药学分子生物学

绪论

1.分子生物学的概念:是分子水平上研究生命体及其功能单元的结构，组成和功

能的科学

2.分子生物学核心内容：通过对生命体的物质基础—核酸，蛋白质，酶等生物

大分子的结构，组成，功能及其相互作用等的研究来阐明生命的分子基础，从而

探索生命的奥秘。

第一章基因与基因组

名词解释

1.启动子：DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域以及促

进这一过程的调节蛋白的结合位点。

2.增强子：增强基因启动子工作效率的顺式作用序列，能够在相对于启动子的任

何方向和位置上都发挥作用。！

3.基因突变：由于核酸序列发生变化，包括缺失突变，定点突变，移框突变等，

使之不再是原有基因的构象！

4.转录图：以基因的外显子序列或者表达序列标签为标记，精确地表明这些标记

在基因组或染色体上位置的物理图。

5.基因：是核酸分子上具有特定遗传效应的核昔酸序列的总称。（化学本质是

DNA）!

6.割裂基因：编码序列在DNA中是不连续的，被非编码序列分隔开的基因。

7.沉默子：对基因的转录起阻碍作用，使基因沉默。

8.终止子：在转录中提供终止信号，使转录作用终止。

9.基因组：细胞或生物体中，一套完整的单倍体遗传物质的总和成为基因组。

10.基因组学：是研究基因组的结构，功能及表达产物的学科

11.结构基因组学：是制作人类基因的遗传图和物理图，最终完成人类和其他重

要模式生物全部基因组DNA序列测定的学科。

简答题及论述题

1.简述真核生物基因的分类，结构及功能

（1）分类：编码蛋白质的基因和非编码RNA的基因

（2）结构：大对数是断裂基因，断裂基因的结构特点

（3）功能：储存遗传信息，传递遗传信息，基因表达与基因突变

2.原核生物基因组的特点

（1）基因组通常仅由一条环状双联DNA分子组成

（2）结构基因与调控序列以操纵子的形式组织在一起

（3）基因组中重复序列很少

（4）结构基因多为单拷贝

（5）基因是连续的

（6）编码序列一般不会重叠

（7）编码区在基因组中所占的比例远远大于真核基因组而小于病毒基因组

（8）细菌基因组中存在可移动的DNA序列

3.真核生物基因组的特点

（1）DNA都是双链线状且往往不是一条

（2）大多数结构基因因为割裂基因并受一系列顺式作用元件调控

（3）结构基因的转录产物是单顺反子

（4）基因组内非编码的序列远远大于编码区

（5）基因组中含有大量重复序列和基因家族

（6）基因组DNA的末端都有端粒结构

（7）基因组中也存在一些可移动的遗传因子

（8）基因组还包括细胞器基因组

4.结构基因组学根据采用方法不同，将绘制的图谱分为哪几类？

（1）遗传图（2）物理图（3）序列图（4）转录图

第二章DNA的复制，损伤与修复

名词解释

1.半保留复制：DNA复制时亲代DNA的两条链解开，每条链作为新链的模板，从

而形成两个子代DNA分子，每一个子代DNA分子包含一条亲代链和一条新合成的

链

2.复制起点：基因组中单一DNA复制时所需要的起始序列

3.复制子：作为含有一个复制起始点的独立复制单元的一个完整DNA分子或DNA

分子上的某段区域

4.复制叉：正在进行复制的双链DNA分子所形成的Y形区域

5.单链结合蛋白：DNA复制中的蛋白分子，与单链DNA发生动态结合，防止DNA

单链水解及重新结合成双链

6.拓扑异构酶：通过切断或连接DNA双链从而改变DNA分子超螺旋状态的酶

7.引物酶:DNA复制时，参与复制时的起始阶段，催化合成RNA引物的酶

8.DNA聚合酶:以DNA为指导的，催化DNA合成的酶

9.切除修复：切除DNA一条链上受损片段，以其互补链为模板合成正常DNA片段

修复DNA损伤

10.冈崎片段：是相对较短的DNA核昔酸序列

11.端粒：是存在于真核细胞线状染色体末端的一小段DNA-蛋白质复合体

简答题以及论述题

1.DNA聚合酶催化作用的条件

（1）需要DNA作为模板，因此称为依赖DNA的DNA聚合酶

（2）需要RNA作为引物，即不能直接连接两个游离的dNTP,只能在一段RNA引

物的3'-0H连接dNTP

（3）DNA合成的方向是5'-3'

2.DNA的修复类型

DNA修复分为复制修复（复制修复分为尿喀咤糖基酶系统、错配修复、无瞟吟修

复）、损伤修复（损伤修复分为光复活修复、甲基转移酶、切除修复（切除修复

分为碱基切除修复、核昔切除修复））、复制后修复（复制后修复分为大肠埃希菌

的重组修复系统、S0S修复）

3.DNA的复制大致分为（起始）、（延伸）、（终止）三个阶段

第三章转录及其调控

名词解释

1.转录：生物体在遗传信息传递过程中，以DNA为模板，在DNA依赖的RNA聚

合酶催化下，以4种三磷酸核昔为原料，合成RNA的过程称为转录！

2.启动子:在调控序列中，供RNA聚合酶辨认结合的模板DNA区段称为启动子！

3.结构基因：负责编码细胞代谢途径中组成蛋白质的基因。

4.外显子：基因组DNA中出现在成熟RNA分子上的序列

5.内含子：真核生物细胞DNA中的间插序列

6.反式作用因子：起反式作用的调控元件

7.顺式作用元件：起顺式作用的DNA序列

8.操纵子：转录的功能单位

9.转录因子：直接结合或间接作用于基因启动子、形成具有RNA聚合酶活性的动

态转录复合体的蛋白质因子

简答题及论述题

1.简述转录与复制的异同

相同点：

(1)转录和复制都是酶促的核昔酸聚合过程，都以DNA为模板

(2)都需要依赖RNA的聚合酶

(3)据和过程都是核甘酸之间生成磷酸二酯键

(4)都从5'至3'方向延伸生成新链多聚核昔酸

(5)都遵从碱基配对规律

不同点：

(1)“模板：复制过程中(两股链均复制，全部基因组被复制)，翻译过程中(只

有模板链转录，任一种细胞内仅部分基因转录)

(2)原料：复制：dNTP翻译：NTP

(3)酶：复制：DNA聚合酶翻译：RNA聚合酶

(4)产物：复制：子代双链DNA转录：mRNAtRNArRNA等

(5)碱基配对：复制：A-TG-C转录：A-TG-CA-U

2.真核生物RNA转录后如何加工修饰

mRNA前体:51前端加m7GpppG帽,3,端加polyA尾，去掉内含子，拼接外显

子，RNA编辑

tRNA前体：中间剪切，修饰形成稀有碱基，在3'末端加上CCA-0H结构

rRNA前体：剪切

3.简述原核生物的转录过程

(1)转录起始：RNA聚合酶全酶与模板结合，DNA双链解开，在RNA聚合酶作用

下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物

(2)转录延长：。亚基脱落，RNA-pol核心酶变构，于模板结合松弛，沿着DNA

模板前移，在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长

(3)：转录终止：RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来，转录产物RNA链从转录复

合物上脱落下来

4.转录的体系！

(1)：模板：DNA的一条链

(2)：原料：NTP

(3)：酶：RNA聚合酶

(4)：能量：ATP

(5)：产物：mRNAtRNArRNA

5.大肠埃希菌RNA聚合酶各亚基的功能！

(1)：a亚基决定哪些基因被转录

(2)：B亚基与转录全过程有关

⑶：B'亚基结合DNA模板

（4）：w亚基功能尚不清楚

（5）：6亚基辨认起始位点

6.转录的起始过程

原核：首先是RNA聚合酶识别并结合启动子，形成闭合转录复合体，接着DNA

双链局部接链，最后是磷酸二酯键的形成

真核：主要是RNA聚合酶、转录因子TF与DNA模板形成转录起始复合物的过

程

7.增强子的特点

（1）增强子增强基因转录的效应十分明显

（2）增强子发挥作用的方式通常与其方向或所在部位与转录起始点的距离无关

（3）增强子大多数为重复序列

（4）增强子增强基因转录的效应有严格的组织细胞特异性

（5）增强子没有基因专—性

（6）5强子的活性与其在DNA双螺旋结构中的空间方向性有关

（7）许多增强子是否发挥作用受外部信号驱使

第四章翻译及其调控

名词解释

1.分子伴侣：是细胞中一类可识别肽链的非天然构象，促进各功能域和整体蛋白

正确折叠的保守蛋白质。！

2.翻译：是以MRNA为模板指导蛋白质生物合成的过程

3.蛋白质生物合成的本质：将MRNA分子中四种核昔酸序列编码的遗传信息转换

成蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序

简答题及论述题

1.翻译合成体系

模板：MRNA

合成场所：核糖体

搬运工具：TRNA

2.蛋白质合成过程

（1）.真核生物:

3.遗传密码的特点！

（1）方向性

（2）连续性

（3）简并性

⑷简并性

（5）通用性

4.蛋白质转运机制

5.翻译的起始过程

（1）原核生物：

1.核糖体大小亚基分离

2.MRNA与核糖体小亚基定位结合

3.起始fMet-tRNAfMet就位

4.70S起始复合物的形成

（2）真核生物：

1.核糖体大小亚基的分离

2.起始Met-tRNAiMet

3.mRNA与核糖体小亚基的结合

4.80S起始复合物的形成

5,原核生物和真核生物的翻译起始复合物的生成有何不同？

（1）翻译的模板是MRNA

（2）翻译前先应形成起始复合物，即把MRNA和TRNA结合到核糖体上

第六章常用分子生物学技术

名词解释

1.Southern印记：通过核酸限制性内切酶降解样品中DNA,再经凝胶电泳分离，

将分离后的DNA片段从凝胶转移到吸附薄膜上并固定，随后用标记的探针进行杂

交，以检测目的的DNA

2.Northern印记：应用RNA或DNA探针检测特异MRNA的一种杂交技术，主要用

于分析基因的转录或MRNA分子

3.Western记：是常用语目的蛋白质定位检测的实验方法

4.生物芯片：是将核酸，多肽或蛋白质分子、细胞和组织切片等大量的生物大分

子制成探针，以预先设计的方式有序地，高密度的排列在玻片或硅片等载体上，

构成二维分子阵列，然后与待测生物样品靶分子阵列，然后与待测生物样品靶分

子杂交，通过检测杂交信号实现快速，高效，高通量样品检测

5.cDNA文库：指某一生物特定器官或特定发育阶段的细胞内总MRNA,应用逆转

录酶逆转录成cDNA,以此构建的重组DNA克隆群

6.基因敲除：是利用细胞染色体DNA可与外源性DNA同源序列发生同源重组的原

理，使特定靶基因失活，以研究该基因的功能

7.RNA干扰：是利用外源和内源性双链RNA在生物体内诱导同源靶基因的MRNA

特异性降解，导致转录后基因沉默的技术

简答题及其论述题

1.简述基因敲除的技术关键

（1）载体构建（2）基因敲除载体导入ES细胞（3）鉴定与筛选（4）基因敲

除动物产生

2.RNA干扰是如何发挥作用的

（1）起始阶段：dsRNA在核酸内切酶RNaseIII的作用下，被加工裂解为21-23nt

的由正义序列和反义序列组成的小干扰RNA

（2）效应阶段：siRNA与解旋酶、ATP及多个蛋白形成的核酸复合物结合形成

RNA诱导沉默复合体，最后呈现RNAi现象

3.RNAi作用机制及其特点

作用机制：上题答案T

特点：（1）具有高度特异性

（2）具有高效性（3）需要siRNA介导

（3）对靶基因位点的选择性

4.论述PCR的基本原理、过程、基本成分、类型！！！！！

基本原理：以扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板互补的寡核苦酸片段为

引物，在DNA聚合酶的作用下，以dNTPs为底物，按照半保留复制的原理，通过

变性，退火，延伸三步骤完成新的DNA合成，并反复重复这一过程，另一方面，

新合成的DNA片段也可以作为模板，因此PCR技术可使DNA的合成量呈指数增长

过程：由变性以及变性'退火、延伸三步级反复循环。

基本成分：（1）模板DNA（2）特异性引物（3）热稳定DNA聚合酶（4）脱氧核

昔三磷酸（5）二价阳离子（6）缓冲液（7）一价阳离子

类型：（1）巢式PCR

（2）反转录PCR

第七章药物基因组学

名词解释

1.单核昔酸多态性：是人类基因组DNA序列中最常见和最普遍的一种多态性。

2.等位位点：是针对单核昔酸多态性而言

3.基因型：除性染色体外，每个人体内的染色体都有两份，一个人所拥有的一对

等位位点的类型被称作基因型

4.单体型：指位于一条染色体上倾向于整体遗传的一组紧密连锁的遗传标志物

5.P糖蛋白：是一重要的药体转运体，由多药耐药基因蛋白1编码，定位于细胞

膜

6.尿昔二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶：是进行II相生物转化时最重要的一种酶，

通过葡萄糖醛酸化反应，将亲脂性底物转化为水溶性葡萄糖醛酸而随尿，胆汁和

粪便排出体外

6.药物基因组学：是在基因组水平上研究不同个体及人群对药物反应的差异，并

探讨用药个性化和以特殊人群为对象的新药开发的学科

7.药物不良反应：

简答题及论述题

1.简述药物基因组学与药物遗传学研究方法的异同

药物作用的差异有些是由遗传因素引起的，研究遗传因素对药物反应影响的学科

称为遗传药理学，它是研究临床药物治疗中个体反应差异的遗传学因素的学科，

认为遗传多态性可引起不同个体在服用药物时的药理学及毒理学的不同效果，从

而引起药物治疗效果的差异，随着人类基因组计划的启动和完成，对单个基因的

研究，逐渐转变为从基因组层面对多基因变异与药物应答影响的研究，遗传药理

学演变为药物基因组学，药物基因组学从基因组整体出发研究基因序列的多态性

与药物效应多样性之间的关系，研究基因本身及其突变体对不同个体药物作用效

应差异的影响，并以此为平台发现新的药物靶标，开发新的个性化药物。

2.作为第三代多态性标志，单核甘酸多态性SNP的特点有哪些？！！！！！！！！！

（1）是人类可遗传的变异最常见的一种

（2）数量多，分布广泛

（3）具有遗产稳定性

（4）具有二态性

（5）可以建立单体型区域

（6）部分位于基因内部的SNPs可能会直接影响蛋白质产物的结构或基因表达水

平

第八章药物转录组学

名词解释

1.转录组：指生命单元中所有按基因信息单元转录和加工的RNA分子，或者是

一个特定细胞所有转录本的总和

2.转录组学：广义转录学主要研究从一种细胞或者组织的基因组所转录出来的

RNA的总和

3.反义技术：一种新的药物开发方法，是根据核酸杂交原理设计针对特定靶序列

的反义核酸,通过阻抑从DNA至MRNA的转录过程或从MRNA到蛋白质的翻译过程,

从而阻断细胞中的蛋白质合成

4.反义药物：通常指反义寡核昔酸药物，指人工合成长度为15-25个碱基的DNA

分子及其类似物。

5.药物靶标：

6.核酶：是一类具有催化核酸水解和连接功能的核酸分子，是具有酶活性的RNA,

叙述题及简答题

1.转录组学研究方法

基因芯片技术，微阵列技术，表达序列标记技术，基因表达系列分析，大规模平

行信号测序系统和RNA测序技术

2.反义寡核苦酸药物优点/反义药物与传统药物的性质和作用对象明显不同，表

现在？

(1)特异性较强(2)信息量较大(3)反义药物以核酸为靶点，与蛋白质作

为靶点比较，更合理设计新药物(4)与传统药物比较反义药物更具有选择性及

高效率，因此也更高效低毒

第九章药物蛋白质组学

名词解释

1.蛋白质组：一个基因组，一个细胞，一个有机体或某一特定的组织类型所表达

的全部蛋白质，蛋白质组是一盒在时间和空间上动态变化的整体

2.蛋白质组学:采用大规模、高通量、高效率的技术手段研究蛋白质的特征。

3.双向凝胶电泳：一种根据蛋白质等电点和分子量的差异，连续进行垂直方向的

两次电泳而将待测蛋白质分离的技术

4.药物靶点：细胞内与药物相互作用，并赋予药物效应的特定分子

论述题及简答题

1.蛋白质组学研究方法

(1)双向电泳(2)多维色谱法(3)荧光差异凝胶电泳技术(4)定量蛋

白质组学方法

2.药物蛋白质组学应用！！！！！！

(1)构建药物筛选模型

(2)药物靶点的发现、验证和优化

(3)药物作用机制研究

(4)药物毒理机制研究

(5)耐药机制研究

(6)中药研究

3.蛋白质组学的主要研究技术

(1)双向凝胶电泳

(2)生物质谱

(3)基于质谱的定量蛋白质组学技术

(4)蛋白质芯片

(5)酵母双杂交

（6）生物信息学

第十章药物代谢组学

名词解释

1.代谢组：指一生物或细胞在特定生理时期内所有的低分子量代谢产物，是生物

体内源性代谢物质的动态整体

2.代谢组学：研究关于生物被扰动后其代谢产物种类、数量及其变化规律的科学

简答题及其论述题

1、简述代谢组学研究内容及特点

（1）内容：代谢组学着重研究生物整体、器官或者组织的内源性代谢物质的代

谢途径及其所受内外因素的影响及随时间变化的规律，并揭示代谢物与生理病理

变化之间的关系，以组群指标分析为基础，以高通量，高精密的仪器检测和数据

分析为手段，以信息建模与系统整合为目标

（2）特点：关注内源化合物，对生物体系中的小分子化合物进行定性定量研究,

内源性化合物的上调和下调指示了疾病、毒性、基因改变或环境因素的影响，内

源性化合物的变化指标可被用于疾病诊断和药物筛选

2.阐述代谢组学、基因组学'转录组学'蛋白组学之间的关系

（1）联系：关系十分密切，分别从DNA,MRNA,蛋白质和代谢产物的不同层面研究

生命体

（2）区别：1.代谢组学更接近表型2.代谢组学可谓生命体提供更全面的信息

3.简述代谢组学的优点

（1）基因和蛋白质表达的微小变化会在代谢物上得到放大，从而检测更容易

（2）代谢组学的研究不需建立全基因组测序及大量表达序列标签数据库

（3）代谢物的种类要选小于基因和蛋白质数目

（4）研究中采用的技术更通用，这是因为给定的代谢物在每个组织中都是一样

的缘故

4.代谢组学的分析技术

（1）.核磁共振技术

（2）色谱与质谱联用技术

（3）代谢组数据分析

第十一章外源基因表达与基因工程药物

名词解释

1.外源基因表达：通过自身的转录，翻译系统以及相应的调控元件，调控因子

等协调作用，将基因的转录单位首先转录成MRNA,随后以MRNA为模板，指

导所编码多肽的生物合成

2.质粒：细菌内独立于细菌“染色体”之外的能自主复制的共价闭合环状双链

DNA,随着细菌分裂，能够稳定的靶自己的遗传特性传递给子代细胞

3.宿主细胞：接纳重组子并实现重组子的外源基因转录扩增或及表达的受体细

月包

4.转导：噬菌体颗粒感染宿主细胞，将噬菌体核酸注入宿主细胞内，并使噬菌

体核酸在宿主细胞内实现复制、转录、翻译或及子代噬菌体的繁殖的过程

5.转化：感受态的细胞接纳外源DNA分子，并使其在宿主细胞内实现复制、转

录、翻译等的方法

6.电转化：将外源DNA或载体DNA导入宿主细胞，并使载体DNA在宿主细胞内

实现复制，转录，翻译等的方发

7.表达载体：将携带的外源基因在宿主细胞实现表达的载体

8.整合质粒：在大肠埃希菌质粒的基础上增加了枯草芽泡杆菌的抗性标记及同

源重组等相关序列的质粒，使得重组质粒完成了在大肠埃希菌中的克隆或亚

克隆后，导入枯草芽胞杆菌后能够插入到宿主的染色体DNA上，随着宿主细

胞的复制而复制

叙述题及简答题

1.外源基因表达基本过程！！！！

(1)目的基因的获得

(2)目的基因与表达载体的重组

(3)重组表达载体导入宿主细胞及其筛选与确认

(4)目的基因表达

补充

1.基因的基本功能：

①储存生物性状的遗传信息遗传信息的储存

②遗传信息的传递基因的表达

③作为基因表达的模板基因的复制

2.按照遗传信息的改变方式，点突变又分为同义、错义、无义突变三类

⑴同义突变：指密码子的一个碱基改变前后都都编码同一种氨基酸，即不改变基因产物的突

变

⑵错义突变：一对碱基的改变而使某一氨基酸的密码子变为另一氨基酸的密码子的突变。

⑶无义突变：一对碱基的改变使某一氨基酸的密码子变为一个终止密码子的突变。

3.易患性：在多基因病的发生中，遗传因素和环境因素共同作用并决定一个个体是否易患某

种遗传病的可能性。

4.阈值：代表在一定条件下患病所必需的、最低的易患基因的数量。

5.人类基因组中的重复序列：

⑴高度重复序列

⑵卫星DNA：①大卫星DNA②小卫星DNA

⑶反向重复序列

⑷较复杂的重复单位组成的重复序列

⑸中度重复序列

6.DNA复制的一般特征：①半保留②半不连续③方向性和高保真性

7.DN复制可能有三种方式：①半保留复制②保留复制③分散复制

8.使DNA双链解离的酶和蛋白：①DNA解链酶②单链DNA结合蛋白③拓扑异构酶

9.DNA复制过程中的酶：①引物酶②DNA聚合酶（是生物催化合成脱氧核糖核酸的一类酶）

③DNA连接酶

10.原核生物的转录起始调控：①乳糖操纵子的诱导型调控②色氨酸操纵子阻遏型调控

11.终止密码子:UAA、UAG、UGA

12.蛋白质合成的过程：①翻译的起始②肽链的延伸③翻译的终止

1核糖体结合性分子伴侣

13.细胞内的分子伴侣可分为两大类:•

二.非核糖体结合性分子伴侣，至少包括两大家族：热

激蛋白70家族和热激蛋白60家族

14.存在三种运输机制：①核孔转运②跨膜转运③小泡转运

15.蛋白质合成速率的调节：①翻译起始的调控②mRNA稳定性对翻译水平的影响③小分

子RNA对翻译水平的影响

16.翻译起始的调控：①翻译起始因子的调控作用②阻遏蛋白的调控作用③5'AUG的调

控作用

17.分子杂交技术：①Southern印迹②Northern印迹③Western印迹④原位杂交

⑤生物芯片

18.聚合酶链反应：

①PCR技术的基本原理

②PCR体系的基本成分

③PCR的基本操作

④常用的PCR类型：巢式PCR、反转录PCR

19.CRISPR/Cas系统：是由CRISPR基因座与其串联的Cas基因组成的，通过序列特意的RNA

介导，切割降解外源性DNA的原核免疫系统。

20.分子间的相互作用概述：①DNA和蛋白质相互作用②蛋白质和蛋白质相互作用

21.DNA和蛋白质相互作用：①DNA迁移率变动分析②酵母单杂交技术③染色质免疫沉

淀分析

22.药物不良反应：在正常治疗药物用量和正常用法下出现的有害的、与用药目的无关的反

应。

23.药物基因组学研究方法：①候选基因分析②全基因组关联分析③联合方法

24细胞色素P450：是最重要的I相代谢酶

25.人体内共发现有18个家族，43个亚族，57种酶，其重要性按照代谢药物的百分比排

列有CYP3A4(40%)、CYP2D6(20%)、CYP2c9(15%)、CYP2cl9(5%)等。

26.RNA-Seq技术具有以下优势：①通量高②灵敏度高③分辨率高④不受限制性

27.反义药物与传统药物的性质作用对象明显不同，表现为：①新的化学物质：核酸

②新的药物受体：mRNA或DNA③新的受体结合方式：Watson-Crick杂交④新的药物受

体结合后反应：如RNaseu介导的靶RNA的降解。

28.蛋白质组学的分类：①表达蛋白质组学②结构蛋白组学③功能蛋白质组学

29.

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30.代谢组学的特点：

①对生物体系中的小分子化合物进行定量研究

②关注内源化合物

③内源化合物的上调和下调指示了疾病、毒性、基因改变或环境因素的影响

④上述内源性化合物的变化指标可以被用于疾病的诊断和药物筛选

31.基因表达基本类型

外源基因表达宿主细胞：原核细胞表达系统、真核细胞表达系统

根据表达产物在宿主细胞的部位不同：胞内表达、定位表达、分泌表达

根据表达产物的溶解情况：可溶性表达、包涵体表达

根据表达产物的结构情况：非融合表达、融合表达

32.目的基因的获得：

①利用化学合成法

人工合成碱基序列或氨基酸序列已知的目的基因

②利用RT-PCR扩增技术

从含有目的基因的生物材料的总RNA或mRNA样本中扩增目的基因

③利用PCR扩增技术

从含有目的基因的生物材料的cDNA或染色体DNA样本以及cDNA文库或基因组文库中扩增

出目的基因

④利用各种杂交技术

从含有目的基因的生物材料的cDNA文库或基因组文库中筛选目的基因

⑤利用适宜的筛淘技术

从各种分子文库中，筛淘获得符合预期要求的目的基因

种类细胞内定位转录产生对鹅膏蕈碱的敏感性

RNA-pol1核仁rRNA的前体45SrRNA耐受

RNA-pol11核质mRNA的前体hnRNA、IncRNA敏感

piRNAxmiRNA

RNA-pol111核质tRNA、5srRNA、snRNA高浓度下敏感

33.

34.转录因子的DNA结合域：

①锌指结构结合物

②亮氨酸拉链结构与

③碱性螺旋-环-螺旋结构域

④P-片层和环结构域

35.转录因子的转录激活域：

①富含谷氨酰胺的结构域

②富含脯氨酸的结构域

③带负电荷的a-螺旋结构域

④B-片层和环结构域

36.转录因子的转录激活域：

①富含谷氨酰胺的结构域

②富含脯氨酸的结构域

③带负电荷的a-螺旋结构域

④含有双性a-螺旋和酸性氨基酸的结构域

37.目的基因制备技术：①聚合酶链反应②cDNA文库③化学合成

38.CRISPR/Cas系统的结构和组成：①反式激活crRNA②CRISPR基因座③Cas基因

39.转录组与基因组的关系：

①与基因组相比，转录组最大的特点是受到内部多种因素的调节，因而是动态可变的

②对于一个特定的转录组而言，它可能包含的RNA分子种类和数量会根据特定的细胞类型、

时间和空间等差异而表现出数和量的不同

③转录组通常会表现出高度的可变性

40.转录组的意义：

①它能揭示能够表达的基因组序列，向时向处表达以及转录活跃程度，是研究细胞表型和功

能的重要手段之一。

②转录组既是链接基因组遗传信息与生物功能的蛋白质组的必然纽带，也是基因功能及结构

研究的基础和出发点。

③不仅可以解释细胞或组织的基因组的功能元件，揭示分子成分，还可以用来认识生物学进

程和疾病发生机制。

41.宿主细胞内重组子的筛选：

①初步甄别筛选：根据载体上选择性表达基因的活性筛选，如药物蛋白抗性基因

②交叉甄别筛选：1.PCR后，琼脂糖凝胶电泳

2.酶切后，琼脂糖凝胶电泳

3.碱基序列分析验证

③利用目的基因表达产物及其性质进行筛选确认：原位杂交、SDSxWestenblotting

1.操纵子：在原核生物中，编码功能相关的结构基因常成簇排列，几个结构基因共用一个启动子，转录

成为一个mRNA分子，然后翻译成几种Pro,操作元件与这几个结构基因相邻并控制该mRNA分子的转

录，这样的结构和功能单位称为操纵子

2.单顺反子：真核细胞剪接后的每一种仅能翻译出一种蛋白质的mRNA

3.多顺反子：操纵子结构式原核基因组的一个突出的结构特点，操纵子是指几个功能上相关的结构基因

串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所

转录的RNA为多顺反子

4.SD序列：原核生物mRNA的起始密码子AUG上游4-7个核甘酸以外有一段51

-UAAGGAGG-3'的保守核甘酸序列

5.第二信使：第一信使不能直接进入细胞内，它们通过靶细胞的膜受体结合，通过信号转换机制，把胞

外信号转变为细胞内的第二信使

6.细胞通讯：细胞之间通过分泌信号分子或直接接触而相互实施调控

7.细胞信号转导：细胞感受环境信号，把这种信号导入细胞内，并做出反应的过程

8.载体：来源于质粒的DNA分子，可以供插入目的基因DNA并具有传递运载外源DNA导入宿主细胞能力

的片段

9.质粒：细菌染色体外的遗传物质，为闭合环状双链DNA

10.克隆载体：以扩增DNA片段为目的的并不需要得到目的基因所编码蛋白质的载体

11.基因DNA文库：由某一生物的全部DNA顺序的不同DNA片段所构成的群体

12.cDNA文库：由某一生物特定器官细胞内总mRNA应用逆转录酶逆转录成互补cDNA外显子，即具有表达

功能外显子序列的总和

13.基因工程：将不同生物基因在体外剪切，组合并和载体DNA连接，在原来没有这类基因的受体细胞内

犷增，使转入的基因在细胞内表达，并合成该基因编码的蛋白质

14.摆动配对：密码子与反密码子配对时，有时会出现不严格遵从常见碱基配对规律的情况

15.信号肽：各种新生分泌型蛋白的N端都有保守的aa序列

16.受体：一类存在于靶细胞或细胞内的可特异识别并结合外界信号分子，进而引起靶细胞内产生相应的

生物效应的分子

17.膜受体：亲水性化学信号分子的受体

18.分子杂交技术：利用单链核酸碱基互补配对，抗原与抗体、受体与配体、蛋白与其他分子的相互作用

进行目的核酸、Pro检测，广泛应用于基因重组、生物印迹示踪、生物芯片等领域，具有高特异性、

高灵敏度、高通量等特点的技术

19.核酸杂交：序列互补的单链DNA和DNA、DNA和RNA、RNA和RNA,根据碱基配对原则，借助氢键相连

而形成双链杂交分子的过程

20.核酸杂交的探针：能够与靶分子核酸按碱基互补原则特异性相互作用的一段已知序列的寡核甘酸或核

酸

21.复制子：一个复制子是一个复制单位，包括复制所需的控制元件、起始点和终点

22.启动子：RNA聚合酶识别、结合并起始转录的一段具有高度保守性的DNA序列

23.终止子：转录过程中能够终止RNA聚合酶转录的DNA序列

24.复制起点：DNA复制时，总是从某一特定的点开始

25.顺式作用元件：真核生物的不同细胞，在转录起始点的上游有不同的与转录有关的序列

26.反式作用因子：绝大多数真核转录因子由它的编码基因表达后，通过与特异的顺式作用元件识别、结

合，反式激活另一基因的转录

27.基因：染色体上具有遗传效应的DNA片段

28.转录：生物体在遗传信息传递过程中，以DNA为模板，在DNA依赖的RNA聚合酶催化下，以4种三磷

酸核甘为原料，合成RNA的过程

29.转录因子：在真核细胞核中，能够协助RNA聚合酶转录RNA的蛋白质

30.聚合前链式反应：体外扩增DNA序列的技术

31.反义技术：根据核酸杂交原理设计针对特定靶序列的反义核酸，通过阻抑从DNA至mRNA的转录过

程或从mRNA到Pro的翻译过程，而阻断细胞中的Pro合成

32.小干扰RNA：由短寡核甘酸序列组成的双链结构，可以阻断异常蛋白的产生

33.外源基因表达/重组DNA技术：将--种生物体的基因育载体在外进行拼接重组，然后转入另一种生物体

内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA

34.基因的表达：将外源基因转录成mRNA,进而翻译成肽链或加工成活性Pro的过程

35.宿主细胞：接纳重组子并实现重组子的外源基因转录、扩增或表达的受体细胞

36.半保留复制：以原来的DNA作为模板，以碱基配对的形式合成一个与原来DNA完全相同的DNA分子，

然后在细胞分裂时将两个DNA分子分配到两个子代细胞中去，使两个子代细胞携带与母代细胞完全相

同的遗传信息

37.RNA干扰：外源和内源性双链DNA在生物体内诱导同源靶基因的mRNA特异性讲解，导致转录后基因沉

默的技术

38.SRP受体：内质网膜上存在着一种识别SRP的受体蛋白

39.2-DE（双向电泳）：分离Pro技术，原理是根据Pro的两个一级属性进行Pro的分离

40.MS（生物质谱）：是Pro组学中用于分析与鉴定肽和Pro的一种极其重要的技术

41.PMF（肽质量指纹谱）：Pro被识别特异酶切位点的蛋白酶水解后得到的肽片段质量图谱

42.proteome（蛋白质组）：被定义为一个基因组、一个细胞、一个有机体或某一特定的组织类型所表达的

全部Pro

43.transformation（转化）：感受态细胞接纳外源DNA分子的过程，并使其在宿主细胞内实现基因的表达

44.transduction（转导）：噬菌体颗粒感染宿主细胞，通过特定的途径，将噬菌体核酸注入宿主细胞内的

过程，并使噬菌体核酸在宿主细胞内实现复制、转录、翻译或子代噬菌体的繁殖

45.transcriptome（转录组）：一个活细胞所能转录出来的所有mRNA

46.transcriptomics（转录组学）：•门在整体水平上研究细胞中基因转录的情况及转录调控规律的学科

47.genechip（基因芯片）：DNA芯片，原理是将大量寡核甘酸分子固定于支持物上，然后与标记的样品

进行杂交，通过检测杂交信号的强度进而获取样品分子的数量和序列信息

48.serialanalysisofgeneexpression,SAGE（基因表达系列分析）：以测序为基础，分析特定组织

或细胞类型中基因群体表达状态的一项技术

49.massivelyparallelsignaturesequencing,MPSS（大规模平行信号测序系统）：利用限制性内切酶

和荧光检测知识，发展出的一种辨认和测定细胞每一个cDNA克隆片段末端16~20bp序列的方法，从而

查明细胞内所有基因的表达情况

50.RNAsequencing,RNA-seq（RNA测序技术）：目前成为基因表达分析和转录组分析的新的重要方法

1.简述基因工程主要内容

（-）目的基因获得：化学合成法、RT-PCR扩增技术、PCR扩增技术、各种杂交技术、筛淘技术（二）

目的基因与表达载体重组：（1）载体：克隆质粒载体、表达质粒载体、噬菌体和病毒载体（2）重组：DNA

限制性内切酶、DNA连接酶、基因与载体重组（三）重组表达载体导入宿主细胞及其筛选与确认：宿主细

胞，重组子导入宿主细胞，宿主细胞内重组子筛选与确认（四）目的基因表达：外源基因诱导转录、外源

基因翻译

1.简述分泌型蛋白翻译同步运转的主要过程

（1）细胞质游离核糖体组装，翻译起始，合成出N端包括信号肽在内约70个aa残基（2）SRP与信号肽、

GTP及核糖体结合，暂时中止肽链延伸（3）SRP引导核糖体-多肽-SRP复合物，识别结合ER膜上的SRP

受体，并通过水解GTP使SRP解离再循环利用，多肽链开始继续延长（4）核糖体大亚基与核糖体受体结

合，锚定ER膜上，水解GTP供能，诱导肽转位复合物开放形成跨ER膜通道，新生肽链N端信号肽即插

入此孔道，肽链边合成边进入内质网腔（5）内质网膜内侧面存在信号肽酶，通常在多肽链合成约80%以上

时，将信号肽段切下，肽链本身继续增长，直至合成终止（6）多肽链合成完毕，全部进入内质网腔中（7）

Pro合成结束，核糖体等各成分分解聚并恢复到翻译起始前状态，再循环利用

2.简述分泌型蛋白的运输机制

（1）信号肽识别颗粒：信号肽识别颗粒由6个多肽亚基和1个7sRNA组成的11S复合体（2）SRP受体：

内质网膜上存在一种识别SRP的受体蛋白（3）核糖体受体：可结合核糖体大亚基使其与内质网膜稳定结

合（4）肽转位复合物：可形成新生肽链跨ER膜蛋白通道

3.简述限制性核酸内切酶的应用

（1）DNA重组与构建新基因组文库（2）组建DNA物理图谱（3）DNA分子杂交（4）制备DNA放射性探针（5）

DNA序列分析

4.简述基因工程中的工具酶

（1）限制性内切酶：特异性切割DNA分子（2）DNA甲基化酶：用于DNA的甲基化（3）核酸酶：非特异性

切割DNA和RNA（4）核酸聚合酶：合成DNA和RNA（5）核酸链接酶：连接DNA和RNA（6）核酸末端修饰

酶：修饰DNA和RNA末端（7）其他酶类：用于生物细胞的破壁、转化、核酸纯化和检测等

5.简述原核生物与真核生物多肽链合成的主要区别点

（I）原核生物核糖体更大（2）起始氨酰tRNA：真核mRNA识别是从5'端开始，无SD序列，起始因子

识别与mRNA5'端帽子有关（3）真核生物起始密码子通常只有一个AUG（4）80s起始复合物：9种起始因

子-elF（5）蛋白激酶参与真核细胞蛋白合成的调节，蛋白激酶可以催化eIF-2磷酸化（6）释放因子：真核

1种，原核3种（7）翻译与转录：真核-不偶联，原核-偶联（8）合成速度：真核慢，原核快（9）顺反子：

真核-单顺反子，原核-多顺反子

6.简述原核生物和真核生物转录调控的特点

原核：（1）。因子特异性识别:原核生物细胞只含有一种RNA聚合酶，核心酶参与转录延长，全酶负责转录

起始（2）操纵子学说普遍性：多个功能相关原核基因串联，依赖同一转录调控区对基因转录进行调节，构

成1个转录单位，确保功能相关基因间表达协调（3）负性调节占主导：原核操纵子系统中，特异阻遏蛋白

对操纵子基因转录起始阻遏机制十分普遍。真核：（1）多种RNA聚合酶：每种RNA聚合酶由10个亚基组成，

有些亚基相同，有些特有（2）转录激活状态染色质结构发生变化：对核酸酶敏感、DNA拓扑结构、DNA碱

基甲基修饰和组蛋白变化（3）正性调节占主导：主要环节包括转录前、转录水平和转录后调节等过程

7.※简述原核生物和真核生物基因组特点

原核生物：（1）基因组通常由一条环状双链DNA分子组成（2）结构基因与调控序列以操纵子形式组织在-

起（3）基因组中重复序列很少（4）结构基因多为单拷贝（5）基因连续（6）编码序列一般不会重叠（7）

编码区在基因组中所占比例大于真核基因组，小于病毒基因组（8）细菌基因组中存在可移动DNA序列。真

核生物：（1）基因组DNA都是双链线状（2）大多数真核生物结构基因为断裂基因，受一系列顺式作用元件

调控（3）结构基因转录产物为单顺反子（4）基因组内非编码序列多于编码区（5）基因组中含有大量重复

序列和基因家族（6）基因组DNA末端都有一种为端粒的特殊结构（7）基因组中存在一些可移动遗传因子

（8）还包括细胞器基因组

8.简述原核生物和真核生物DNA聚合酶作用

原核生物：PolI：校读、修复合成、切除引物、填补空隙，PolII：参与DNA损伤的应急状态修复，Pol

HI：催化DNA聚合。真核生物：聚合酣a：DNA复制，合成后随链；聚合酶6：DNA复制，合成后导链；聚

合酶e：参与DNA的修补合成聚合酶B：DNA修复；聚合酶Y：线粒体DNA复制

9.简述转录组学研究方法

（1）基因芯片技术：芯片制备、样品制备、杂交反应、信号检测和结果分析（2）基因表达系列分析（3）

大规模平行信号测序系统：MPSS与SAGE相比有两个明显的优势，第一，产生特征序列的长度不同，使

用目前的方法，MPSS技术可以产生17个核甘酸的信号序列；第二，一个典型的SAGE标签系统仅可使

20000~60000个mRNA分子的标签得到测序，这不能充分代表样本中的全部基因（4）RNA测序技术

10.简述反义寡核昔酸药物的优点

（I）特异性较强：一个15聚体反义寡核甘酸含有30-45个氢犍，低分子传统药物与靶点一般只形成1~4

个键（2）信息量较大：遗传信息从DNA-RNA-Pro,用互补寡核甘酸阻断某种蛋白的合成很准确（3）

反义药物以核酸为靶点，与Pro为靶点比较，更易合理设计新药物（4）与传统药物比较反义药物更具选择

性及效率，也更高效低毒

11.简述反义药物与传统药物的性质和作用对象的不同

（I）新的化学物质：核酸（2）新的药物受体：mRNA或DNA（3）新的受体结合方式：W-C杂交（4）

新的药物受体结合后反应

12.简述药物蛋白质组学应用

（I）构建分子药理筛选模型：整体动物模型，组织、器官水平模型，分子水平模型（2）药物靶点的发现、

验证和优化（3）研究不同药物具有相同药物作用机制，为药物作用机制研究提供有价值依据（4）药物毒

理机制研究和毒力Pro组学（5）细菌和肿瘤耐药机制的研究

13.简述原核生物核糖体的功能部位

（1）容纳mRNA部位（2）结合氨基酰rRNA氨基酰位（3）结合肽酰rRNA肽酰位（4）tRNA排出位（5）

肽基转移酶所在部位（6）转位酶位点

14.简述蛋白质一级结构的修饰

（1）肽链N端Met切除：在Pro合成过程中，真核生物N末端第一个aa总是甲硫氨酸，原核生物是a-

氨基甲酰化的甲硫氨酸（2）特定aa共价修饰：某些Pro肽链中存在共价修饰aa残基，是肽链合成后特异

加工产生（3）二硫键形成：mRNA中没有胱氨酸密码子，多肽链合成后通过两个半胱氨酸氧化作用生成（4）

多蛋白加工（5）前体蛋白加工：细胞内许多Pro都是以前体蛋白方式合成，然后加工转化为成熟蛋白

15.简述信号肽的特点

（I）N端有几个带正电碱性aa残基（2）中间为10~15个残基构成疏水核心区，主要含疏水中性aa（3）

C端多以侧链较短的甘氨酸、丙氨酸结尾，紧接着是被信号肽酶裂解的位点

16.简述转录组与基因组的关系

基因组表达坡初产物是转录组，包含细胞在特定时间所需生物信息和编码Pro基因衍生而来RNA分子的集

合。以DNA为模板合成RNA转录过程是基因表达第一步，是基因表达调控关键环节。转录组与基因组不

同是转录组定义中包含了时间和空间的限定，转录组高度动态，同一细胞在不同生长时期及生长环境下，

其基因表达情况是不完全相同的

17.简述蛋白质组学的分类

（1）表达：是研究差异样品间Pro表达量变化（2）结构：对某一特定细胞器中全部Pro或Pro复合体结

构进行分析，确定他们在细胞中定位，了解Pro之间相互关系（3）功能：研究执行某种功能Pro复合体，

Pro-Pro相互作用，Pro-DNA相互作用和翻译后修饰等

18.简述质粒的特点

（1）含有可利用宿主细胞复制系统复制起始的区域（2）含一个或多个抗性基因的表达区域（3）含用于插

入外源基因的DNA限制内切酶作用位点，该位点可位于抗性基因区域内或外

19.简述PCR基本操作过程

（I）变性：将待扩增模板DNA加热到94。C,使双链DNA完全变性解离成为单链DNA（2）退火：将

温度下降到55。C左右，引物与变性模板DNA碱基互补配对（3）延伸：将体系温度提高到DNA聚合酶

作用最适温度72°C,DNA聚合酶在缓冲液中，以dNTP为底物，严格按照模板链碱基序列合成互补链

20.mRNA遗传密码的特点

（1）方向性：mRNA分子中遗传密码阅读方向是从5'-3',遗传信息在mRNA分子中这种方向性排列决

定多肽链合成方向是从氨基到竣基端（2）连续性：mRNA分子中编码Pro.aa序列各三联体密码连续排列，

密码间无标点符号和间隔（3）兼并性：已知61个密码子编码20种aa,二者不是一对一关系（4）摆动性:

翻译过程，aa正确加入依赖于mRNA密码子与tRNA反密码子之间相互辨认结合（5）通用性：人类、原

核和真核生物通用Pro.生物合成整套遗传密码

21.简述蛋白质组学的主要研究技术

（I）双向凝胶电泳：双向电泳第1向是等电聚焦，利用Pro等电点不同，在PH梯度胶内进行第1次分离,

第2向是12烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，沿着第1向垂直方向通过Pro分子量大小进行第2次分离

（2）生物质谱：将复杂样品分子离子化，利用不同离子在电场运动行为不同，把离子按质荷比差异分离并

确定分子量（3）Pro芯片：利用Pro与Pro、酶与底物、Pro与其他小分子之间相互作用，检测分析Pro一

种高通量、微型化和自动化分析技术（4）酵母双杂交：•种根据真核细胞转录调控特点建立的分析Pro相

互作用技术

22.为什么说只有在Pro水平进行研究，才能更真实地反应生物体的功能机制，更接近揭示生命活动的本

质？为什么说Pro组研究要比基因组研究困难得多？

基因是携带遗传信息载体,Pro是生理功能执行者和生命活动直接体现者，基因所提供信息是一种静止资源，

遗传信息不直接参与生命活动，间接由Pro体现出来。在个体发育不同阶段基因组相对稳定，Pro组变化。

这种变化表现在细胞表达Pro种类不同，同种Pro表达量也会存在很大差异，因此生物体内基因组呈静态，

Pro组呈动态

23.简述蛋白质组与转录组的关系

转录组研究对象是细胞能转录出来的可直接参与Pro翻译mRNA总和。转录组学核心工作是分析基因表达

谱，解析不同的物种、个体、细胞、发育阶段及生理、病理状态下基因差异表达信息，在整体水平上研究

细胞编码基因转录状况及转录调控规律，揭示特定调节基因作用机制。Pro组学研究对象是细胞、组织或机

体在特定时间和空间内表达所有Pro。Pro组学核心工作是对Pro鉴定和功能确定（从“解析”开始参照转

录组研究对象，将“基因”改为“Pro”即可）转录组对揭示基因差异表达提供丰富信息，Pro组对全面深

入理解生命复杂活动、疾病诊断、新药研制等有意义

24.DNA复制的一般特征

（1）半保留复制：原核生物有一个复制起点和一个复制子，真核生物有多个复制起点和多个复制子（2）

双向复制：枯草杆菌DNA、真核生物线粒体DNA复制时不对称（3）半不连续复制：一条链上DNA在DNA聚

合酶作用下从5'-3'方向连续合成一条长DNA链，另一条链DNA合成不连续，连续合成的链总领先于不连

续合成的链

25.DNA损伤类型

（-）内源性损伤：DNA复制错误、碱基本身存在互变异构体、自发的化学变化、氧化作用损伤碱基（二）

外源性损伤：（1）物理因素：紫外线、X射线、Y射线及宇宙射线（2）化学因素：碱基类似物、脱氨剂、

烷代剂、大型加合物、插入剂、交联剂

26.合成DNA和RNA的相同点

（1）以DNA为模板（2）原料为核甘酸（3）合成方向是3'-5'（4）依赖DNA聚合酶（5）遵守碱基互补

配对原则（6）产物为多聚核甘酸链

2.简述基因工程主要内容

（-）目的基因获得：化学合成法、RT-PCR扩增技术、PCR扩增技术、各种杂交技术、筛淘技术（二）

目的基因与表达载体重组：（1）载体：克隆质粒载体、表达质粒载体、噬菌体和病毒载体（2）重组：DNA

限制性内切酶、DNA连接酶、基因与载体重组（三）重组表达载体导入宿主细胞及其筛选与确认：宿主细

胞，重组子导入宿主细胞，宿主细胞内重组子筛选与确认（四）目的基因表达：外源基因诱导转录、外源

基因翻译

27.简述分泌型蛋白翻译同步运转的主要过程

（1）细胞质游离核糖体组装，翻译起始，合成出N端包括信号肽在内约70个aa残基（2）SRP与信号肽、

GTP及核糖体结合，暂时中止肽链延伸（3）SRP引导核糖体-多肽-SRP复合物，识别结合ER膜上的SRP

受体，并通过水解GTP使SRP解离再循环利用，多肽链开始继续延长（4）核糖体大亚基与核糖体受体结

合，锚定ER膜上，水解GTP供能，诱导肽转位复合物开放形成踏ER膜通道，新生肽链N端信号肽即插

入此孔道，肽链边合成边进入内质网腔（5）内质网膜内侧面存在信号肽酶，通常在多肽链合成约80%以上

时，将信号肽段切下，肽链本身继续增长，直至合成终止（6）多肽链合成完毕，全部进入内质网腔中（7）

Pro合成结束，核糖体等各成分分解聚并恢复到翻译起始前状态，再循环利用

28.简述分泌型蛋白的运输机制

（1）信号肽识别颗粒：信号肽识别颗粒由6个多肽亚基和1个7SRNA组成的11S复合体（2）SRP受体：

内质网膜上存在一种识别SRP的受体蛋白（3）核糖体受体：可结合核糖体大亚基使其与内质网膜稳定结

合（4）肽转位复合物：可形成新生肽链跨ER膜蛋白通道

29.简述限制性核酸内切酶的应用

（1）DNA重组与构建新基因组文库（2）组建DNA物理图谱（3）DNA分子杂交（4）制备DNA放射性探针（5）

DNA序列分析

30.简述基因工程中的工具酶

（1）限制性内切酶：特异性切割DNA分子（2）DNA甲基化酶：用于DNA的甲基化（3）核酸酶：非特异性

切割DNA和RNA（4）核酸聚合酶：合成DNA和RNA（5）核酸链接酶：连接DNA和RNA（6）核酸末端修饰

酶：