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文档简介
2025届安徽省合肥市金汤白泥乐槐六校高考临考冲刺生物试卷注意事项:1.答题前,考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚,将条形码准确粘贴在条形码区域内。2.答题时请按要求用笔。3.请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答,超出答题区域书写的答案无效;在草稿纸、试卷上答题无效。4.作图可先使用铅笔画出,确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5.保持卡面清洁,不要折暴、不要弄破、弄皱,不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1.下列关于二倍体生物细胞分裂的叙述,正确的是()A.有丝分裂和减数分裂都存在DNA复制过程,而无丝分裂没有该过程B.在有丝分裂和减数分裂过程中,着丝点的分裂会造成细胞中染色体数目的暂时加倍C.经过减数分裂形成的精子或卵细胞,染色体数目一定是体细胞的一半D.与减数分裂相比,有丝分裂过程中显著的特点之一是没有同源染色体2.下列有关生物进化理论的叙述。错误的是()A.与自然选择学说相比,现代生物进化理论解释了遗传和变异的本质B.现代生物进化理论认为生物进化以种群为单位、以可遗传变异为基础C.新物种的形成一般离不开变异、选择和隔离三个基本环节D.生物变异和进化的不定向性,导致生物具有多样性和适应性3.抑素是细胞释放的能抑制细胞分裂的物质,主要作用于细胞周期的G2期;M期细胞的细胞质中含有一种促进染色质凝集为染色体的物质。下列叙述正确的是()A.S期时间较长的细胞更适合做“观察细胞有丝分裂”实验的材料B.如果缺少氨基酸的供应,动物细胞一般会停留在细胞周期的G1期C.抑素抑制DNA复制所需蛋白质的合成,阻断细胞分裂D.M期细胞与G1期细胞融合,有利于G1期细胞中DNA的转录4.现有一组对胰岛素不敏感(注射胰岛素后血糖浓度无明显变化)的高血糖小鼠,为验证阿司匹林能恢复小鼠对胰岛素的敏感性,使小鼠的血糖浓度恢复正常,现将上述小鼠随机均分成若干组,下表表示各组处理方法及实验结果。下列相关叙述正确的是()组别1234处理方法胰岛素+-+-阿司匹林-++-实验结果(血糖浓度)?高于正常?高于正常注:“+”和“一”分别表示适量添加和不添加A.第4组应选择血糖浓度正常的小鼠B.第1组的实验结果为正常C.第3组的实验结果为正常D.两种药物也可以饲喂的方式添加5.某科研小组研究某池塘内草鱼种群增长速率的变化规律(如图1,其中T2之前的数据丢失)和该草鱼种群同化量的分配及流向(如图2),下列叙述正确的是()A.T2--T4时间段内,种群数量呈“S”型增长;T4—T5时间段内,种群数量逐渐下降B.当种群增长速率为m时,该草鱼的年龄组成为稳定型C.图2中“?”代表的是草鱼种群产生的粪便中的能量D.图2中两个营养级之间的能量传递效率为D/(A+B+C+D)6.驱蚊草含有香茅醛,能散发出一种特殊的柠檬型香气,从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述,错误的是A.驱蚊草的培育属于细胞工程育种,优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍B.驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法C.驱蚊草培育过程不同于植物组织培养,无细胞脱分化和再分化的过程D.驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术,育种原理是染色体数目变异二、综合题:本大题共4小题7.(9分)如图表示某草原生态系统中的食物网,回答下列问题。(1)要想研究草原生态系统的生物群落,首先要分析该群落的__________。(2)在该食物网的生物中,营养级最高的是______,食虫鸟和蜘蛛的关系是______。(3)生态学家建议,在放牧强度较大的草原,要采取措施促进优质牧草生长,同时控制鼠类和植食性昆虫的种群密度。从能量流动的角度看,其目的是_______________。(4)为处理好人口、资源、环境的关系,走可持续发展发展道路,我国政府明确提出退耕还林、退牧还草。“退耕还林,退牧还草”的过程属于______演替,理由是________。8.(10分)请回答下列与基因工程有关的问题:(1)将目的基因插入到T-DNA中用到的工具酶有____________________,在利用农杆菌转化法时,需将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA中,原因是_________________________。(2)在乙肝疫苗的生产中,应该选择________________(填抗原或抗体)基因作为目的基因,该目的基因利用____________________技术进行扩增,该技术需要用到____________________酶。在基因表达载体中标记基因的作用是________________________________。(3)用基因工程生产乙肝疫苗时,若选用细菌为受体细胞,则不能得到引起免疫反应的基因表达产物,其原因是:______________。9.(10分)马拉松运动需要运动员合理分配体力和坚强的意志品质,在比赛过程中运动员体内进行了各种生命活动的调节。回答下列问题。(1)发令枪发出开始信号,运动员迅速作出判断完成起跑,在这个反射过程中兴奋以_________的形式在神经纤维上传导,并通过最高级中枢_________的参与,对外界信息迅速作出正确的判断。(2)跑步途中会消耗大量的葡萄糖,___________(激素)的分泌量会增加,通过血液___________(填“定向”或“不定向”)运输到靶细胞,从而维持血糖浓度的相对稳定。(3)比赛时有的运动员受伤并出现伤口感染,此时机体首先通过_________免疫阻止病原体对机体的侵袭。如果还有未清除的病原体存在,主要由______借助血液循环和淋巴循环而组成的防线发挥作用。10.(10分)萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用,而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药,做了相关研究。(1)研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒,得到重组质粒,再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中,获得转基因大肠杆菌。(2)检测发现,转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低,研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物(引物B和C中都替换了一个碱基),并按图2方式依次进行4次PCR扩增,以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物?请填写以下表格(若选用该引物划“√”,若不选用该引物则划“×”)。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4(3)研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌,提取培养液中的蛋白质,用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物,判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性,研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上,培养一段时间后,比较_________的大小,以确定表达产物的生物活性大小。(4)作为微生物农药,使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌,其优点是_________。11.(15分)布偶猫又称布拉多尔猫,是猫中体形和体重较大的一种,多为三色猫或双色猫,是非常理想的家养宠物。已知布偶猫的毛色受多对基因控制,请根据控制不同颜色基因的特点回答下列相关问题:(1)布偶猫中有纯色个体,野生型为海豹色(B),后来培育出巧克力色(b)、蓝色和丁香色等类型,蓝色、丁香色分别是海豹色、巧克力色的稀释色,受d基因控制,D基因无稀释功能。从根本上,巧克力色基因来自_____________________,利用射线处理野生型海豹色个体的受精卵一定能直接获得巧克力色的个体吗?并说明原因:______________________________。若将两只基因型为BbDd的猫进行交配,理论上F1个体的表现型及比例为________。如何确定一只蓝色的布偶公猫是纯合子还是杂合子?写出实验方法并预测实验结果:_________________________________。(2)布偶猫中野生型基因(o)使白色呈现黑色,突变型基因(O)抑制棕色基因的表达,使白色呈现红色。①若两个基因同时存在则为黑红交错的双色猫,且双色猫均为母猫,不考虑从性遗传,分析产生的原因是____________________。②当白斑基因(S)存在时,对毛发颜色的分布会造成影响,使双色猫中同种颜色的毛发聚为一簇,称为三花。三花个体也是最受欢迎的类型,三花个体的基因型为__________________,同种基因型的三花猫,同颜色的毛聚集的位置不同,形成的花色多种多样,原因可能是___________________________。③极少数的双色猫和三花猫为公猫,且天生没有生育能力,产生的原因很可能是__________________。
参考答案一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1、B【解析】
细胞通过分裂进行增殖,包括物质准备和细胞分裂整个连续过程。真核细胞的分裂方式有:有丝分裂、减数分裂和无丝分裂。三种分裂方式在物质准备时都需要进行DNA复制。无丝分裂在分裂过程中不出现染色体和纺锤体。减数分裂的特点是染色体只复制一次,细胞连续分裂两次,结果是生物细胞中染色体数目减半。【详解】A、各种细胞分裂方式都要进行DNA的复制,A错误;B、有丝分裂和减数分裂过程中,着丝点分裂,姐妹染色单体分开,造成细胞中染色体数目的暂时加倍,B正确;C、雄蜂减数分裂产生的精子染色体数与体细胞相同,C错误;D、有丝分裂始终存在同源染色体,D错误。故选B。【点睛】本题考查细胞分裂方式有关知识,答题关键在于掌握有丝分裂、减数分裂和无丝分裂的过程和特点,建立细胞分裂方式之间的联系与区别,形成知识网络。2、D【解析】
现代生物进化理论的基本观点:种群是生物进化的基本单位,生物进化的实质在于种群基因频率的改变;突变和基因重组产生生物进化的原材料;自然选择使种群的基因频率发生定向的改变并决定生物进化的方向;隔离是新物种形成的必要条件。【详解】A、达尔文的自然选择学说是在拉马克的用进废退和获得性遗传的观点基础上形成的,但不能科学地解释遗传和变异的本质,现代生物进化理论能够解释遗传和变异的本质,A正确;B、现代生物进化理论认为种群是生物进化的基本单位,可遗传变异(突变和基因重组)为生物进化提供原材料,是进化的基础,B正确;C、突变和基因重组、自然选择及隔离是物种形成过程的三个基本环节,通过它们的综合作用,种群产生分化,最终导致新物种形成,C正确;D、变异为进化提供基础,生物的变异是不定向性的,进化的方向是定向的,D错误。故选D。【点睛】解答此题要求考生识记现代生物进化理论的主要内容,能结合所学的知识准确判断各选项。3、B【解析】
细胞周期包括分裂间期和分裂期(M期),分裂间期包括G1期、S期、G2期,分裂期包括前期、中期、后期和末期。由题干信息可知,抑素主要作用于细胞周期的G2期,导致细胞停留在该时期而不能进入分裂期;M期细胞的细胞质中含有一种促进染色质凝集为染色体的物质。【详解】A、M期(分裂期)时间较长的细胞更适合做“观察细胞有丝分裂”实验的材料,A错误;B、G1期主要进行RNA和蛋白质的合成,而氨基酸是蛋白质的基本单位,因此如果缺少氨基酸的供应,动物细胞一般会停留在细胞周期的G1期,B正确;C、DNA复制发生在S期,其所需的蛋白质应该是G1期合成的,而抑素主要作用于细胞周期的G2期,C错误;D、M期细胞的细胞质中含有一种促进染色质凝集为染色体的物质,若将M期细胞与G1期细胞融合,会导致G1期细胞染色质凝集,不利于G1期细胞中DNA的转录,D错误。故选B。4、C【解析】
血糖是指血液中葡萄糖的含量。维持血糖浓度的正常水平,需要神经系统和内分泌系统的协同作用。在内分泌系统中,胰岛素是现在已知的,唯一能降低血糖浓度的激素。【详解】A、为了排除无关变量的干扰,第4组应选择对胰岛素不敏感(注射胰岛素后血糖浓度无明显变化)的高血糖小鼠,A错误;B、小鼠对胰岛素不敏感,因此第1组的实验结果为高于正常,B错误;C、阿司匹林能恢复小鼠对胰岛素的敏感性,使小鼠的血糖浓度恢复正常,因此第3组的实验结果为正常,C正确;D、胰岛素为蛋白质,不能口服,会被消化道中的酶降解,胰岛素不能用饲喂的方式添加,D错误。故选C。5、D【解析】
分析图1:该曲线表示S型曲线的种群增长速率,其中T3对应的种群数量为K/2,T5对应的种群数量为K值。分析图2:图2是该生态系统中鱼摄食后能量的流向示意图,其中A表示呼吸作用消耗的能量;BCD表示鱼生长、发育和繁殖;C表示被分解者利用。【详解】A、0-T5时间段内,种群数量呈“S”型增长,T4-T5时间段内,种群增长速率虽然下降,但种群数量逐渐上升,A错误;B、当种群增长速率为m时,该草鱼的年龄组成为增长型,B错误;C、图2中的同化的总能量,除图中所示去路外,还有一部分是未被利用,即“?”表示,C错误;D、图2中两个营养级之间的能量传递效率为D/(A+B+C+D),D正确。故选D。6、C【解析】
1、植物体细胞杂交的具体过程:
2、植物体细胞杂交的原理:染色体数目变异。
3、植物体细胞杂交的意义:在克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。【详解】A、驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的,采用了植物体细胞杂交技术,属于细胞工程育种,其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍,A正确;
B、要获得天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体,需要采用酶解法(纤维素酶、果胶酶),诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法(PEG等试剂)或物理法(电刺激等),B正确;
C、驱蚊草培育过程不同于植物组织培养,但需要采用植物组织培养技术,因此有愈伤组织和试管苗形成,C错误;
D、驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术,育种原理是染色体数目变异,D正确。
故选C。二、综合题:本大题共4小题7、物种组成猫头鹰捕食和竞争使能量尽可能地流向对人类最有益的部分(或调整能量流动关系,使能量持续高效的流向对人类最有益的部分)次生该群落演替是在土壤条件基本保留,甚至还保留了植物的种子或其他繁殖体的地方发生的(或该群落演替具备一定的土壤条件)【解析】
1、食物链的起点是生产者,终点是最高营养级的消费者。生产者是第一营养级,植食性动物是第二营养级,以植食性动物为食的动物是第三营养级。2、群落演替:随着时间的推移,一个群落被另一个群落代替的过程;初生演替:是指一个从来没有被植物覆盖的地面,或者是原来存在过植被,但是被彻底消灭了的地方发生的演替;次生演替:原来有的植被虽然已经不存在,但是原来有的土壤基本保留,甚至还保留有植物的种子和其他繁殖体的地方发生的演替。3、研究能量流动的意义:(1)可以帮助人们科学规划,设计人工生态系统,使能量得到最有效的利用;(2)可以帮助人们合理地调整生态系统中的能量流动关系,使能量持续高效地流向对人类最有益的部分。【详解】(1)群落中的物种组成是区别不同群落的重要特征,故要想研究草原生态系统的生物群落,首先要分析该群落的物种组成。(2)食物链是生产者与消费者之间吃与被吃的关系形成的链状结构,图中最长的食物链为:草→食草昆虫→蜘蛛→食虫鸟→蛇→猫头鹰,故该食物网中营养级最高的生物是猫头鹰;食虫鸟能捕食蜘蛛,同时食虫鸟和蜘蛛还会竞争食草昆虫,因此两者的关系是捕食和竞争。(3)生态学家建议,在放牧强度较大的草原,要采取措施促进优质牧草生长,同时控制鼠类和植食性昆虫的种群密度。从能量流动的角度看,其目的是使能量尽可能地流向对人类最有益的部分(或调整能量流动关系,使能量持续高效的流向对人类最有益的部分)。(4)为处理好人口、资源、环境的关系,走可持续发展发展道路,我国政府明确提出退耕还林、退牧还草。“退耕还林,退牧还草”的过程属于次生演替,理由是该群落演替是在土壤条件基本保留,甚至还保留了植物的种子或其他繁殖体的地方发生的(或该群落演替具备一定的土壤条件)。【点睛】本题结合图解,考查群落的结构和食物链,要求考生能根据食物网判断该食物网中食物链的条数,某种生物的营养级别及生物之间的种间关系;识记生态系统中能量流动的过程,掌握能量传递效率意义。8、限制酶和DNA连接酶T-DNA可转移到植物细胞中,并能插入到染色体DNA上抗原PCR耐高温(热稳定)的DNA聚合酶鉴别受体细胞中是否含有目的基因,并将含有目的基因的细胞筛选出来乙肝病毒属于动物病毒,不适合寄生于原核生物;大肠杆菌为原核生物,没有真核生物所具有的内质网、高尔基体等结构,无法对核糖体合成的肽链进行加工【解析】
基因工程又叫DNA重组技术,是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取,②基因表达载体的构建,③将目的基因导入受体细胞,④目的基因的检测与鉴定。【详解】(1)将目的基因插入到T-DNA中构建基因表达载体的过程中,需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶;在利用农杆菌转化法时,需将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA中,是因为T-DNA可转移到植物细胞中,并能插入到染色体DNA上。(2)乙肝疫苗相当于抗原,可以引起机体产生没有反应,因此在乙肝疫苗的生产中,应该选择抗原基因作为目的基因;常用PCR技术扩增目的基因,该过程需要用到耐高温的DNA聚合酶;基因表达载体的成分包括启动子、终止子、目的基因、标记基因等,其中标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,并将含有目的基因的细胞筛选出来。(3)用基因工程生产乙肝疫苗时,若选用细菌为受体细胞,则不能得到引起免疫反应的基因表达产物,其原因有:乙肝病毒属于动物病毒,不适合寄生于原核生物;大肠杆菌为原核生物,没有真核生物所具有的内质网、高尔基体等结构,无法对核糖体合成的肽链进行加工。【点睛】解答本题的关键是掌握基因工程的基本步骤和基本工具,了解基因表达载体的组成成分和作用、T-DNA的作用等,并能够分析原核细胞不能得到引起免疫反应的基因表达产物的原因。9、电信号大脑皮层胰高血糖素(和肾上腺素)不定向非特异性免疫器官和免疫细胞【解析】
神经调节具有迅速、准确的特点,兴奋在神经纤维上以电信号的形式传导;胰高血糖素和肾上腺素能升高血糖,促进肝糖原的分解和非糖类物质转化。【详解】(1)兴奋在神经纤维上的传导方式为电信号;对外界信息迅速作出正确的判断的最高级中枢为大脑皮层。(2)跑步途中会消耗大量的葡萄糖,此时机体血糖浓度下降,为维持血糖平衡,胰高血糖素(和肾上腺素)的分泌会增加;激素在体内是通过体液运输到全身各处,故其运输方向是不定向的。(3)有的运动员受伤并出现伤口感染,此时机体首先通过非特异免疫(第一道防线和第二道防线)阻止病原体对机体的侵袭;如果还有未清除的病原体存在,主要由第三道防线(特异性免疫),该防线是免疫器官和免疫细胞借助血液循环和淋巴循环而组成的。【点睛】熟记神经—体液—免疫调节的网络及具体过程是解答本题的关键。10、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒(pET质粒)抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全;不会造成基因污染;有效成分纯度较高【解析】
(一)基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合磷酸二酯键。②区别:E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键.DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1、目的基因是指:编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成.人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步:基因表达载体的构建1、目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因(1)启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。(2)终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来.常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步:将目的基因导入受体细胞1、转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术.此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是大肠杆菌,其转化方法是:先用Ca2+处理细胞,使其成为感受态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步:目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定,如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】(1)在基因工程中,利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒,得到重组质粒;大肠杆菌作为受体细胞,需要用氯化钙处理,以便重组质粒的导入。(2)①根据题意和图示分析,经过4次PCR技术后获得了新的基因,这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物(引物B和C中都替换了一个碱基),因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示:引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√(3)根据实验中的对照原则,若要比较新蛋白A的表达效率是否提高,则需设置三组实验实验变量的处理分别为:仅含新蛋白质A的重组质粒,仅含蛋白A的重组质粒和空白对照(仅含空质粒,以排除空质粒可能产生的影响)。因此,将含有新蛋白A基因的重组质粒和含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒(pET质粒)分别导入大肠杆菌,提取培养液中的蛋白质,用抗原——抗体杂交方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物,判断新蛋白A基因表达效率是否提高。由于蛋白A(或新蛋白A
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