耳聋基因检测

耳聋基因检测及临床应用耳朵结构及声音的传递过程耳廓收集声音声音由外耳道传递到鼓膜然后传递到听小骨耳蜗内淋巴震动，刺激听觉感受器经耳蜗神经传递到大脑皮层耳聋是什么传音感音中枢耳聋是指听觉系统中的传音、感音以及对声音的综合分析的各级神经中枢发生器质性或功能性异常，而导致听力出现不同程度的减退，习惯称为耳聋。按WHO（2001）听力损失的分级标准，耳聋分级为：正常＜25dB轻度26dB~40dB中度41dB~70dB重度71dB~90dB极重度＞90dB

耳聋的程度耳聋的分类先天性迟发性药物性按照遗传方式遗传性-60%非遗传性-40%根据病因传导性感音神经性混合型耳聋根据病变部位按照发病时间语前聋语后聋综合征非综合征按照临床表现

如果合并有外耳畸形，或者同时发生其他器官或系统疾病，称为综合征型耳聋(SHI)，占遗传性耳聋的30%；而没有视觉可见的外耳畸形及与耳聋同时出现的其他器官或系统疾病，称为非综合征型耳聋(NSHI)，占遗传性耳聋的70%。耳聋的病因综合征性耳聋

用于指导临床鉴别家族性出血性肾炎(即Alport综合征，AS)是一种遗传性疾病，文献中它被称为遗传性肾炎、遗传性进行性肾炎、遗传性慢性进行性肾炎、遗传性慢性肾炎。国内从1978年起始有报道。本病临床主要表现为1.血尿2.神经性耳聋：AS综合征患者听力丧失不是先天性的，而是常在15岁左右在男性患者发生3.眼疾4.血小板缺陷5.弥漫性平滑肌瘤病Alport综合征Pendred综合征是一种以甲状腺肿大、先天性感觉神经性耳聋和碘的有机化障碍为主要特征的常染色体隐性遗传病。致病基因位于染色体7q31，其基因表达产物为转运碘－氯离子的一种蛋白质－潘特体（Pendred）。该病确切的发病机理尚不清楚。可能是由于基因突变或缺失后引起潘特林的结构和功能改变，导致碘的有机化障碍，以及内耳前庭导水管内氯离子转运障碍，引起内淋巴囊及内淋巴管内压升高，内耳毛细胞受损和听神经萎缩，从而导致听力进行下降财时伴有甲状腺肿大，治疗上主张早期使用早状腺激素替代使甲状腺肿缩小，神经性耳聋尚无有效治疗。Pendred综合征瓦登伯革氏症候群(WaardenburgSyndrome)简称瓦氏症候群，是2号染色体的畸变。1、蓝眼珠或两眼一蓝一正常，称为虹膜异色症，不过也有部分患者眼珠颜色正常。2、单耳或双耳听力障碍，发生率为9~38%3、额前一撮白发或易有少年白。4、两眼眼距较宽，但瞳孔间距离正常，又称为内眦外移(dystopiacanthorum)。5、鼻根宽阔且鼻翼发育不良。6、并眉。7、下巴较大、较宽。8、长期便秘或甚至同时罹患了先天性巨结肠症。9、少数有皮肤脱色斑、唇颚裂、先天性心脏病或肌肉、骨骼异常。Waardenburg综合征Usher综合征Usher综合症又称遗传性耳聋-色素性视网膜炎综合征，视网膜色素变性-感音神经性耳聋综合征，聋哑伴视网膜色素变性综合征等。临床表现：是以先天性感音神经性聋、渐进性视网膜色素变性而致视野缩小、视力障碍为主要表现的一种常染色体隐性遗传性疾病，有些表现为全聋或聋哑，并伴有眩晕和步态不稳等前庭功能障碍症状，具有遗传异质性。非综合征性耳聋

实验室检测检测基因相关病症检测位点结果解释GJB2先天性重度以上感音神经性耳聋21%听力障碍者携带此基因突变235delc;299-300delAT176del16bp;35delG512insAACG;155delTCTG313del14bp;388del10bp167delT;W3X(9G＞A)；此基因携带者夫妇听力正常，子代有1/4几率完全听力缺失，1/2几率成为携带者SLC26A4（PDS）大前庭水管综合征先天或后天中度以上感音神经性耳聋（发病率14.5%）IVS7-2A＞G（919-2A＞G）;2168A＞G1229C＞T;1174A＞T；281C＞T；589G＞A；1226G＞A；IVS15-5G＞A；1975G＞C；2027T＞A；2162C＞T；2168A＞G此基因突变者，生活行为要防止导致颅内压升高的行为因素，避免外界环境刺激致聋12SrRNA药物性耳聋（发病率4.4%）1555A＞G；1494C＞T此基因突变者，使用氨基糖甙类药物会导致听力下降或缺失。女性携带者100％会遗传给下一代GJB3后天高频感音神经性耳聋，我国本土克隆的第一个遗传疾病基因（发病率1.2%）538C＞T（R180X）547G＞A（E183K）与后天突发性耳聋有一定关系遗传异质性(geneticheterogeneity)分为基因座异质性和等位基因异质性。基因座异质性病是由不同基因座的基因突变引起的，如先天性聋哑有常染色体隐性遗传、常染色体显性遗传、X连锁隐性遗传、Y连锁遗传和母系遗传5种遗传方式。属于常染色体隐性遗传的有35个基因座位（位点），占病例总数的68%。因此，常可见到2个先天性聋哑患者婚配后生出并不聋哑的孩子，就是由于父母的聋哑基因不在同一基因座位所致，即一个亲代的基因型为AAbb，另一个亲代的基因型为aaBB，两个亲代都是某基因座的纯合子患者，但他们子女的基因型为AaBb，在两个基因座位上均为杂合子，故表现正常。等位基因异质性是指某一遗传病是由同一基因座上的不同突变引起的，如β地中海贫血，既可能是由于β珠蛋白基因点突变所致的RNA加工障碍或转录调控区改变引起的，也可能是由于β珠蛋白基因缺失引起的。遗传性耳聋具有很强的遗传异质性，包括：1.常染色体显性遗传2.常染色体隐性遗传3.X-连锁隐性遗传4.Y-连锁遗传5.母系遗传（线粒体DNA）遗传性耳聋的异质性GJB2基因中国人群该基因突变热点：是235delC，其次是299-300delAT，白种人GJB2基因突变热点：35delG德系犹太人GJB2基因突变热点：167delT属于常染色体隐性遗传机制：GJB2基因影响声波传导器柯蒂氏器发育，故早期若柯蒂氏器发育不良，即可引起先天性耳聋。但有研究发现一新生儿存在235delC纯合型突变者通过了听力筛查，于该新生儿6个月龄时回访其双耳听力正常，以后仍需紧密关注其听力变化情况。

据研究报道，有50%以上的极重度耳聋患者在3个月龄时具有正常的听觉行为，至少20%在6个月时仍具有听觉行为。

对检出的GJB2基因突变携带者应尽早实施干预措施，及时发现耳聋，植入人工耳蜗，通过言语学习，可避免聋哑残疾。SLC26A4（PDS）SLC26A4基因的致病率仅次于GJB2基因，其中SLC26A4基因中IVS7-2A＞G在中国人群最为常见。SLC26A4基因又称PDS基因位于人类染色体7q31编码含有Pendrin蛋白（彭德莱蛋白）。SLC26A4基因某一位点的突变导致Pendrin功能障碍，引起Cl-转运障碍或内耳淋巴液流动异常，而导致大前庭水管综合征和Pendred综合征IVS7-2A＞G2168A＞G大前庭水管综合征也称先天性前庭水管扩大，常染色体隐性遗传病，家庭中多为单个病例发病。病人一般在2岁左右开始发病。主要表现为听力波动性下降，个别病人会表现出突发性耳聋，也有病人表现为发作性眩晕伴波动性听力下降，类似梅尼埃病。病人的听力逐步下降可致全聋。主要依据高分辨CT确诊。在颞骨轴位CT深测量前庭导水管直径，超过1.5mm时应考虑本病，结合临床表现可作出诊断。目前尚无有效的治疗方法。早年有学者曾主张行内淋巴囊减压术，现已证明内淋巴囊减压术对本病无效。有残余听力的病人可佩戴助听器，极重度聋者可行人工耳蜗植入术。

单纯IVS7-2A＞G杂合突变也有导致中度学语后和重度学语前耳聋的报道。因此认为检测出的IVS7-2A＞G和2168A＞G杂合突变携带者均应行SLC26A4基因全序列分析以排除复合杂合的可能，进一步明确病因。无论携带单杂合突变还是复合杂合突变的新生儿在成长过程中均应避免头部外伤、不用力憋气、擤鼻或咳嗽、远离噪声，一旦发现听力变化要及时就诊。了解SLC26A4基因突变情况后，在进一步的结果分析和遗传咨询中，不仅能对患者进行婚育指导，还可对已孕或有生育需求的确诊者或携带者进行产前诊断:①若确定患者携带有另一突变位点，则可建议患者父母进行相应位点的检测以确定是否携带突变位点，并在再生育前约怀孕10周时行产前诊断，以指导生育健康儿;②可建议患者婚育前，本人的配偶进行相应位点检测，从而预防其生育耳聋后代;③患者的同胞有50%的几率携带有致病突变，亲属携带此突变的可能性很大，建议在生育前行耳聋基因诊断检查。什么是线粒体基因(mtDNA)人身体所有细胞（除红细胞）里面都有线粒体，但只有女性的线粒体基因能随其卵子遗传给后代。mtDNA是MitochondrialDNA（线粒体DNA）的缩写，是承载线粒体遗传密码的物质。男人线粒体只伴随此男人生活一生，然后终结，不能遗传给后代。mtDNA表现为母系遗传。mtDNA结构类型是反映母系脉络的重要指标。线粒体DNA是线粒体中的遗传物质，线粒体能为细胞产生能量(ATP)，是在细胞线粒体内发现的脱氧核糖核酸特殊形态。线粒体是为细胞提供能量(ATP)的细胞器。一个线粒体中一般有多个DNA分子。它们携带着自己的DNA——mtDNA，而这些基因的突变能引起线粒体疾病。虽然疾病症状是多变的，但大脑、肌肉和心脏等耗能较多的器官通常会受到影响。由于线粒体会通过卵细胞传递，相关疾病会遗传自母亲已知的是哺乳动物的线粒体基因组最小，而植物的线粒体基因组最大。Anderson等于1981年测定了人类线粒体基因组全序列，共16569bp。现已确定有13个为蛋白质编码的区域，即细胞色素b、细胞色素氧化酶的3个亚基、ATP酶的2个亚基以及NADH脱氢酶的7个亚基的编码序列。另外还有分别编码16SrRNA和12SrRNA以及22个tRNA的DNA序列。mtDNA虽能合成蛋白质，但其种类十分有限。迄今已知，mtDNA编码的RNA和多肽有：线粒体核糖体中2种rRNA(12S及16S)，22种tRNA，13种多肽（每种约含50个氨基酸残基）。组成线粒体各部分的蛋白质，绝大多数都是由核DNA编码并在细胞质核糖体上合成后再运送到线粒体各自的功能位点上。正因如此，线粒体的遗传系统仍然要依赖于细胞核的遗传系统，由此，线粒体是半自主性细胞器。rRNA是细胞中含量最多的RNA，约占RNA总量的82%。rRNA单独存在时不执行其功能，它与多种蛋白质结合成核糖体，作为蛋白质生物合成的“装配机”。rRNA的分子量较大，结构相当复杂，目前虽已测出不少rRNA分子的一级结构，但对其二级、三级结构及其功能的研究还需进一步的深入。原核生物的rRNA分三类：5SrRNA、16SrRNA和23SrRNA。真核生物的rRNA分四类：5SrRNA、5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA。S为大分子物质在超速离心沉降中的一个物理学单位，可间接反应分子量的大小。原核生物和真核生物的核糖体均由大、小两种亚基组成。rRNA概念线粒体基因mtDNA,12SrRNA1555A＞G；1494C＞T发病机制：人类线粒体基因中1555A＞G突变和1494C＞T突变会在12SrRNA的高度保守的A位形成新的1494C-G1555或1494U-A1555碱基对，这些改变使得12SrRNA在二级结构上与细菌的16SrRNA的相应区域的二级结构更加相似，如果用药本人携带这种基因突变，可能就会导致药物识别错误，攻击健康的耳内细胞，进而致使耳内细胞的蛋白质合成异常，突变携带者在接触氨基糖甙类药物后便出现了听力损失的情况。值得注意的是：1555A＞G突变除可通过促进氨基糖甙类抗生素与12SrRNA结合而致聋外，也可单独引起感音性神经性耳聋，其耳聋表型还受核基因背景和单体型等因素的影响。临床耳聋咨询时应当予以考虑。致聋药物有哪些一种性状或遗传病有关的基因位于X染色体上，这些基因的性质是隐性的，并随着X染色体的行为而传递，其遗传方式称为X连锁隐性遗传（X-linkedrecessiveinheritance,XR）。以隐性方式遗传时，由于女性有两条X染色体，当隐性致病基因在杂合状态（XAXa）时，隐性基因控制的性状或遗传病不显示出来，这样的女性表型正常的致病基因携带者。只有当两条X染色体上等位基因都是隐性致病基因纯合子（XaXa）时才表现出来。在男性细胞中，只有一条X染色体，Y染色体上缺少同源节段，所以只要X染色体上有一个隐性致病基因（XaY）就发病。这样，男性的细胞中只有成对的等位基因中的一个基因，故称为半合子（hemizygote）。X连锁隐性遗传（X-linkedrecessiveinheritance,XR）GJB3基因GJB3基因编码连接蛋白31，是间隙连接蛋白家族的主要成员，主要导致人类神经性高频听力下降，1998年由我国夏家辉院士首先克隆。目前，报道相对较多的致病位点是GJB3基因538C＞T无义突变和547G＞A

错义突变耳聋基因的实验室检测现有遗传性耳聋的基因检测方法包括:1.直接测序法、2.PCＲ-ＲFLP、3.基因芯片、4.飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、5.荧光PCＲ、6.导流杂交法等。直接测序法目前仍是基因诊断的金标准，但其通量低，成本较高，不适用于临床推广;PCＲ-ＲFLP可以明确地确定突变的有无和位置，但需在突变位点处存在酶切位点或能够引入某种酶切位点;质谱分析分辨率低。

荧光PCＲ法耳聋基因检测耗时短，成本低，检测基因位