宁波大学基因工程考研题库

第一章绪论

1.分子生物学要研究的主要内容是（）（）（）

参考答案是：基因工程；基因表达调控研究；结构分子生物学

第二章DNA结构

一、填空题（6分）

1.天然存在的DNA分子形式为右手（）型螺旋

参考答案是：B

2.Cot曲线方程为:（）

参考答案是：C/CO=1/（l+K2C0t）

3.DNA复性必须满足两个条件：（）（）

参考答案是：盐浓度必须高；温度必须适当高

4.DNA携带有两类不同的遗传信息，即（）信息和（）信息。

参考答案是：基因编码；基因选择性表达

二、判断题（12分）

1.拓扑异构酶I解旋需要ATP酶。

参考答案是：不正确

2.假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上。

参考答案是：不正确

3.水蜥的基因组比人的基因组大。

参考答案是：正确

4.一段长度lOObp的DNA,具有4100种可能的序列组合形式。

参考答案是：正确

5.单个核甘酸通过磷酸二酯键连接到DNA骨架上。

参考答案是：正确

6.在高盐和低温条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程

可看作是一个复性（退火）反应。

参考答案是：不正确

7.生物的遗传密码只存在于细胞核中

参考答案是：不正确

8.TopI解旋需要ATP

参考答案是：不正确

9.琼脂糖凝胶电泳一EBr电泳法分离纯化超螺旋DNA原理是根据EBr可以较多地插入到超

螺旋DNA中，因而迁移速度较快

参考答案是：不正确

10.高等真核生物的大部分DNA是不编码蛋白质的

参考答案是：正确

ll.Cotl/2与基因组复杂性有关

参考答案是：正确

12.Cotl/2与基因组大小有关

参考答案是：正确

三、单选题（4分）

1.DNA变性是由于（D）

A磷酸二酯键断裂；

B多核甘酸解离；

C碱基的甲基化修饰；

D互补碱基之间氢键断裂；

E糖昔键断裂；

2.1953年,Watson和Crick提出（A）

A多核甘酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋；

BDNA的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链；

C三个连续的核甘酸代表一个遗传密码；

D遗传物质通常是DNA而非RNA。

四、名词解释（3分）

l.GT-AGlaw:（3分）

GT-AG法则，内含子两侧的序列具有一定的保守性，上有为GT,下游一般为AG.

第三章基因和基因组

一、填空题（9分）

1.列举一个受发育调控的复杂多基因家族的例子:（）

参考答案是：珠蛋白基因家族

2.内含子和外显子联结处的序列遵守（）法则

参考答案是：GT-AG

3.基因重叠现象是英国分子生物学家（）在测定噬菌体①X174的DNA序列时发现的。

参考答案是：Sanger

4.人类基因组计划完成后要获得四张图，即（）图

参考答案是：物理图；遗传图；转录图；序列图

5.人类基因组计划中中国完成了的比例是（\

参考答案是：1%

6.人类基因组的大小是（

参考答案是：3X109bp

二、判断题（1分）

1.假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上

参考答案是：不正确

三、单选题（6分）

1.下面叙述哪些是正确的？（C）

AC值与生物的形态复杂性呈正相关

BC值与生物的形态复杂性呈负相关

C每个门的最小C值与生物的形态复杂性是大致相关的

2.关于外显子和内含子的叙述正确的是（C）

A外显子在DNA模板上有相应的互补序列，内含子没有

BhnRNA上只有外显子而无内含子序列

C除去内含子的过程称为拼接

D除去外显子的过程称为拼接

3.基因组是（D）

A一个生物体内所有基因的分子总量；

B一个二倍体细胞中的染色体数；

C遗传单位；

D生物体的一个特定细胞内所有基因的分子的总量

四、名词解释（21分）

l.transcriptomics:（3分）

转录组学，是一门在整体水平上研究细胞中基因转录的情况及转录调控规律的学科。简而言

之转录组学是从RNA水平研究基因表达的情况。转录组即一个活细胞所能转录出来的所有RNA

的总和，是研究细胞表型和功能的一个重要手段。

2.C值矛盾：（3分）

一般而言，随着生物的进化，生物体的结构与功能越复杂，其C值也越大。但真核生物中

DNA含量并不与生物的复杂性相一致，这种反常现象称为C值矛盾

3.卫星DNA:（3分）

DNA的浮力密度决定于它的G+C含量，G+C含量越高，浮力密度越大。p=1.660+

0.00098（G+C）%g/cm3,在高度重复序列中,常有一些AT含量很高的简单重复序列，AT含

量有时高达97%（如螃蟹DNA中的卫星DNA1在CsCI密度梯度离心时，易与其它DNA分开,

形成两个以上的峰，即含量较多的主峰和高度重复序列的小峰。小峰在主峰旁似卫星，称为卫星

DNAO

4.基因组：（3分）

对真核生物而言，是指能维持二倍体生物的配子或配子体正常功能的最低数目的一整套魅

体上包含的一整套基因。对原核生物而言，是指它的单个染色体所包含的全部基因

5多顺反子mRNA:（3分）

含有一种以上多肽结构基因的遗传信息，可翻译一种以上多肽产物的如绝大多数原

mRNAo

核生物、真核生物细胞器，某些动植物病毒和噬菌体的mRNA。

6.假基因：（3分）

是基因组中因突变而失活的基因，它和同一家族的活跃基因在结构上和DNA序列上有相似

性，但它不具有功能，不能转录或翻译成成熟的mRNA或Pr,或产生过早终止的无活性肽链,

或由于错误的阅读框架形成无活性的Pr,这种序列成为假基因。

7.基因家族：（3分）

真核生物基因组中有许多来源相同、结构相似、功能相关的一系列基因，成串地排列在一起。

这样一组基因称为基因家族。

五、简答题（70分）

1.非转录间隔区与转录间隔区分别位于rRNA重复的什么位置？转录间隔区与内含子有何区

别？Q0分）

rRNA的非转录间隔区位于串联转录单位之间，而转录间隔区位于转录单位的18sRNA基

因与28SRNA基因之间。

2.如何确定一个基因所含有的内含子的数目和大小？（10分）

3.在真核生物中有哪几种RNA聚合酶？简述他们的特点？（10分）

真核生物有三种DNApol（DNApolI口印）:RNA聚合酶I:转录产物是28、18、5.8SrRNA

RNA聚合酶II:转录产物是mRNARNA聚合酶III:转录产物是tRNA、5SrRNAo

4.基因家族有哪些类型？并各举一个例子。（10分）

11简单多基因家族：rRNA基因。

复杂多基因家族：组蛋白基因及果蝇tRNA基因。

发育调控的复杂多基因家族：珠蛋白基因

5.什么是蛋白质组学？设计一蛋白质组学方面的实验，并说明蛋白质组学的基本技术流程？

（10分）

蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。蛋

白质组学研究能阐明某一群体蛋白质的功能，也能丰富蛋白质数据库，是从生物大分子到细胞水

平研究的重要桥梁。

实验设计

流程：样品制备、双向电泳、质谱、生物信息学分析、免疫杂交等

6.什么是C值矛盾，C值矛盾具体表现在哪些方面。（10分）

一般而言，随着生物的进化，生物体的结构与功能越复杂，其C值也越大。但真核生物中

DNA含量并不与生物的复杂性相一致,这种反常现象称为C值矛盾。

C值矛盾表现在：

11结构、功能相似的同一类生物中，甚至亲缘关系十分接近的物种之间，它们的c值可相

差10倍乃至上千倍。

21较低等生物的C值大于较高等生物的C值

31真核生物的C值之大，远远超过其基因编码所需

人的单倍体基因组由3xl09bp组成，如将内含子算上，哺乳动物的一个基因长约5—8Kb,

少数可达10Kb,若按此计算，哺乳动物应有40—60万个基因。目前研究表明，实际基因数估

计不会超过这个数值的10%（3—4万工有些基因的序列不编码蛋白质,则基因组中只含有2%

—3%的DNA序列用于编码蛋白质。

7.试比较原核生物基因组和真核生物基因组的特点。（10分）

原核生物基因组的特点：①不具备明显的核结构，只有核类,即DNA相对集中的区域。②

基因组小，一般只有一个染色体，大多为双链环状，少数为单链或线形。③染色体DNA并不于

Pr固定地结合，不具核小体结构。④结构简练，重复序列和非编码序列很少，体现经济原则。⑤

功能密切相关的基因构成转录单元，并常转录成含多基因信息的mRMA分子，称为多顺子反子

mRMA0⑥有重叠基因：同一段DNA片段可以编码2-3中Pr分子。

真核生物基因的特点：①结构复杂，基因极庞大。②有若干个染色体，一般不呈环状，DNA

与Pr紧密结合形成染色体，具多个复制起始点。③存在核膜，DNA的转录和翻译存在时空差别。

④有很多不编码序列（内含子，内元，intron）或介入序列。⑤有大量的重复序列⑥功能上密切

相关的基因集中程度中程度不如原核生物高,大多分散在不同的染色体上，但有许多基因家族和

假基因存在。⑦有细胞器基因，chl-DNAmit-DNA,其密码子有特异性。

第四章DNA复制

一、填空题（9分）

1.复制叉上DNA双螺旋的解旋作用由（）（崔化的，它利用来源于ATP水解产生的能量沿DNA

链单向移动。

参考答案是：DNA解旋酶

2.DNApolb的生物学功能是（）

参考答案是：前导链合成

3.DNApola的生物学功能是（）

参考答案是：前导链起始和后续链合成

4.在DNA复制过程中,另一条非连续合成的子链称为（1

参考答案是：后续链

5.在DNA复制过程中，连续合成的链称为（\

参考答案是：前导链

6.在DNA复制过程中，另一条非连续合成的子链称为（\

参考答案是：后续链

7.在DNA复制过程中，连续合成的链称为（）

参考答案是：前导链

84X174环状DNA的复制方式为（）型复制。

参考答案是：滚环

9.E.coliDNA的复制方式是（）型复制；

参考答案是：e

二、判断题（4分）

1.DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。

参考答案是：正确

2.所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板，这样产生的新的双链

DNA分子由一条旧链和一条新链组成。

参考答案是：正确

3.在原核细胞内DNA引物酶是同解旋酶紧密地耦联在一起的，而真核细胞的DNA引物酶是

同DNApola紧密地耦联在一起的

参考答案是：正确

4.在DNA复制中，先导链上DNA沿5'-3'方向合成，而在后续链上则沿3'-5'方向合成。

参考答案是：不正确

三、单选题（8分）

1.使DNA超螺旋结构松驰的酶是（C）

A引发酶

B解旋酶

C拓扑异构酶

D端粒酶

E连接酶

2.真核生物复制子有下列特征，它们（C）

A比原核生物复制子短得多，因为有末端序列的存在

B比原核生物复制子长得多，因为有较大的基因组

C通常是双向复制且能融合

D全部立即启动，以确保染色体的S期完成复制

E不是全部立即启动，在任何给定的时间只有大约15%具有活性

3.一个复制子是（C）

A细胞分裂期间复制产物被分离之后的DNA片段

B复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白质

C任何自发复制的DNA序列（它与复制起点相连）

D任何给定的复制机制的产物（如单环）

E复制起点和复制叉之间的DNA片段

4.原核生物DNA复制中，①DNAPolIII;②解链酶③DNAPolI;@DNA指导的RNAPol;

⑤DNA连接酶；⑥SSB;它们的作用顺序是（E）

A④③①②⑤⑥；

B②③⑥④①⑤；

C④②①⑤⑥③；

D④②⑥①③⑤；

E②⑥④①③⑤

四、名词解释（19分）

l.semi-conservationreplication:（3分）

半保留复制,DNA复制时新合成的DNA的一条链是新合成的，一条链由原DNA保留，故

称DNA的复制为半保留复制。

2.复制体：（3分）

DNA复制时由许多酶和蛋白质聚集在一起构成复制体。

3.试阐述原核生物DNA复制与真核生物DNA复制的异同点：（10分）

相同点：都都是保留和半不连续复制，复制过程都有起始，延长和终止三阶段，都必须有相

应功能的Pr（如SSB）和DNApol参加。

不同点：①DNApolInm,其中DNApolHI是主要的DNApolo真核生物有DNApola、

B、Y、8、《,其中DNApola、DNApolb是主要的DNApol;②复制起点和速度不同：原核生

物只有一个复制起点，而真核生物有多个复制起点。原核生物复制速度大于真核生物；③真核生

物在完成复制之前，各个起始点上的DNA的复制不能再开始，而在快速生长的原核生物中，复

制起始点上可以连续开始新的DNA复制。④引物酶：原核细胞中引物酶同解族酶偶联，而真核

细胞内引物酶同后滞链的复制酶DNApola偶联。链的延伸：原核生物中DNApolHI同时负责前

导链和后续链合成,而真核生物由pola合成后滞链,polb负责合成前导链。

4.回环模型：（3分）

DNA双螺旋是同时进行复制的，在复制叉处后滞链模板形成一个环，以适应双链同时进行

复制。这种复制模型称为回环模型。回环模型认为，DNA聚合酶ID不对称二聚体复合物能同时

完成前导链和后滞链的合成，但前导链总比后滞链先形成一个片段，后滞链总迟缓一个片段，所

以同时进入合成反应的两条亲代模板链片段不互补。在复制体结构中，后滞链模板绕聚合酶形成一

180。折返环,穿过聚合酶ID的裂缝，从而使这两条模板链在此呈相同的3'-5'走向。随着后滞链

模板在聚合酶中穿行，聚合酶便从RNA引物合成冈崎片段。当合成子链达到前一段冈崎片段的5

'-P端时，后滞链模板即脱离开DNA聚合酶m,回环解开。与此同时，前移的复制体内引物酶又

起始转录一段新的RNA引物。复制体中的DNA聚合酶ID而聚体总是同时合成出两条子链，只是

与前导链相比，后滞链总是推移了一个冈崎片段。

五、简答题（30分）

1.简述DNA复制的过程。（10分）

2.以大肠杆菌为例,说明DNA复制的起始过程。（10分）

1、DnaA结合到OriC右侧的4个9bp共同序列上，直到达20-40个DnaA单体蛋白结合

成一个核心。然后DnaA蛋白作用于OriC左侧的3个13bp重复序列上，这几个位点的DNA

融化解链，形成开放复合物。

2、DnaB和DnaC以聚集体的形式与开放复合物偶联，形成一个复合物。

3、每个DnaB六聚体结合6个DnaC单体，产生的蛋白聚集体为480KD,直径6nm球状

体。

4、DnaA旋转酶使解旋产生的正超恢复为负超，SSB使产生的单链保持单链状态。

5、DNApol从Ori区阅读，并在Ori区终止，产生一段RNA引物，其3'-0H引导DNApol

的合成反应。

3.试述DNA复制过程中需要哪些酶和蛋白质参与,各有何功能？（10分）

DNA聚合酶：DNA合成

引物酶和RNA聚合酶：合成引物

解螺旋酶：解开螺旋

SSB:使解开的螺旋保持单链状态

DNA连接酶：冈崎片段的连接

旋转酶：超螺旋变为负超螺旋

第五章基因的转录

一、填空题（13分）

1.发现乳糖操纵子而获得诺贝尔奖的两位科学家是（）和（）

参考答案是：Jacob,Monod

2.E.coliRNApol全酶中b亚基的功能是（\

参考答案是：识别起始位点

3.E.coliRNApol全酶中没有（）亚基的酶称为核心酶。

参考答案是：S

4.E.coliRNApol全酶的亚基组成为（）

参考答案是：a2p2Sy

5.真核生物的mRNA加工过程中，在3'端加上（）结构

参考答案是：polyA

6.识别转录终止部位的是（）因子

参考答案是：p

7.RNA转录过程中识别转录启动子的是（）因子

参考答案是：6

8.在3'端加上的polyA尾巴由（）酶催化

参考答案是：PolyA聚合酶

9.真核生物的mRNA加工过程中，5'端加上（）

参考答案是：帽子结构

10.基因转录时，产物RNA链有（）bp个核甘酸与模板形成RNA-DNA杂合双链。

参考答案是：12

1L在RNApol结合和转录的DNA模板区域，有（）bpDNA形成解链区，

参考答案是：17

12.真核生物中已发现三种RNAPol,其中（）催化的转录产物是mRNA。

参考答案是：RNAPolII

二、判断题（1分）

L所有高等真核生物的启动子中都有TATA盒结构

参考答案是：不正确

三、单选题（10分）

1.下列关于rnRNA的描述错误的是（A）

A原核细胞的mRNA在翻译开始前需加Poly（A）尾巴

B在原核细胞的许多mRNA携带着几个多肽链的结构信息

C真核细胞mRNA在5'端有特殊的帽子结构

D真核细胞转录生成的mRNA经常被加工

E真核细胞mRNA是由RNAPolII催化合成的

2.无论是在原核生物还是在真核生物中，初级转录产物都需经过一定程度的修饰和加工，才

能表现其功能。在真核生物，mRNA有多种修饰方式但不包括（C）

A5'端加帽子结构；

B经剪接移除内含子；

C3'端加CCA结构；

D3'端力口Poly(A)尾巴;

3.真核生物中tRNA和5SrRNA的转录由哪种酶催化（D）

ARNAPolI;

B逆转录酶；

CRNAPolII;

DRNAPolIII;

ERNAPol全酶；

4.关于启动子的叙述哪项是正确的（C）

AmRNA开始被翻译的序列；

B开始转录生成mRNA的DNA序列;

CRNAPol开始结合的DNA序列；

D产生阻遏物的基因；

E阻遏蛋白结合DNA的部位；

5.下列哪一项是对三元转录复合物的正确描述（C）

A。因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物；

B全酶、TFI和解链DNA双链形成的复合物；

C全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物；

Do因子、核心酶和促旋酶形成的复合物

四、名词解释（25分）

LCAP蛋白如何作为乳糖操纵子的正调节物起作用？：（10分）

CAP即cCAM活化蛋白，结合cCAM的CAP可与乳糖操纵子的调节区结合，使RNA聚合

酶对该DNA的转录增强。

2.promoter:（3分）

启动子，启动子是位于结构基因5'端上游的一段DNA序列，能够指导全酶（holoenzyme）

同模板正确结合，活化RNA聚合酶，启动基因转录。

3.housekeepinggene:（3分）

看家基因，某些基因产物对生命全过程都是必须的，这类基因在一个生物个体的几乎所有细

胞中均表达。

4.RNAinterference:（3分）

NA干扰，RNAi是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-strandedRNA,

dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。

5.RNA编辑：（3分）

RNA编辑，基因转录产生的mRNA分子中，由于核甘酸的缺失，插入或置换，基因转录物

的序列不与基因编码序列互补，使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成，不同于基因序列中的编码信

息，这种现象称为RNA编辑。

6.暂停信号：（3分）

DNA模板中4种碱基对RNApol都是同等的，但当RNApol遇到特殊序列时，转录的速

度会突然出现变化，可少于0.1bp/s,这段序列称为暂停信号。暂停状态的模板链多为GC富集

区或反向重复序列

五、简答题（30分）

1.mRNA前体加工中加尾和加帽的生物学功能有哪些？（10分）

加尾的功能：有利于mRNA穿过核孔；稳定mRNA;增强翻译效率。

加帽的功能：mRNA稳定;增加蛋白质合成效率；帽子结构对mRNA前体剪接是必需的。

2.试比较原核生物和真核生物启动子结构的差别（10分）

Pribnowbox（-10序列、Sexfamabox（-35序列）

TATAbox（Hognessbox\CAATbox、GCbox

3.试比较原核生物和真核生物基因转录的差异（10分）

①DNApol的差别：原核生物只有一种DNApol负责转录所有类型的RNA;而真核生物有

三种DNApol（DNApolIHID）,负责不同类型基因的转录，合成不同类型的RNA。

②转录产物的差别：真核生物的初始产物包含内含子序列，因此转录产物需经过剪切，连接

等过程除去内含子；原核生物的初始产物与Pr序列成线性关系。

③转录产物的加工：真核生物转录产物要经过修饰作用，即与5端帽化和3端聚合化。

④与基因结构相吻合，原核生物mRNA是多顺子反子，而真核生物mRNA是单顺反子。

时空差异：真核生物成熟的mRNA转移到细胞质内参与Pr的生物合成，转录和翻译相对独

立；而原核生物的转录和翻译在细胞的同一部位进行。

六、论述题（10分）

1.（10分）试比较真核生物RNA聚合酶II识别的启动子与原核生物RNA聚合酶所识别的启动

子的结构特点,各结构单元的功能是什么？

第六章蛋白质的生物合成

一、填空题（5分）

LDNA后随链合成的起始要一段短的（），它是由（）以核糖核甘酸为底物合成的。

参考答案是：RNA引物;DNA引发酶

2.在DNA复制和修复过程中，修补DNA螺旋上缺口的酶称为（\

参考答案是：DNA连接酶

3.真核生物蛋白质生物合成的终止因子是（）

参考答案是：eRF

4.原核生物多肽合成的起始氨基酸为（）

参考答案是：Met

5.真核生物多肽合成的起始氨基酸为（）

参考答案是：fMet

二、判断题（5分）

1.无义密码子同等于终止密码子。

参考答案是：正确

2核糖体小亚基最基本的功能是连接mRNA与tRNA,大亚基则催化肽键的形成。

参考答案是：正确

3.密码的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率

参考答案是：正确

4.因为AUG是蛋白质合成的起始密码子，所以甲硫氨酸只存在于蛋白质的N末端。

参考答案是：不正确

5.摇摆碱基位于密码子的第三位和反密码子的第一位

参考答案是：正确

三、单选题（20分）

1.细菌核糖体由（）及（）亚基组成。（B）

A20S,40S

B30S,50S

C40S,60S

D50S,70S

2.以下哪些不是遗传密码的特征？（A）

A密码子与氨基酸的数量相同

B密码子几乎在任一物种中都通用

C一些氨基酸由多个密码子编码

D密码子是简并的

3.”同工tRNA”是（C）

A识别同义mRNA密码子（具有第三碱基简并性）的多个tRNA

B识别相同密码子的多个tRNA

C代表相同氨基酸的多个tRNA

D由相同的氨酰tRNA合成酶识别的多个tRNA

E多种识别终止密码子并导致读的tRNA

4.反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性（摇摆性）？（A）

A第一个

B第二个

C第三个

D第一个与第二个

E第二个与第三个

5.核糖体的E位点是（B）

A真核mRNA加工位点

BtRNA离开原核生物核糖体的位点

C核糖体中受EcoRI限制的位点

D电化学电势驱动转运的位点

6.起始因子IF-3的功能是（B）

A如果同40S亚基结合，将促进40S与60S亚基的结合

B如果同30S亚基结合，将促进30S与50S亚基的结合

C如果同30S亚基结合，促进30S亚基的16srRNA与mRNA的SD序列相互作用

D指导起始tRNA进入30S亚基中与mRNA结合的P位点

E激活核糖体的GTP酶，以催化与亚基相连的GTP的水解

7.下列叙述不正确的是（A）

A共有20个不同的密码子代表遗传密码

B色氨酸和甲硫氨酸都只有一个密码子

C每个核苜酸三联体编码一个氨基酸

D不同的密码子可能编码同一个氨基酸

E密码子的第三位具有可变性

8.下列关于蛋白质的生物合成的描述错误的是（A）

A活化氨基酸的竣基与相应tRNA5'端核昔酸中核糖上的3'羟基以酯键连接

B完成多肽链合成以前，甲酰甲硫氨酸残基就从N端切掉

CmRNA上密码子的阅读方向是由5'-3'端

D多肽链从N端-C端延伸

E新合成的多肽链需经加工修饰才具有生物活性

9.反密码子是UGA,它可识别下列哪个密码子（C）

AACU

BCUA

CUCA

DUAC

10.稀有核昔酸存在于下列哪一类核酸中（C）

ArRNA;

BmRNA;

CtRNA;

D核仁DNA;

EmitDNA;

四、名词解释（38分）

1.密码偏爰性：（10分）

2.简述真核细胞中翻译终止的过程：（10分）

由于氨酰tRNA上没有反密码子能够与三个终止密码子互补配对，因此翻译终止。终止并需

要tRNA的协助，此时没有氨基酸能够连接到位于P位点的肽酰tRNA上。释放因子（eRF）有

助于终止的发生，可能使tRNA上的氨基酸C端不需要转肽基和脱酰基而发生转位。新生肽直接

从P位点离开核糖体并进入细胞质（细胞质核糖体）或进入转位酶通道（内质网核糖体1

3.ORF:（3分）

开放阅读框，从起始密码子ATG开始到终止密码子为止的编码AA的核昔酸序列。

4.trans-actingfactor:（3分）

反式作用因子，是直接或间接识别和结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因

转录的蛋白质。

5反SD序列：（3分）

与mRNA上的SD序列相对应，在核糖体小亚基16SrRNA上含有一段UCCUCC序列，成

为反SD序列

6.延伸因子EF:（3分）

原核生物蛋白质合成过程中负责氨酰-tRNA进入核糖体的A位的延伸因子为EF-Tu和

EF-Ts,负责移位的是EF-G。

7.SD序列：（3分）

AUG上游的9—13个核甘酸有一段可与核糖体结合的共同序列，一般为AGGAGG,称为

SD序列。与核糖体16SrRNA的3端的CCUCCU互补，使结合于30S亚基上的起始tRNA正

确定位于mRNA的起始密码子AUG。

8.摆动假说：（3分）

1966年,Crick提出了摆动假说（wobble）,认为密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵

守碱基配对原则，第三对碱基有一定自由度可以摆动，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密

码子。摆动假说也称为三中读二（2outof3readingX

五、简答题（40分）

1.简述启动子、帽子结构、AUG的区别？（10分）

2.原核生物的蛋白质合成分为哪些阶段？简述各阶段的主要事件。（10分）

3.简述真核与原核细胞中翻译起始的主要区别Q0分）

1、起始因子不同：原核生物翻译起始因子为IF1,IF2,IF3O真核生物起始因子为elF、eIF2、

eIF3等。

2、模板不同：真核生物有帽子、尾巴，原核无。

3、真核生物40s复合物形成需要帽子结合蛋白，原核30s起始复合物形成不需要。

4、核糖体不同：真核翻译起始有关核糖体为40S,原核为30S。

5、起始氨基酸：真核生物为fMet,原核为Met。

4.论述原核生物蛋白质生物合成过程（10分）

蛋白质合成起始：IF1、IF2、IF3、GTP等（2分）

蛋白质合成延伸：进位（EF-Tu、EF-Ts）,肽键的形成，移位（EF-G）（6分）

蛋白质合成终止：RF-1、RF-2、RF-3（2分）

第七章PCR技术

一、填空题（4分）

1.采用PCR技术可扩增两个引物之外的未知序列。

参考答案是：反向PCR

2.设计PCR反应引物时，引物3'末端的末位碱基最好不用（）

参考答案是：A

3.PCR的英文全称是（）

参考答案是：polymerasechainreaction

4.PCR是由美国科学家（）等人在1983年发明的

参考答案是：Mullis

二、判断题（1分）

1.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子

参考答案是：不正确

三、名词解释（12分）

l.multiplecloningsite:（3分）

多克隆位点，MCS,是包含多个限制性酶切位点的一段很短的DNA序列。也称为多位点接

头。多克隆位点广泛应用于分子克隆和亚克隆工程中。

2.RT-PCR:（3分）

反转录PCR,先反转成CDNA,再用cDNA为模板进行PCR扩增，一般用于基因表达分析。

3.nested-PCR:（3分）

巢式PCR,先用一对外引物扩增，然后以第一次PCR扩增产物为模板,再用内引物进行扩

增。

4."中途进退式"PCR:（3分）

Drop-inDrop-outPCR,外引物设计得比内引物长一些,且用量较少，同时在第一次PCR

时采用较高的退火温度，而第二次PCR采用较低的退火温度，这样在第一次PCR时，由于较高

的退火温度内引物不能与模板结合，故只有外引物扩增产物。经过若干循环彳寺外引物基本消耗完

毕后，无须取出第一次PCR产物，只需降低退火温度，即可直接进行第二次PCR扩增.

四、简答题（50分）

l.inversePCR（10分）

反向PCR,用于扩增靶DNA区段之外的两侧未知DNA序列的方法。

2.已知A基因的cDNA序列如下，起始密码和终止密码均用框标出，试设计一对引物扩增该

基因的ORF。（10分）

上游引物：5'-ATGTCCGAAGTAATCGAAGAACATC-3'（20-25bp均正确）

下游引物：5'-恒ATATCGTCTCGTCGTCCTTCCTC-3'（反向互补，终止密码子包括在内）

3.PCR引物设计时应该注意哪些问题？（10分）

引物长度以16-30为宜；21引物扩增跨度：以200-500bp为宜，特定条件下可扩增

长至10kb的片段；11引物碱基：G+C含量以40-60%为宜;”碱基分布的随机性：ATGC随

机分布,避免5个以上的相同碱基成串排列。尤其是引物的3'端，不应有连续3个G或C;"

避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，

产生非特异的扩增条带。”两引物之间不互补，一对引物之间不应多于4个连续碱基有互补性,

以免产生引物二聚体；Z1引物3'端是引发延伸的点，不应错配：由于ATGC引起错配有一定规

律，以引物3'端A影响最大，因此，3'端的末位碱基最好选TCG,而不选A。引物的特异

性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。同源性不要超过70%或有连续8个互补

碱基同源；9▲引物5'端可以修饰

4.写出一PCR反应体系和反应条件（10分）

PCR反应体系（4分）

10XPCRBuffer2.5ul

MgCI21.5ul

dNTPs3ul

Pllul

P2lul

模板lul

Taqase0.5ul

QQH2014.5ul

PCR反应条件（3分）

94℃3min,34cycles（94℃50s,55℃50s,72℃lmin）,72℃8min,4℃hold

5.试述PCR技术的基本原理及其应用（10分）

依据体内DNA的半保留复制机理及DNA分子在不同温度下双链和单链可以相互转变的性

质人为地控制体外合成系统的温度使双链DNA变成两条单链DNA单链DNA用4种dNTPs

在引物和DNApol的作用下合成新生的DNA互补链。

包括高温变性、低温退火和适温延伸三个阶段。

PCR的应用：在分子生物学中的应用；在临床医学中的应用；在法医鉴定方面的应用。

第八章分子生物学实验

一、填空题（1分）

LRNA提取时，由于RNA易降解，需要对离心管、枪头等用（）水处理

参考答案是：DEPC

二、名词解释（38分）

l.Southernblotting:（3分）

Southern杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固

相载体上，与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信

号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的

长度。

2.BLAST:（3分）

BLAST（BasicLocalAlignmentSearchTool）是一套在蛋白质数据库或DNA数据库中进行

相似性比较的分析工具。

3.NCBI网站包含哪些信息和功能？：（10分）

NCBI网站包括PubMed数据库、核酸数据库、蛋白质数据库、蛋白质结构数据库、EST数

据库等。可以查找序列、序列比对等功能。

4.genechip:（3分）

基因芯片，该技术系指将大量探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通过

检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。通俗地说，就是通过微

加工技术，将数以万计、乃至百万计的特定序列的DNA片段（基因探针），有规律地排列固定于

2cm2的硅片、玻片等支持物上，构成的一个二维DNA探针阵列，与计算机的电子芯片十分相

似，所以被称为基因芯片。

5.Blastn:（10分）

BLAST（BasicLocalAlignmentSearchTool）是一套在DNA数据库中进行相似性比较的分

析工具,用DNA序列在DNA序列数据库中进行比对的方法。

6.Blastp:（3分）

BLAST（BasicLocalAlignmentSearchTool）是一套在蛋白质数据库中进行相似性比较的分

析工具，用蛋白质序列在蛋白质序列数据库中进行比对的方法。

7.NCBI:（3分）

美国国家生物技术信息中心，是三大核酸序列数据库之一,其网址是。

8.RACE:（3分）

rapidamplificationofcDNAendo包括5'RACE技术和3'RACE技术。

三、简答题（180分）

1.如何设计简并引物？（10分）

2.列举2-3个常用的分子标记。（10分）

3.如何查找一个基因的序列？（10分）

4.列举2-3个你知道的生物信息学常用软件。（10分）

5.RNA提取过程中要注意哪些问题？（10分）

6.如何确定RNA提取的质量？（10分）

7.引物设计时应该注意什么？（10分）

8.重组载体构建中，限制性内切酶如何确定？（10分）

9.简述如何将一个基因转入大肠杆菌中？（10分）

10.简述DNA提取的步骤（10分）

11.什么是RT-PCR?可应用在分子生物学的哪些方面?（10分）

12.简述核酸分子杂交的种类及其作用原理Q0分）

Southern杂交和Northern杂交。

Southern杂交原理：研究基因拷贝数的一个方法。将电源分离的待测DNA片段转印并结合

至！J膜上,然后用标记的DNA探针检测待测DNA的一种方法。

Northern杂交原理：研究基因表达的一个方法。杂交受体是RNA,探针是DNA或RNA

片段。原理是将待测的RNA样品经电泳分离后转印并结合到膜上，然后用标记的DNA探针检测

待测RNA的一种方法。

13.据你所知，分子生物学实验中所涉及的引物有哪几种，各有何用途和特点（10分）

1、PCR引物：一对，扩增弓物之间的序列。2、简并引物：一个氨基酸可能有多个遗传密码，

包含所有氨基酸可能的密码的一组引物。简并引物可以通过氨基酸序列或核昔酸序列比对后设计。

3、随机引物：一定数量的核昔酸随机排列，可用作反转录。4、ologo（dT）17引物：用于RT-PCR

或反转录。

14.什么是RACE技术？如何采用RACE技术克隆得到基因的cDNA全长序列？（10分）

RACE是一项基于已知cDNA序列快速克隆5'和3'末端序列的技术。常用的方法是：先

获取mRNA,去掉mRNA5'端帽子,加上寡聚接头，逆转录后,以寡聚接头部分序列和3'端

反向引物进行PCR扩增，获得5'端序列。3'RACE以5'基因特异引物和3'端寡聚dT下游

部分序列为引物进行PCR扩增获得3'端序列。5'RACE、3'RACE和核心片段通过拼接得到

基因cDNA全长

15.通过Northern杂交我们可以获取什么信息？Q0分）

可以表明探针所代表的基因在特定时段、特定条件下或某一发育阶段的mRNA水平的表达

情况。由Northern杂交信号的强弱可比较同一基因在不同组织、不同发育阶段或不同条件下的

表达差异。

16.叙述微生物（大肠杆菌）、植物和动物转基因最常用的方法及原理（10分）

微生物转化方法：CaCI2转化法，微生物用CaCI2制作感受态细胞，用热击方法将重组载体

导入感受态细胞，通过含相应抗生素的培养基平板筛选，挑选抗性单菌落，PCR鉴定。

植物转化方法：农杆菌介导法，将重组载体转入农杆菌中获得重组农杆菌，用农杆菌浸染植

物伤口，共培养后农杆菌中T-DNA片段可与植物核DNA发生重组，通过组织培养方法再生出

完整植株，抗生素筛选抗性植株，PCR鉴定。

动物转基因方法：显微注射法.用极细的注射针将外源基因片段直接注射到胚胎细胞,通过

胚胎培养获得转基因动物。

17.如何将一个基因转入大肠杆菌中,简单写出实验流程（10分）

RNA提取、反转录合成cDNA、基因PCR扩增、回收、重组载体构建、大肠杆菌感受态的

制备、转化、挑单斑、PCR检测

18.什么是蓝白斑筛选法？长出的白斑一定是转基因的吗？为什么？（10分）

很多载体都携带有一段来自大肠杆菌的Lac操纵子DNA区段，其中含有LacZ基因，它编

码如半乳糖昔酶N端的116个氨基酸，载体转化的宿主细胞为LacZ基因型，它表达如半乳糖昔

酶的C端肽链，当载体与宿主细胞同时表达两个片段时，宿主细胞才有加半乳糖昔酶活性，使特

异的底物X-Gal变为蓝色化合物，而重组子由于基因插入使基因失活，不能形成互补，在含有

X-Gal的平板上，含阳性重组子的细菌为无色菌落。

白色菌落并不一定是转基因菌株。因为以下情况也会出现白斑：载体自连；Amp、IPTG、

Xgal没涂均匀；有时插入片段也出现蓝斑，只要编码框没有被破坏。

四、论述题（20分）

1.（20分）将Bt基因转入烟草,从载体的选择到外源基因的表达,列举你用的步骤

Bt基因首先克隆入合适的克隆载体，再转入植物双元表达载体，使Bt基因转入双元表达载

体的MCS中，上游是CaMV启动子，利用双元载体的T-DNA进行基因的转移、整合。重组的

双元表达载体以根癌农杆菌介导，转入烟草愈伤组织，利用叶盘法进行转化，外源Bt基因整合到

烟草基因组中，伴随宿主基因的表达而表达。

转基因植株的筛选可以利用T-DNA左右边界间的抗性标记进行，如卡拉抗性标记。抗性植

株的Southern杂交证实DNA水平上Bt基因的整合;Northern杂交，确证Bt基因的转录；

Western杂交确证表达的蛋白质。

分子生物学综合测试卷1

一、填空题（31分）

1.真核生物蛋白质生物合成的终止因子是（I参考答案是：eRF

2.真核生物mRNA的5’末端有一个帽子结构是（），3’末端有一个尾巴是（\

参考答案是：m7GpppAp;polyA

3.内含子和外显子联结处的序列遵守（）法则。

参考答案是：GT-AG

4.基因重叠现象是英国分子生物学家（）在测定噬菌体①X174的DNA序列时发现的。

参考答案是：Sanger

5在RNApol结合和转录的DNA模板区域，有（）bpDNA形成解链区，产物RNA链有

（）个核甘酸与模板形成RNA-DNA杂合双链。

参考答案是：17;12

6.DNApola的生物学功能是（），DNApolb的生物学功能是（\

参考答案是：前导链起始和后续链合成；前导链合成

7.设计PCR反应引物时，引物3'末端的末位碱基最好不用（\

参考答案是：A

8.PCR是由美国科学家（）等人在1983年发明的，PCR的英文全称是（\

参考答案是：KBMullis;polymerasechainreaction

9.在个体发育中，位于人类第（）号染色体上的a型珠蛋白亚基的表达时间顺序是（），位

于人类第（）号染色体上的B型珠蛋白亚基的表达时间顺序是（）。

参考答案是：16;-a;11;s-Y-§-P

10.E.coliDNA的复制方式是（）型复制；4）X174环状DNA的复制方式为（）型复制。

参考答案是：e,滚环

11.人类基因组的大小是（），人类基因组计划中中国占的比例是（x

参考答案是：3X109;1%

12.识别转录终止部位的是（）因子

参考答案是：p

13.RNA转录过程中识别转录启动子的是（）因子

参考答案是：S

14EcoliRNApol全酶的亚基组成为（），没有（）亚基的酶称为核心酶，该亚基的功能

是：（）O

参考答案是：。2印'5,8,转录起始识别

15.Cot曲线方程为：（）

参考答案是：C/C0=l/（l+KC-0t）

16.DNA复性必须满足两个条件：（）;（）

参考答案是：盐浓度必需高，温度必需适当高

17.DNA携带有两类不同的遗传信息，即（）信息和（）信息

参考答案是：基因编码，基因选择性表达

18.真核生物中已发现三种RNAPol,其中（）催化的转录产物是mRNA

参考答案是：RNAPolII

二、判断题Q0分）

1.在原核细胞内DNA引物酶是同解旋酶紧密地耦联在一起的，而真核细胞的DNA引物酶是

同DNApola紧密地耦联在一起的

参考答案是：正确

2.琼脂糖凝胶电泳一EBr电泳法分离纯化超螺旋DNA原理是根据EBr可以较多地插入到超

螺旋DNA中，因而迁移速度较快

参考答案是：不正确

3.所有高等真核生物的启动子中都有TATA盒结构。

参考答案是：不正确

4.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子.参考答案是：不正确

5.假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上

参考答案是：不正确

6.摇摆碱基位于密码子的第三位和反密码子的第一位

参考答案是：正确

7.高等真核生物的大部分DNA是不编码蛋白质

参考答案是：正确

8.在DNA复制中，先导链上DNA沿5'-3'方向合成，而在后续链上则沿3'-5'方向合成。

参考答案是：不正确

9.Cotl/2与基因组复杂性有关

参考答案是：正确

10.Cotl/2与基因组大小有关

参考答案是：正确

三、单选题(10分)

I.稀有核甘酸存在于下列哪一类核酸中(C)

ArRNA

BmRNA

CtRNA

D核仁DNA

EmitDNA

2.下列关于蛋白质的生物合成的描述错误的是(A)

A活化氨基酸的竣基与相应tRNA5'端核昔酸中核糖上的3'羟基以酯键连接

B完成多肽链合成以前，甲酰甲硫氨酸残基就从N端切掉

CmRNA上密码子的阅读方向是由5'-3'端

D多肽链从N端-C端延伸

E新合成的多肽链需经加工修饰才具有生物活性

3.无论是在原核生物还是在真核生物中，初级转录产物都需经过一定程度的修饰和加工，才

能表现其功能。在真核生物，mRNA有多种修饰方式但不包括(C)

A5'端加帽子结构

B经剪接移除内含子

C3'端加CCA结构

D3'端力口Poly(A)尾巴

4.原核生物转录启动子-10区的核昔酸序列称为(C)

ATATA盒

BCAAT盒

CPribnow盒

D增强子

E调节子

5.反密码子是UGA,它可识别下列哪个密码子(C)

AACU

BCUA

CUCA

DUAC

6.关于启动子的叙述哪项是正确的(C)

AmRNA开始被翻译的序列

B开始转录生成mRNA的DNA序列

CRNAPol开始结合的DNA序列

D产生阻遏物的基因

E阻遏蛋白结