sars冠状病毒核衣壳蛋白对细胞色素氧化酶cyp450cyp4f3a酶活性影响的研究_第1页
sars冠状病毒核衣壳蛋白对细胞色素氧化酶cyp450cyp4f3a酶活性影响的研究_第2页
sars冠状病毒核衣壳蛋白对细胞色素氧化酶cyp450cyp4f3a酶活性影响的研究_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1/1sars冠状病毒核衣壳蛋白对细胞色素氧化酶cyp450cyp4f3a酶活性影响的研究I摘要SARS冠状病毒核衣壳蛋白对细胞色素氧化酶CYP450(CYP4F3A)酶活性影响的研究摘要核衣壳蛋白（N蛋白）是SARS冠状病毒(SARS-CoV)的主要结构蛋白之一，与病毒RNA结合形成核衣壳，能够诱导强烈的细胞免疫和体液免疫，在SARS的诊断和预防上具有重要的应用。

与其它冠状病毒N蛋白不同，SARS-CoVN蛋白定位于细胞质，参与SARS冠状病毒RNA合成的调控以及核衣壳的形成。

并且，SARS-CoVN蛋白能结合人亲环素(hCypA)解离病毒核心，激活AP-1信号转导途径，从而干扰宿主细胞分裂，在生长因子缺乏的情况下诱导细胞凋亡。

前期工作发现N蛋白可能在SARS冠状病毒感染过程中起重要作用。

为了研究SARS-CoVN蛋白参与炎症反应的分子机理，以全长N蛋白为诱饵蛋白，利用酵母双杂交筛选人胎肝cDNA文库时，发现细胞色素P450（CYP4F3A）与SARS-CoVN蛋白相互作用。

CYP4F3A是炎症反应过程中重要的调节蛋白，其相互作用很可能与SARS病毒的致病性相关。

本研究建立了CYP4F3A在体外的酶促反应体系及其动力学常数测定方法，并通过一系列离子交换层析、分子筛凝胶过滤层析、免疫沉淀、免疫印迹以及ELISA证明，SARS-CoVN蛋白与CYP4F3A结合可以抑制CYP4F3A的-羟化酶活性，从而抑制炎症因子LTB4的降解。

N蛋白在体外抑制CYP4F3A的酶活，使其Km值从2.5mol/L变为10.2mol/L，而加入229EN蛋白后Km仅变化为4.82mol/L。

我们发现通过尾静脉注射N蛋白在LPS诱导小鼠炎症模型中起促进炎症反应的作用。

Silybin是从植物水飞蓟中提取的黄酮类化合物，具有抑制5-酯氧酶的作用，从而间接阻断了LTB4的合成。

当在LPS注射前1h给予药物Silybin，LTB4浓度比未给药组低。

说明Silybin可以通过阻断炎症介质的生成来保护LPS诱导产生的急性肺损伤。

并且，当肌肉注射表达N蛋白的质粒并腹腔注射LPS的小鼠血清中LTB4水平与对照组相比升高。

将质粒与MDP-C（胞壁IISARS冠状病毒核衣壳蛋白对细胞色素P450(CYP4F3A)酶活性影响的研究肽佐剂）一起通过静脉免疫家兔，动物产生显著的过敏样反应。

小鼠和家兔肺部及肠道中性粒细胞浸润，部分动物表现为肺水肿，这些症状与SARS临床表现类似。

本研究为SARS致病机理的进一步研究提供了重要线索。

关键词：

SARS-CoVN蛋白；CYP4F3A；LTB4；Cyp4f18；HCoV-229EN蛋白；酶促反应动力学；米氏常数；抑制常数；ELISA3ABSTRACTTheeffectsofSARS-CoVnucleocapsid

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 作业报告

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论