(高清版)GB∕T 37545-2019 化妆品中38种准用着色剂的测定 高效液相色谱法

GB/T37545—2019化妆品中38种准用着色剂的测定高效液相色谱法国家市场监督管理总局GB/T37545—2019ⅡGB/T37545—2019本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，可能涉及专利号为ZL201410539619.X《化妆品中38种限用着色剂同时检测的方法》专利的使用。本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场。或者个人在实施该国家标准时实施专利。该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案。相关信息可以通过以下联系方式获得：地址：大连市开发区铁山东路102号。请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。1化妆品中38种准用着色剂的测定高效液相色谱法本标准规定的高效液相色谱法适用于唇膏、指甲油、粉类等化妆品中38种准用着色剂(不含色淀)本标准方法目标物的检出限和定量限参见附录A中的表A.1。下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法4试剂和材料除非另有说明，所用水为GB/T6682中规定的一级4.110.5mol/L醋酸铵水溶液(含有0.5%抗坏血酸钠):准确称取醋酸铵(4.8)3.85g和抗坏血酸钠4.120.03mol/L醋酸铵水溶液(含0.075%甲酸):准确称取醋酸铵(4.8)2.31g,先加水溶解，然后继续2加入准确移取的750μL甲酸(4.4),最后加水定容至1L,震荡混匀后备用。4.13标准储备溶液A:分别准确称取各标准物质(食品红10、酸性紫43、酸性橙10、酸性蓝62、酸性黄1、酸性蓝7、酸性黄11、食品红9、食品蓝1、食品红7、食品黄3、食品红17、食品蓝2、食品绿3和食品蓝5共15种)5mg(精确至0.01mg)于棕色容量瓶中，用水溶解后定容至10mL,配制成质量浓度为500μg/mL的标准储备液，于4℃~6℃条件下避光保存，保存期为3个月。4.14标准储备溶液B:分别准确称取各标准物质(酸性红88、溴甲酚绿、碱性紫2、酸性橙7、酸性红50、酸性紫9、酸性绿9、酸性黑1、酸性红52、酸性蓝1、酸性黄121、分散黄16、碱性蓝26、酸性红98、溶剂黄29、酸性紫50、酸性绿22共17种)5mg(精确至0.01mg)于棕色容量瓶中，用甲醇(4.3)溶解后定容至的标准储备液，于4℃~6℃条件下避光保存，保存期为3个月。4.15标准储备溶液C:分别准确称取各标准物质(溶剂红3、溶剂黄33和溶剂绿3共3种)5mg(精确至0.01mg)于棕色容量瓶中，用四氢呋喃溶解后定容至10mL,配制成质量浓度为500μg/mL的标准储备液，于4℃~6℃条件下避光保存，保存期为3个月。4.16标准储备溶液D:准确称取标准物质(颜料红4共1种)5mg(精确至0.01mg)于棕色容量瓶中，用四氢呋喃溶解后定容至10mL,配制成质量浓度为500μg/mL的标准储备液，于4℃~6℃条件下避光保存，保存期为3个月。4.17标准储备溶液E:分别准确称取各标准物质(颜料红49和颜料红64共2种)5mg(精确至0.01mg)于棕色容量瓶中，用二甲基亚砜溶解后定容至10mL,配制成质量浓度为500μg/mL的标准储备液，于4℃~6℃条件下避光保存，保存期为3个月。4.180.45μm微孔聚四氟乙烯(PTFE)滤膜针式过滤器。5.1高效液相色谱-二极管阵列检测器。5.2高效液相色谱串联四级杆质谱仪，配置电喷雾电离源(ESI)(定性确证时使用)。5.3分析天平：感量0.001g;0.005.4涡旋混合器。5.5超声波清洗器：功率不低于300W。5.6离心机：转速不小于5000r/min,离心试管容量10mL。5.7移液枪或移液器。6试样制备准确称取0.2g样品(精确至0.001g)于10mL具塞刻度离心管中，首先加入6mL四氢呋喃(4.5)涡旋并超声10min,使样品分散并提取目标物(若遇唇膏样品无法分散的情况，可用80℃水浴适当加热1min～2min即可分散)。继续向离心管中依次加入2mL甲醇(4.2)和2mL醋酸铵水溶液(4.11),涡旋混合均匀，超声提取10min,然后于5000r/min离心10min。准确移取上层提取液2mL于5mL刻度塑料试管中，氮吹浓缩至约0.5mL,然后用甲醇(4.2)稀释并定容至4mL,超声30min后，经微孔聚四氟乙烯(PTFE)滤膜(4.18)过滤转入进样瓶中待测。7分析步骤7.1液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下：a)色谱柱：ZORBAXSB-Aq,3.5μm,3.0mm×150mm(或相当者);3GB/T37545—2019c)流动相：A:0.03mol/L醋酸铵水溶液(含0.075%甲酸)(4.12);B:乙腈；f)液相色谱分离条件参见表1。时间/min流速/(mL/min)08688色谱柱的型号、内径和长度及色谱填料粒径可根据色谱分离情况自由选择。流动相的梯度设置应根据不同色谱柱上目标化合物的保留时间做相应调整。色谱柱对流动相中的酸度变化敏感，流动相中甲酸需准确添加。注：1min～28min为色谱分离过程，28min～32min为色谱柱重新平衡过程。质谱定性确证参考条件如下：h)其他质谱参数见表2。表238种目标物的质谱分析参考参数序号目标物名称母离子m/z子离子m/z碰撞能量/扫描模式1食品红9372.0*ESI-2食品蓝1423.0342.5*ESI+4表2(续)序号目标物名称母离子m/z子离子m/z碰撞能量/扫描模式3290.6*ESI-4酸性黄1233.0*296.0ESI-5酸性橙10407.1301.8*ESI-6407.0206.9*ESI-7食品红10464.0358.9*299.7ESI-8食品红17453.1216.9*201.8ESI+9682.8*ESI-食品蓝2306.0*ESI+485.1*449.1ESI-320.9*ESI506.9*ESI-酸性蓝1462.9*265.0ESI-ESI-512.8*477.1ESI415.0*430.1ESI+479.2*435.0ESI685.6*ESI-621.0*ESI220.9*ESI-5表2(续)序号目标物名称母离子m/z子离子m/z碰撞能量/扫描模式颜料红49ESI溴甲酚绿696.7536.9*617.7ESI-407.9310.1*ESI-545.1*ESI酸性蓝62316.0*289.0ESI-酸性蓝7669.0562.9*ESI+223.1*ESI+酸性紫50554.1*ESI+溶剂黄33274.1256.2*ESI+酸性黄121693.1649.0*443.9ESI颜料红64293.0214.7ESI+291.1262.0*232.9ESI279.0ESI+667.0325.0*ESI-ESI-418.9328.0*ESI+碱性蓝26470.1454.0*ESI+高丰度离子。释液(4.10)稀释至刻度，配制成各标准物质质量浓度均为10μg/mL的混合标准工作溶液。取适量610μg/mL混合标准工作溶液，用标准溶液稀释液(4.10)稀释，配制成各标准物质质量浓度分别为8μg/mL、6pg/mL、4pg/mL、2pg/mL的系列标准工作溶液。以上标准工作溶液，均需现用现配。7.4定性分析将在相同的液相色谱条件下获得的样品溶液的液相色谱分离谱图与标准物质的液相色谱分离谱图进行比较，若样品谱图中存在保留时间与某标准物质的保留时间一致的色谱峰，并且其扣除背景后的紫外吸收图谱与该标准物质的紫外吸收图谱一致，则可确认样品中存在该物质。38种准用着色剂的标准物质液相色谱分离谱图参见附录C中的图C.1～图C.7。对经高效液相色谱法确认为超范围或超限量使用了准用着色剂的化妆品样品，必要时需进行质谱确证。7.5定量测定移取系列标准工作溶液(7.3),按照色谱条件(7.1)进行高效液相色谱分析，以系列标准工作溶液质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线。酸性橙10、酸性绿22和酸性紫9(3种)根据254nm下的紫外吸收进行定量计算；酸性黄1、酸性黄11、颜料红49、溶剂黄33、酸性黄121、溶剂红3、分散黄16、溶剂黄29(8种)根据416nm下的紫外吸收进行定量计算；食品黄3、酸性橙7、酸性紫43、颜料红4(4种)根据484nm下的紫外吸收进行定量计算；食品红9、食品红7、食品红10、食品红17、酸性红50、酸性红52、酸性红98、酸性红88、溴甲酚绿、碱性紫2、颜料红64(11种)根据514nm下的紫外吸收进行定量计算；酸性黑1、酸性紫50(2种)根据590nm下的紫外吸收进行定量计算；食品蓝1、食品绿3、食品蓝2、酸性蓝1、食品蓝5、酸性绿9、酸性蓝62、酸性蓝7、溶剂绿3、碱性蓝26(10种)根据620nm下的紫外吸收进行定量计算。为保证定量测试的准确性，测试过程宜在10h内完成。样品溶液中目标物的含量，用标准曲线外标法确定。化妆品样品中目标物含量则按式(1)进行计算。式中：X——样品中目标物的含量，单位为微克每克(μg/g);p——从标准曲线中计算出的样品溶液中目标物的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);V——按稀释倍数折算的被测样液总体积，单位为毫升(mL);m——称取样品的质量，单位为克(g)。计算结果至少保留3位有效数字。范围内，回收率为90%～110%,相对标准偏差小于10%。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于其算术平均值的10%。7序号中文名称检出浓度pg/mL检出限mg/g最低定量浓度定量限mg/g1食品红912食品蓝10.0153食品红714酸性黄15酸性橙100.0076食品黄30.00770.0080.0258食品红170.0059食品绿30.0020.005食品蓝20.0020.005酸性红500.004酸性黄110.005酸性蓝10.005酸性橙70.003酸性红520.005酸性绿220.015食品蓝50.004酸性红981酸性绿90.005酸性红880.0080.025溴甲酚绿酸性紫430.015酸性蓝620.015酸性蓝70.025碱性紫20.0258序联标国妆称的本浓连的本合最低品中浓连品中合酸化紫500.0080.025溶提黄330.025酸化黄1210.025颜准红64溶提红30.0250.005溶提黄290.0080.025颜准红40.005溶提绿30.0080.025碱化蓝260.0079GB/T37545—2019(测着用剂的)38引化妆品中种准定高色指甲B.1。色B.138引化妆品中种准定高色准料测粉品单大类油质提测CAS化日含量用精量所检日含规中1的出Food915-67-3C₂oH₁₁N₂Na₃O₁₀S₃604.472的出Food860-22-0Na+Na+466.353的出FoodC₂oH₁AlNa₂O₁0S₃562.494淀验见1AcidYellow1846-70-8C₁₀H₄N₂Na₂OgSNaONa+0358.195淀验AcidOrangeC₁6H₁₀N₂Na₂O₇S₂ONa+Na+0O0452.37NHOOGB/T37545—2019表B.1(续)序号中文名称着色剂索引通用名CI号CAS号分子式相对分子质量6食品Yellow32783-94-0C₁₆H₁₀N₂Na₂O₇S₂7食品CgH₁₃N₃Na₂OgS₂十8食品25956-17-6C₈H₁₄N₂Na₂O₈S₂Na+Na+O00N09食品2353-45-9C₃7H₃₄N₂Na₂O₁OS₃O00Na+O食品2650-18-2C₇H₄NO.S00NH4S000NH400序号中文名称着色剂索引通用名CAS号分子式相对分子质量酸性AcidC₂₅H₂₅N₂NaO₇S₂酸性AcidC₆H₃N₄NaO₄S酸性AcidC₂₂H₄N₆Na₂O₄S酸性Acid00000酸性AcidCH₁₁N₂NaO₄S0N酸性Acid0O000GB/T37545—2019蓝名标性名物着色剂离目通号名CAS名分称式相对分称量能子性AcidGreen22CI421705863-51-4C₃₉H₃₈ClN₂NaO₆S₂食品FoodCI420513536-49-0C₅4H₆₂CaN₄O₁4S₄00—0—N子性AcidCI454056441-77-6C₂₀H₁Br₁Cl₂K₂O₅BrBrBrBr792.96子性AcidCI421004857-81-2C₇H₃4CIN₂NaO₆S₂00Na+0C725.25GB/T37545—2019表B.1(续)序号中文名称着色剂索引通用名分子式相对分子质量酸性颜料C₂0H₁₃N₂NaO₄S溴甲酚绿C₂₁H₁₄Br₄O₅S酸性酸性C₃H₂₅N₂NaO₆S酸性00NH₂O0GB/T37545—2019表B.1(续)序号中文名称着色剂索引通用名CAS号分子式相对分子质量酸性AcidCI420803486-30-4690.8碱性BasicViolet2CI425203248-91-7C₂2H₂₄CIN₃酸性Acid6837-46-3C₂9Hz₁N₁O₇S₂Na624.62溶剂SolventYellowCI470008003-22-3CgHNO₂273.29酸性黄AcidYellow5601-29-6C₃4H₂₄CrN₈O₆HH)693.62颜料Pigment6371-76-2C₃4H₂2CaN₄O₆0N00N622.64GB/T37545—2019表B.1(浓)绿的本给工见规则起表甲国照工CAS的业最轻中草业最准按参起Solvent6535-42-8C₈H₁₆N₂O₂292.34业蓝DisperseYellow4314-14-1C₆H₄N₄O278.31参起SolventYellow6706-82-7C₄4H₅2N₄O₂668.91黄标Pigment2814-77-9C,H,CIN₂ON327.72参起SolventCz₈H₂2N₂O₂HN-NH418.49橙由BasicCI440452580-56-5CH₃CINHNHNN506.09GB/T37545—2019(资料性附录)38言引用着色剂的标引物质液相色谱分离谱图38化标合妆品大准本标物联食市品检验离检图见图C.1～图C.7。1——国中红9;2——国中蓝1;3——国中红7;4——酸连黄1;5——酸连橙10;6——国中黄3;7——国中红10;8——国中红17;9——国中绿3;10——国中蓝2;11——酸连红50;12——酸连黄11;13——酸连黑1;14——酸连蓝1;15——酸连橙7;16——酸连红52;17——酸连绿22;18——国中蓝5;19——酸连红98;20——酸连绿9;21——酸