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文档简介

将目的基因导入受体细胞1.目的基因的筛选与获取2.基因表达载体的构建3.将目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定基因工程的基本操作程序将目的基因导入受体细胞将目的基因导入植物细胞

将目的基因导入动物细胞将目的基因导入微生物细胞目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程——转化将目的基因导入受体细胞将目的基因导入植物细胞农杆菌转化法基因枪法受体细胞：体细胞花粉管通道法导入植物细胞我国科学家独创①花粉管通道法

在植物授粉后一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴在花柱切面，使目的基因通过花粉管通道进入胚囊。花粉卵细胞精子花粉管如用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中；多种操作方法

易感染双子叶植物和裸子植物内含Ti质粒，其上的T-DNA可转移至受体细胞的染色体DNA上。农杆菌特点Ti质粒T-DNA②农杆菌转化法导入植物细胞Ti质粒目的基因构建表达载体导入植物细胞插入植物细胞染色DNA表达新性状转入农杆菌

将从叶片取下的圆形小片与农杆菌共培养，筛选转化细胞，再生成植株；随转化方法的突破，用农杆菌侵染水稻、玉米等单子叶植物也取得成功。如根据受体植物不同，具体转化方法有所区别将花序浸没在含农杆菌的溶液中，培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定。

基因枪法（particlegun）又称微弹轰击法，是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法。常用的金属颗粒有钨粉粒子和金粉粒子，粒子的直径一般在0.6∽4um。这是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。空气加速管微弹材料③基因枪法导入植物细胞导入动物细胞显微注射技术受精卵方法注入显微注射仪显微操作台显微注射法转化方法将含有目的基因的表达载体提纯取卵（受精卵）显微注射受精卵发育获得具有新性状的生物基因工程中，常用原核生物作为受体细胞。1.繁殖周期短2.体积小易于培养操作3.多为单细胞，遗传物质相对较少导入微生物细胞优点感受态细胞法大肠杆菌感受态细胞吸收DNA分子Ca2+处理细胞感受态细胞重组表达载体与感受态细胞混合常用菌转化方法将目的基因导入受体细胞概念图将目的基因导入受体细胞植物细胞动物细胞导入微生物细胞受体细胞体细胞转化方法农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上要点受体细胞受精卵转化方法显微注射法受体细胞原核生物转化方法感受态细胞法（Ca2+处理法）【例1】下列有关目的基因导入受体细胞的说法中，正确的是()A.大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钠离子处理B.通过显微注射法可将目的基因直接导入受体细胞中C.将目的基因导入受体细胞，并在受体细胞中维持稳定和表达的过程，称为转化D.可用基因枪法将目的基因导入动物受精卵中C典例分析典例分析C【例2】下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法错误的是(

)A.A→B一般用4种脱氧核苷酸为原料，并加入2种引物

B.A→B利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚

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