PCR基础知识单选题100道及答案解析

PCR基础知识单选题100道及答案解析1.PCR技术的全称是（）A.聚合酶链式反应B.聚合酶反应C.链式聚合反应D.核酸聚合反应答案：A解析：PCR技术的全称是聚合酶链式反应。2.PCR反应中使用的酶是（）A.DNA连接酶B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶D.解旋酶答案：B解析：PCR反应中使用的酶是耐高温的DNA聚合酶。3.PCR反应的基本步骤不包括（）A.变性B.退火C.延伸D.转录答案：D解析：PCR反应的基本步骤包括变性、退火、延伸，转录不是PCR的步骤。4.PCR反应中，使双链DNA解链的温度通常为（）A.50-60℃B.70-75℃C.90-95℃D.100℃答案：C解析：使双链DNA解链的温度通常为90-95℃。5.以下哪种物质不是PCR反应体系的必需成分（）A.模板DNAB.dNTPC.蛋白酶D.引物答案：C解析：PCR反应体系的必需成分包括模板DNA、dNTP、引物和DNA聚合酶等，不需要蛋白酶。6.PCR反应中引物的作用是（）A.提供3'-OH末端B.解旋DNAC.连接DNA片段D.识别特定序列答案：A解析：引物的作用是提供3'-OH末端，使DNA聚合酶能够启动DNA合成。7.以下关于PCR退火温度的描述，正确的是（）A.低于引物的Tm值5℃左右B.高于引物的Tm值5℃左右C.与引物的Tm值相同D.随机设定答案：A解析：PCR退火温度通常低于引物的Tm值5℃左右。8.PCR产物的长度主要由（）决定A.引物长度B.模板长度C.延伸时间D.循环次数答案：A解析：PCR产物的长度主要由引物决定。9.以下哪种因素会影响PCR反应的特异性（）A.引物浓度B.镁离子浓度C.退火温度D.循环次数答案：C解析：退火温度对PCR反应的特异性影响较大。10.在PCR反应中，镁离子的作用是（）A.稳定DNA结构B.激活DNA聚合酶C.降低反应温度D.增加产物产量答案：B解析：镁离子可以激活DNA聚合酶的活性。11.实时荧光定量PCR中，用于检测产物量的是（）A.荧光强度B.吸光度C.电导率D.折射率答案：A解析：实时荧光定量PCR通过检测荧光强度来反映产物量。12.以下哪种PCR技术可以用于检测基因突变（）A.常规PCRB.巢式PCRC.等位基因特异性PCRD.以上均可答案：C解析：等位基因特异性PCR常用于检测基因突变。13.PCR反应中，每经过一个循环，DNA量大约增加（）A.1倍B.2倍C.4倍D.8倍答案：B解析：每经过一个循环，DNA量大约增加1倍，即2倍。14.以下哪种方法可以提高PCR反应的效率（）A.增加引物长度B.降低退火温度C.减少dNTP浓度D.增加模板量答案：D解析：增加模板量可以提高PCR反应的效率。15.多重PCR是指（）A.同时扩增多个基因片段B.多次进行PCR反应C.使用多种引物D.以上都不是答案：A解析：多重PCR是指在一个反应体系中同时扩增多个基因片段。16.以下哪种PCR技术可以降低非特异性扩增（）A.热启动PCRB.降落PCRC.不对称PCRD.以上都是答案：D解析：热启动PCR、降落PCR等都可以降低非特异性扩增。17.PCR反应中使用的dNTP包括（）A.dATP、dGTP、dCTP、dTTPB.dAMP、dGMP、dCMP、dTMPC.ATP、GTP、CTP、TTPD.AMP、GMP、CMP、TMP答案：A解析：PCR反应中使用的dNTP包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP。18.以下哪种情况可能导致PCR反应失败（）A.引物设计不合理B.模板DNA浓度过高C.延伸时间过长D.以上都有可能答案：D解析：引物设计不合理、模板DNA浓度过高或过低、延伸时间过长或过短等都可能导致PCR反应失败。19.以下关于PCR缓冲液的描述，错误的是（）A.提供适宜的pH环境B.稳定反应体系C.直接参与反应D.有助于酶的活性答案：C解析：PCR缓冲液不直接参与反应，主要是提供适宜的环境和稳定体系。20.以下哪种PCR技术常用于基因表达分析（）A.逆转录PCRB.原位PCRC.甲基化特异性PCRD.以上都不是答案：A解析：逆转录PCR常用于基因表达分析。21.PCR反应中，延伸的温度一般为（）A.50-55℃B.60-65℃C.70-75℃D.80-85℃答案：C解析：延伸的温度一般为70-75℃。22.以下哪种物质可以增加PCR反应的特异性（）A.甘油B.DMSOC.甲酰胺D.以上都是答案：D解析：甘油、DMSO、甲酰胺等都可以增加PCR反应的特异性。23.巢式PCR的优点是（）A.提高特异性B.增加灵敏度C.减少非特异性扩增D.以上都是答案：D解析：巢式PCR具有提高特异性、增加灵敏度和减少非特异性扩增等优点。24.不对称PCR主要用于（）A.制备单链DNAB.定量分析C.检测基因突变D.以上都不是答案：A解析：不对称PCR主要用于制备单链DNA。25.以下关于PCR循环次数的描述，正确的是（）A.越多越好B.越少越好C.根据模板量确定D.固定为30次答案：C解析：PCR循环次数需要根据模板量等因素确定，不是固定的，也不是越多或越少越好。26.PCR实验中，防止污染的措施不包括（）A.分区操作B.使用一次性耗材C.操作人员不戴手套D.定期对实验室消毒答案：C解析：操作人员应戴手套以防止污染，其他选项都是防止污染的措施。27.以下哪种模板不适合用于PCR反应（）A.基因组DNAB.cDNAC.蛋白质D.mRNA答案：C解析：PCR反应的模板是核酸，蛋白质不适合用于PCR。28.以下哪种PCR技术可以用于检测微生物（）A.随机扩增多态性DNAPCRB.重组PCRC.长片段PCRD.以上都可以答案：A解析：随机扩增多态性DNAPCR可以用于检测微生物。29.PCR反应体系中，引物的浓度通常为（）A.0.1-0.5μmol/LB.0.5-1.0μmol/LC.1.0-2.0μmol/LD.2.0-5.0μmol/L答案：A解析：引物的浓度通常为0.1-0.5μmol/L。30.以下关于实时荧光定量PCR标准曲线的描述，错误的是（）A.用于定量分析B.反映起始模板量与荧光强度的关系C.可以无限延伸D.需绘制多个已知浓度的标准品答案：C解析：标准曲线是有限的，不是可以无限延伸的。31.以下哪种因素不会影响PCR产物的纯度（）A.引物的特异性B.模板的质量C.反应时间D.实验室的温度答案：D解析：实验室的温度一般不会直接影响PCR产物的纯度。32.PCR反应中，模板DNA变性不完全可能导致（）A.产物量增加B.非特异性扩增C.特异性扩增增强D.无影响答案：B解析：模板DNA变性不完全可能导致非特异性扩增。33.以下哪种PCR技术可以用于DNA测序（）A.末端终止法PCRB.热不对称交错PCRC.重叠延伸PCRD.以上都不是答案：B解析：热不对称交错PCR可以用于DNA测序。34.以下关于PCR反应体系优化的描述，错误的是（）A.一次优化一个因素B.同时优化多个因素C.以产物量和特异性为指标D.无需考虑成本答案：D解析：PCR反应体系优化需要考虑成本等因素。35.以下哪种情况可能导致PCR产物出现弥散带（）A.退火温度过高B.延伸时间过短C.模板量过少D.引物浓度过低答案：B解析：延伸时间过短可能导致PCR产物出现弥散带。36.实时荧光定量PCR中，SYBRGreen法的原理是（）A.特异性结合双链DNAB.特异性结合单链DNAC.与引物结合D.与dNTP结合答案：A解析：SYBRGreen法的原理是特异性结合双链DNA。37.以下哪种PCR技术可以用于扩增已知一端序列的未知DNA片段（）A.反向PCRB.原位PCRC.连接酶链反应D.以上都不是答案：A解析：反向PCR可以用于扩增已知一端序列的未知DNA片段。38.PCR产物的检测方法不包括（）A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.酶联免疫吸附测定D.测序答案：C解析：酶联免疫吸附测定不是PCR产物的检测方法。39.以下关于PCR实验室布局的描述，错误的是（）A.分为试剂准备区、样本制备区和扩增区B.各区之间无需隔离C.气流应单向流动D.避免交叉污染答案：B解析：PCR实验室各区之间需要严格隔离。40.以下哪种情况可能导致PCR出现假阳性结果（）A.引物二聚体B.模板污染C.退火温度过低D.延伸时间过长答案：B解析：模板污染可能导致PCR出现假阳性结果。41.以下哪种PCR技术可以用于检测DNA甲基化（）A.甲基化特异性PCRB.多重连接依赖式探针扩增C.等位基因特异性PCRD.以上都是答案：A解析：甲基化特异性PCR用于检测DNA甲基化。42.PCR反应中，dNTP的浓度通常为（）A.50-200μmol/LB.20-200μmol/LC.5-50μmol/LD.0.5-5μmol/L答案：A解析：dNTP的浓度通常为50-200μmol/L。43.以下关于PCR引物设计的原则，错误的是（）A.引物长度一般为15-30bpB.G+C含量应在40%-60%C.避免引物自身互补D.无需考虑引物的Tm值答案：D解析：引物设计需要考虑引物的Tm值。44.以下哪种情况可能导致PCR出现假阴性结果（）A.引物设计不当B.反应体系中存在抑制剂C.模板量过多D.以上都是答案：D解析：引物设计不当、反应体系中存在抑制剂、模板量过多等都可能导致PCR出现假阴性结果。45.以下哪种PCR技术可以用于快速诊断病原体（）A.实时荧光定量PCRB.巢式PCRC.多重PCRD.以上都是答案：D解析：实时荧光定量PCR、巢式PCR、多重PCR等都可用于快速诊断病原体。46.PCR反应中，镁离子浓度过高可能导致（）A.特异性增强B.非特异性扩增C.产物量减少D.无影响答案：B解析：镁离子浓度过高可能导致非特异性扩增。47.以下关于PCR产物保存的描述，正确的是（）A.室温保存B.4℃保存C.-20℃保存D.以上均可答案：C解析：PCR产物一般应-20℃保存。48.以下哪种PCR技术可以用于基因突变的定量分析（）A.数字PCRB.等位基因特异性PCRC.甲基化特异性PCRD.以上都不是答案：A解析：数字PCR可以用于基因突变的定量分析。49.PCR反应中，使用的模板DNA量通常为（）A.1-100ngB.10-100ngC.100-1000ngD.1000-10000ng答案：A解析：PCR反应中，使用的模板DNA量通常为1-100ng。50.以下哪种情况可能影响PCR反应的重复性（）A.移液器不准确B.反应条件不稳定C.试剂质量差异D.以上都是答案：D解析：移液器不准确、反应条件不稳定、试剂质量差异等都可能影响PCR反应的重复性。51.以下关于PCR技术的应用，错误的是（）A.基因克隆B.亲子鉴定C.蛋白质合成D.疾病诊断答案：C解析：PCR技术用于核酸的扩增，不能直接用于蛋白质合成。52.实时荧光定量PCR中，Ct值的含义是（）A.荧光信号达到设定阈值时的循环数B.产物量达到最大值时的循环数C.反应结束时的循环数D.以上都不是答案：A解析：Ct值是荧光信号达到设定阈值时的循环数。53.PCR反应中，退火时间通常为（）A.5-15sB.15-30sC.30-60sD.60-90s答案：B解析：退火时间通常为15-30s。54.以下哪种PCR技术可以用于分析基因拷贝数变异（）A.比较基因组杂交PCRB.等位基因特异性PCRC.多重PCRD.以上都不是答案：A解析：比较基因组杂交PCR可用于分析基因拷贝数变异。55.以下关于PCR实验室质量管理的描述，错误的是（）A.定期进行仪器校准B.无需对实验人员进行培训C.对试剂进行质量控制D.建立完善的记录制度答案：B解析：PCR实验室需要对实验人员进行培训。56.PCR反应中，使用的DNA聚合酶具有（）A.3'-5'外切B.5'-3'外切C.3'-5'内切D.5'-3'内切答案：A解析：PCR反应中使用的DNA聚合酶具有3'-5'外切活性，有助于保证扩增的准确性。57.以下哪种情况可能导致PCR扩增效率降低（）A.引物浓度过高B.模板DNA纯度高C.镁离子浓度适宜D.退火温度过低答案：A解析：引物浓度过高可能会导致PCR扩增效率降低，还可能增加非特异性扩增。58.巢式PCR中，第二轮PCR所用的引物位于（）A.第一轮引物的外侧B.第一轮引物的内侧C.与第一轮引物相同D.随机位置答案：B解析：巢式PCR中，第二轮PCR所用的引物位于第一轮引物的内侧。59.以下关于PCR产物纯化的方法，错误的是（）A.乙醇沉淀B.凝胶电泳后切胶回收C.过柱纯化D.无需纯化，可直接用于后续实验答案：D解析：PCR产物通常需要纯化以去除杂质和引物二聚体等，不能直接用于后续实验。60.实时荧光定量PCR中，TaqMan探针法的原理是（）A.探针与模板结合后被水解B.探针与产物结合发出荧光C.探针自身发出荧光D.以上都不是答案：A解析：TaqMan探针法的原理是探针与模板结合后被水解，从而产生荧光信号。61.以下哪种因素会影响PCR反应的退火温度（）A.引物的长度和碱基组成B.模板的浓度C.延伸时间D.循环次数答案：A解析：引物的长度和碱基组成会影响PCR反应的退火温度。62.不对称PCR中，两种引物的比例通常为（）A.1:1B.1:50-1:100C.50:1-100:1D.随机比例答案：B解析：不对称PCR中，两种引物的比例通常为1:50-1:100。63.以下哪种PCR技术可以用于病毒的检测（）A.普通PCRB.实时荧光定量PCRC.多重PCRD.以上均可答案：D解析：普通PCR、实时荧光定量PCR和多重PCR等都可以用于病毒的检测。64.PCR反应中，延伸时间取决于（）A.产物长度B.引物长度C.模板长度D.反应体系体积答案：A解析：PCR反应中，延伸时间主要取决于产物长度。65.以下关于PCR反应体系中各成分作用的描述，错误的是（）A.模板提供扩增的目标序列B.引物决定扩增的特异性和起始位置C.dNTP是合成新链的原料D.缓冲液主要提供能量答案：D解析：缓冲液主要是维持反应体系的pH和离子强度等，不是提供能量。66.以下哪种情况可能导致PCR产物出现多条带（）A.引物特异性差B.退火温度过高C.模板量过少D.镁离子浓度过低答案：A解析：引物特异性差可能导致PCR产物出现多条带。67.热启动PCR的主要目的是（）A.提高扩增效率B.增加产物特异性C.缩短反应时间D.降低成本答案：B解析：热启动PCR的主要目的是增加产物特异性，减少非特异性扩增。68.以下关于PCR技术的局限性，描述错误的是（）A.对模板质量要求高B.容易出现假阳性和假阴性结果C.不能检测点突变D.不能定量分析答案：C解析：PCR技术可以通过特定的方法检测点突变，如等位基因特异性PCR等。69.以下哪种PCR技术可以用于检测基因重排（）A.长片段PCRB.反向PCRC.多重PCRD.以上都不是答案：A解析：长片段PCR可以用于检测基因重排。70.PCR反应中，若出现非特异性扩增，可采取的措施不包括（）A.提高退火温度B.减少引物浓度C.增加模板量D.更换DNA聚合酶答案：C解析：增加模板量一般不能解决非特异性扩增的问题。71.以下哪种情况可能导致PCR反应无法进行（）A.缺少dNTPB.引物设计合理C.镁离子浓度适宜D.模板DNA浓度适中答案：A解析：缺少dNTP会导致PCR反应无法进行。72.实时荧光定量PCR中，荧光阈值的设定原则是（）A.超过阴性对照的荧光值B.低于阳性对照的荧光值C.处于指数扩增期D.以上都不是答案：A解析：荧光阈值的设定原则是超过阴性对照的荧光值。73.以下关于PCR技术的发展历程，描述正确的是（）A.从定性检测到定量检测B.从低通量到高通量C.从单一技术到多种技术融合D.以上都是答案：D解析：PCR技术在发展过程中，实现了从定性到定量、从低通量到高通量、多种技术融合等转变。74.以下哪种PCR技术可以用于SNP分型（）A.高分辨率熔解曲线分析B.等位基因特异性PCRC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：高分辨率熔解曲线分析和等位基因特异性PCR都可以用于SNP分型。75.PCR反应中，若产物量过少，可采取的措施不包括（）A.延长延伸时间B.降低退火温度C.减少循环次数D.增加引物浓度答案：C解析：减少循环次数会导致产物量更少，而不是解决产物量过少的问题。76.以下关于PCR技术在法医学中的应用，错误的是（）A.个体识别B.亲子鉴定C.毒物分析D.犯罪现场勘查答案：C解析：PCR技术在法医学中主要用于个体识别、亲子鉴定和犯罪现场勘查等，不用于毒物分析。77.以下哪种PCR技术可以用于微生物群落分析（）A.变性梯度凝胶电泳PCRB.温度梯度凝胶电泳PCRC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：变性梯度凝胶电泳PCR和温度梯度凝胶电泳PCR都可以用于微生物群落分析。78.PCR反应中，若出现引物二聚体，可能的原因是（）A.引物浓度过高B.退火温度过低C.延伸时间过长D.镁离子浓度过高答案：A解析：引物浓度过高容易导致引物二聚体的形成。79.以下关于PCR技术在基因治疗中的应用，描述错误的是（）A.构建基因载体B.检测治疗效果C.直接修复基因缺陷D.以上都不是答案：C解析：PCR技术在基因治疗中主要用于构建基因载体和检测治疗效果，不能直接修复基因缺陷。80.实时荧光定量PCR中，常用的荧光染料除了SYBRGreen还有（）A.EvaGreenB.ROXC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：EvaGreen也是实时荧光定量PCR中常用的荧光染料，ROX通常作为参比荧光。81.以下哪种情况可能导致PCR反应的重复性差（）A.操作不规范B.仪器不稳定C.试剂批次不同D.以上都是答案：D解析：操作不规范、仪器不稳定、试剂批次不同等都可能导致PCR反应的重复性差。82.以下关于PCR技术在农业领域的应用，错误的是（）A.作物品种鉴定B.病虫害检测C.土壤成分分析D.以上都不是答案：C解析：PCR技术在农业领域可用于作物品种鉴定和病虫害检测，一般不用于土壤成分分析。83.以下哪种PCR技术可以用于检测基因融合（）A.融合PCRB.重叠延伸PCRC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：融合PCR和重叠延伸PCR都可以用于检测基因融合。84.PCR反应中，若模板DNA存在杂质，可能的影响是（）A.抑制酶活性B.降低扩增效率C.导致非特异性扩增D.以上都是答案：D解析：模板DNA存在杂质可能抑制酶活性、降低扩增效率和导致非特异性扩增。85.以下关于PCR技术在临床诊断中的优势，描述错误的是（）A.快速B.灵敏C.特异性高D.成本高答案：D解析：PCR技术在临床诊断中的优势包括快速、灵敏、特异性高，成本相对并不高。86.以下哪种PCR技术可以用于蛋白质表达分析（）A.逆转录PCRB.实时荧光定量PCRC.以上都是D.以上都不是答案：A解析：逆转录PCR可以将RNA逆转录为cDNA，从而用于蛋白质表达分析。87.PCR反应中，若镁离子浓度过低，可能的结果是（）A.产物量减少B.非特异性扩增增加C.引物退火不完全D.以上都是答案：D解析：镁离子浓度过低可能导致产物量减少、非特异性扩增增加、引物退火不完全等。88.以下关于PCR技术在食品安全检测中的应用，错误的是（）A.检测转基因成分B.检测食品中的致病菌C.检测食品的营养成分D.以上都不是答案：C解析：PCR技术在食品安全检测中可用于检测转基因成分和致病菌，一般不用于检测食品的营养成分。89.以下哪种PCR技术可以用于构建基因文库（）A.随机引物PCRB.简并引物PCRC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：随机引物PCR和简并引物PCR都可以用于构建基因文库。90.PCR反应中，若退火温度过高，可能的影响是（）A.引物与模板结合不充分B.产物特异性降低C.延伸效率下降D.以上都是答案：A解析：退火温度过高会导致引物与模板结合不充分。91.以下关于PCR技术在环境监测中的应用，描述正确的是（）A.检测水体中的污染物B.监测土壤