目的基因片段和相应载体连接，得到重组质粒。(3)先将重组质粒导入经处理过的大肠杆菌细胞，培育后从中分别得到较多的重组质粒。(4)培育人胚肾细胞时，先用使人胚肾细胞分散成单个细胞，用含有的合成培育液培育，并将培育瓶置于体积分数为5%的与95%的空气混合的气体环境培育箱中培育。(5)将重组质粒导入人胚肾细胞中，48小时后提取蛋白质并检测到WWP2蛋白，说明。(6)致癌因子会损伤肺泡细胞中的，使原癌基因和抑癌基因发生突变。探讨WWP2蛋白的表达，为肺癌治疗新靶点奠定了基础。22.(11分)现代生物工程技术推动了农牧业、医药学、免疫学和生态学的发展。依据现代生物技术的相关学问和原理，回答下列问题：(1)我国科学家胜利地把人的干扰素基因“嫁接”到了烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的实力。将含有干扰素基因的基因表达载体导入烟草细胞中，常用的方法是。将干扰素基因导入烟草细胞后，要检测烟草细胞的，这是干扰素基因能否在烟草细胞中稳定遗传的关键。(2)动物体细胞核移植过程中，利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞去核处理一般选择在(时期)进行。在制备单克隆抗体过程中，经特定的选择性培育基筛选后的杂交瘤细胞，还需进行，经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体与传统方法获得的抗体相比，具有的特点是，广泛应用于疾病诊断。(3)体外受精、早期胚胎培育是胚胎工程的重要环节，要获得足够的受精卵，可对供体母牛注射，使其超数排卵，随后与进行体外受精。(4)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚的内细胞团或胎儿的原始性腺中分别得到的一类细胞。将胚胎干细胞置于饲养层上进行培育，其目的是。23.(11分)夏日炎炎，空调是人们日常生活不行或缺的家电之一。舒爽的凉风里可能藏着引发“空调病”的危急分子——嗜肺军团菌，该病菌被免疫细胞吞噬后不被分解而让自己不断扩增壮大，最终导致重症肺炎。请回答下列问题：(1)嗜肺军团菌培育基中的养分成分包括和特别养分物质五大类，配制好的培育基通常采纳法进行灭菌。(2)为了避开培育基在培育过程中被污染，一般需将含有培育基的培育皿。为了解除培育基被污染，需设置接种等量的培育基作为空白比照。(3)筛选获得的嗜肺军团菌株经鉴定后，将菌株进行液体扩大培育用于药物探讨，培育时须要振荡，其主要目的是。为了测定培育液中的菌体数量，一般采纳法将肯定量的菌液接种到固体培育基上，该方法是通过统计平板上的菌落数来推想样品中的活菌数，一般选择菌落数在的平板进行计数，该方法运用时需对菌种进行梯度稀释，缘由是。24.(12分)1965年Mintz首次得到了存活至成年的正常嵌合小鼠，1970年以来相继获得了小鼠、大鼠、兔的嵌合体，其中比较典型的是“山羊-绵羊”嵌合体(流程如下图所示)，请据图回答问题：(1)正常状况下，二倍体动物是单精受精，阻挡多精人卵的机制是。(2)若通过体外受精制备山羊(绵羊)早期胚胎，则采集的精子常采纳法进行获能处理，卵子应培育到(时期)才能进行受精。(3)ES细胞除可取自早期胚胎外还可取自；据图可知将山羊的ES细胞注射进绵羊囊胚的处；选择ES细胞是利用其在功能上具有。(4)“山羊-绵羊”嵌合体胚胎移人受体子宫内能接着发育，其生理学基础是，多余胚胎可以保存。25.(8分)植物组织培育技术在科学探讨和生产实践中得到了广泛的应用。请回答下列问题：(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术的特点是(请列举两点)。(2)通过组织培育技术可把植物组织细胞培育成胚状体，再通过人工种皮(人工薄膜)包装得到人工种子，如下图所示，这种人工种子在相宜条件下可萌发生长。人工种皮具备透气性的作用是。人工胚乳能够为胚状体生长供应所需的物质，因此应含有植物激素、和等物质。(3)用脱毒苗进行繁殖，可以削减作物感染病毒。为了获得脱毒苗，可以选取植物的进行组织培育。(4)植物组织培育技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培育成一个完整植株的基本程序是(请用流程图表示)。仙桃、天门、潜江2024-2025学年度其次学期期末考试高二生物试题参考答案及解析一、单项选择题：本题共14小题，每小题2分，共28分。1.A[解析]图示表示基因表达载体的构建过程，该过程首先须要用限制性核酸内切酶(限制酶)切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒，其次还须要用DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒。故选A。2.D[解析]PCR反应体系中不须要加入解旋酶，因为PCR过程中是靠高温使DNA热变性，进而解开双链DNA的，A错误；PCR反应体系中须要添加四种脱氧核苷酸作为原料，B错误；PCR过程一般经验下述三十多次循环：90℃下使模板DNA变性、解链→50℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延长(形成新的脱氧核苷酸链)。因此，PCR反应体系中添加的DNA聚合酶的最适温度是72℃，C错误；PCR反应体系方法扩增目的基因肯定要设计出2种引物，D正确。3.B[解析]该过程采纳了基因工程技术，而基因工程所需的工具酶有两种，即DNA连接酶和限制酶，A正确；第Ⅱ步操作是基因表达载体的构建，获得载体与棕褐毛色基因形成的重组DNA分子几率很小，还须要筛选，B错误；第Ⅲ步操作，目的基因不肯定能胜利转移到胚胎干细胞中，因此经过筛选目的基因已胜利转移的胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中，C正确；由于胚胎干细胞的细胞核中含有一整套的遗传物质，因此改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能接着发育成小鼠，D正确。4.B[解析]动物细胞培育过程中须要定期更换培育液以便清除代谢产物，A正确；培育过程中，要在培育基中加肯定量的抗生素防止培育过程中的污染，B错误；培育过程中，须要肯定的气体环境，其中CO2的主要作用是维持培育液的pH，C正确；用该技术培育的动物细胞可以用于筛选抗癌药物，D正确。5.C[解析]单克隆抗体制备过程包括获得具有免疫实力的效应B细胞和骨髓瘤细胞、诱导细胞融合和筛选出杂交瘤细胞、克隆化培育和抗体检测并筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞、体外或体内培育杂交瘤细胞、获得大量单克隆抗体。因此按单克隆制备过程的依次用箭头把代表各图解的字母连接为A正确；在单克隆抗体产生过程中，之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为融合成的杂交瘤细胞具备融合前两种细胞的优点，既能无限繁殖，又能产生特定的抗体，B正确；此过程运用的技术手段有动物细胞培育和细胞融合技术，C错误；“生物导弹”的成分为单克隆抗体加药物，D正确。6.B[解析]步骤甲、乙分别是指细胞核移植、胚胎移植，A错误；诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素，只能作用于性腺细胞，B正确；重组细胞发育成早期胚胎所需养分主要来源于受精卵，C错误；步骤甲不须要同期发情处理，D错误。7.B[解析]蓝莓的花药作为外植体培育的幼苗属于单倍体，不能干脆用于生产栽培，A错误；培育基中加入蔗糖的主要目的是供应能量和维持渗透压，B正确；上述过程中运用的培育基的主要成分是生长素和细胞分裂素，C错误；形成愈伤组织的过程是脱分化，细胞的分化程度会降低，全能性上升，长出丛芽、生根过程为再分化，D错误。8.C[解析]单克隆抗体是由杂交瘤细胞分泌产生的，A错误；做性别鉴定时应选择囊胚期的滋养层细胞，B错误；用H-Y抗原免疫母牛，使其体内发生体液免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，C正确；由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴定后的雌性胚胎可干脆进行胚胎移植，雄性胚胎没有意义，D错误。9.A[解析]胚胎移植可充分发挥优秀个体的繁殖潜力，缩短繁殖周期，增加一生繁殖的后代数量，A正确；动物细胞融合是将两个或多个动物细胞结合形成一个杂种细胞，B错误；动物细胞培育的目的是获得细胞或细胞产物，C错误；核移植技术能加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育，但胚胎成活率低，而且还存在动物的健康问题，因此应用并不广泛，D错误。10.D[解析]参加果酒制作的微生物是酵母菌，在果酒制作过程中，首先要通气让酵母菌进行有氧呼吸(产物是CO2和水)而大量繁殖；再密封让酵母菌进行无氧呼吸(产物是酒精和CO2)。可见，酵母菌进行有氧和无氧呼吸时均产生CO2，CO2溶于发酵液中使pH下降。故选D。11.D[解析]酶具有专一性，能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素，A正确；稀释度越低，细菌培育基上菌落数越多；稀释度越高，细菌培育基上菌落数越少，所以逐级稀释的程度会干脆影响细菌培育基上的菌落数量，B正确；细菌的生长繁殖须要无机盐作为养分物质，培育基中添加KH2P04、Na2HPO4可供应无机盐同时也可以作为缓冲剂，C正确；培育基①为选择培育基，以尿素作为唯一氮源，培育基②为鉴别培育基，通过加入酚红指示剂，推断菌落四周指示剂是否变红，不是用于纯化培育产脲酶细菌，D错误。12.C[解析]单克隆抗体可与抗原(癌细胞)发生特异性结合，起到导向作用，A正确；“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成，杀伤癌细胞，B正确；“弹头”中的药物不具有选择作用，C错误；单克隆抗体运用了动物细胞工程中的动物细胞融合技术，D正确。13.C[解析]在土壤中的微生物，大约70%～90%是细菌，比真菌多，所以为了确保获得的菌落数在30～300之间，测土壤中细菌的数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培育，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍的稀释液。故选C。14.A[解答]①稀释涂布平板计数是依据微生物在固体培育基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培育特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞，①正确；②显微镜干脆计数法是利用血球计数板进行微生物的计数，缺点是无法区分死菌和活菌，②正确；③滤膜法可计数水样中的大肠杆菌，③正确。故选A.二、不定项选择题：本题共6小题，每小题3分，共18分。15.D[解析]为了让干扰素基因只在乳腺细胞中表达，构建基因表达载体时，要将改造后的人干扰素基因与山羊乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起，A正确；将目的基因导入植物细胞采纳最多的方法是农杆菌转化法，B正确；将重组质粒导入大肠杆菌时，需用Ca2+处理大肠杆菌使之成为感受态细胞，C正确；在三条途径中，过程Ⅲ依据的生物学原理不相同，途径甲多为显微注射法，途径乙多为农杆菌转化法，途径丙多为Ca2+转化法，D错误。16.AC[解析]白菜和甘蓝都是二倍体，它们的体细胞杂交后培育的“白菜-甘蓝”杂种植株中2个染色体组来自白菜，2个染色体组来自甘蓝，因此“白菜-甘蓝”属于异源四倍体，是可育的，能产籽，A正确；愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定型状态的薄壁细胞，没有叶绿体，不能进行光合作用产生有机物，因此愈伤组织的代谢类型是异养需氧型，B错误；上述过程包括去壁、原生质体融合、植物组织培育等，其结果是形成“白菜-甘蓝”幼苗，因此整个过程中包含着有丝分裂和细胞分化过程，C正确；“白菜-甘蓝”杂种植株具有两个亲本的部分性状，D错误。故选AC。17.BCD[解析]胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，A正确；培育液中的维生素和激素不是能源物质，B错误；梅花鹿属于单胎动物，因此当受体数量有限时，不能采纳胚胎分割技术以获得更多的后代，C错误；梅花鹿的胚胎形成后，早期处于游离状态，而不是始终处于游离状态，D错误。故选BCD.18.ABC[解析]细胞壁的成分是纤维素和果胶，所以用纤维素酶和果胶酶溶解细胞壁获得原生质体，A正确；过程①②③④均需在无菌无毒的环境中操作，以防止微生物污染，B正确；从过程③到过程④须要更换培育基，因为两个过程所用到的激素比例是不同的，C正确；黑芥原生质体经紫外线照耀后，染色体片段化，数量不能确定。所以最终所选的杂种植株染色体数不肯定是34条，D错误。故选ABC。19.ACD[解析]要分别硝化细菌，应当用以氨盐为唯一氮源的培育基，培育基中不能加入牛肉膏蛋白胨，A错误；获得纯净培育物的关键是防止外来杂菌污染，因此，应对采集底泥运用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在火焰旁进行，B正确；对微生物进行计数时应当采纳的接种方法是稀释涂布平板法，C错误；硝化细菌能进行化能合成作用，无法利用光能，故不用在光照培育箱中培育，D错误。故选ACD。20.AD[解析]③号试管中样品液的稀释倍数为104倍，A错误；④号试管的稀释倍数比⑤号试管低10倍，假如稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能恰为5号的10倍，B正确；⑤号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109(个)，C正确；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该试验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目少，D错误。故选AD。三、非选择题：本题共5小题，共54分。21.(12分)(1)PCR技术(1分)WWP2基因(1分)(2)EcoRⅠ酶和XhoⅠ酶(1分)不同的黏性末端(1分)DNA连接酶(1分)(3)Ca2+(1分)(4)胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理(1分)动物血清(或血浆)(1分)CO2(1分)(5)(重组质粒中的)目的基因(或WWP2基因)在人胚肾细胞中能够正常表达(2分)(6)DNA分子(1分)[解析](1)获得目的基因可以采纳PCR技术扩增，PCR扩增过程中须要引物与模板结合，因此以肺癌细胞的cDNA为模板与题干中的引物结合，然后扩增WWP2基因，获得须要的目的基因片段。(2)依据题意，目的基因的两端分别有EcoRⅠ酶切位点和XhoⅠ酶切位点，故同时用EcoRⅠ酶和XhoⅠ酶对目的基因片段和相应的载体进行酶切，分别在5’端与3'端形成不同的黏性末端，可以避开自身环化。然后利用DNA连接酶将目的基因片段和相应载体连接，得到重组质粒。(3)大肠杆菌细胞须要用肯定浓度的Ca2+溶液处理，使之处于感受态易于汲取重组质粒，重组质粒导入大肠杆菌后经过培育增殖，以便获得较多的重组质粒。(4)进行人胚肾细胞培育时，先用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶进行处理，使之分散成单个细胞，动物细胞培育过程中一般须要在合成培育基中添加动物血清或血浆，培育过程中须要在5%的CO2和95%的空气混合的气体环境中培育，CO2的作用是维持培育液的pH。(5)将重组质粒导入人胚肾细胞中，48小时后提取蛋白质并检测到WWP2蛋白，说明目的基因在人胚肾细胞中得到表达，合成了相应的蛋白质。(6)细胞癌变的缘由是由于致癌因子的作用，使得细胞内的DNA分子损伤，导致原癌基因和抑癌基因发生突变。22.(11分)(1)农杆菌转化法(1分)染色体DNA上是否插入了干扰素基因(2分)(2)减数其次次分裂的中期(1分)克隆化培育和抗体检测(2分)特异性强、灵敏度高，并可大量制备(2分)(3)促性腺激素(1分)获能的精子(1分)(4)维持细胞不分化状态(1分)[解析](1)将含有干扰素基因的基因表达载体导入烟草细胞中，常用的方法是农杆菌转化法。将干扰素基因导入烟草细胞后，要检测烟草细胞的染色体DNA上是否插入了干扰素基因，这是干扰素基因能否在烟草细胞中稳定遗传的关键。(2)动物体细胞核移植过程中，利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞去核处理一般选择在减数其次次分裂的中期进行。在制备单克隆抗体过程中，经特定的选择性培育基筛选后的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培育和抗体检测，经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体与传统方法获得的抗体相比，具有特异性强、灵敏度高，并可大量制备的特点，广泛应用于疾病诊断。(3)胚胎工程的体外受精过程中要获得足够的受精卵，可对供体母牛注射促性腺激素，随后与获能的精子进行体外受精。(4)将胚胎干细胞置于饲养层上进行培育，其目的是维持细胞不分化状态。23.(11分)(1)碳源、氮源、水、无机盐(2分)高压蒸汽灭菌(1分)(2)倒置(1分)无菌水(1分)(3)增大培育液中的溶氧量、使菌株与培育基中的养分物质充分接触(2分)稀释涂布平板(1分)30～300(1分)当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌(2分)[解析](1)一般培育基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等养分成分。所以嗜肺军团菌的培育基的养分成