DB22-T 3646-2024 长白山林蛙油鉴别高效液相色谱蛋白质特征图谱法_第1页
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文档简介

22AuthentificationofChangbaimountainRanaeOviductus-highDB22/T3646—2024I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的GB/T20001.4—2015《标准编写规则第4部请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件主要起草人：王诗涵、王志寒、王永生、王道君DB22/T3646—20241长白山林蛙油鉴别高效液相色谱蛋白质特征图谱法GB/T6682分析实验室用水规格和3.1长白山林蛙油ChangbaimountainRana蛙科动物中国林蛙（RanatemporariachensinensisDavid）雌中药特征图谱可采用特征峰保留时间评价，供试品特征图谱的相关色谱峰应与相应的参照物色谱峰保留时间相同。特征峰相对保留时间规定值范围一般应不超过±10%。实验以溶菌酶作参照物，通过分析林蛙油蛋白质特征峰与参照峰的相对保留时间确定目标峰，根据指纹图谱软件提取长白山林蛙油中蛋白质组成成分的特征峰，建立蛋白质对照特征图谱，进行警示——使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证5.2乙腈（C2H3N）:色谱纯。5.5溶菌酶：纯度＞98%。DB22/T3646—202425.9盐酸胍（CH5N3.HCl）。）：）：7.2冷冻离心机：0rpm～12000rpm，0℃~4℃。7,4旋转蒸发仪。7.5粉碎机：频率：50Hz～60Hz。7.6磁力搅拌器。7.7天平：感量：0.001g和0.007.16微孔滤膜：0.45μm。应符合《中华人民共和国药典》（2020年版）一部中哈DB22/T3646—202439.2.1取试样0.5g，称定，置于具塞锥形瓶中，加磷酸盐缓冲9.2.4上清液（9.2.3）在50℃下使用旋转蒸发仪回收9.2.5取浓缩液（9.2.4）缓慢加入30mL60%饱和度的硫酸9.2.6混合物（9.2.5）在0℃~4℃静置1h后，以8000r/min离心29.2.8取溶液（9.2.7），使用滤9.3参照物溶液的制备9.3.1对照品储备液配制充分摇匀，配置成浓度为1.3mg/mL的对照品储备液，0℃~4℃冰箱保存，保存期30天。9.3.2对照品工作溶液配制的参照物溶液，吸取参照物溶液，使用滤膜过滤至样品瓶，于0℃~4℃冰箱保存，作为参照物溶液9.4试验条件高效液相色谱仪，色谱柱，流动相：含0.085%三氟乙酸（v/v）的乙腈（A）-含0.1%三氟乙酸），min0DB22/T3646—202449.5试样测定9.6数据处理10.2以样品相对保留时间均值（n≥6）标定共有特征峰，以参照物溶菌酶保留时间相对应的峰为SDB

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