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抗乙型肝炎转移因子特异活性测定

（白细胞粘附抑制试验）抗乙型肝炎转移因子能够抑制白细胞在玻璃器皿表面的粘附作用，根据未粘附白细胞数计算抑制指数来测定抗乙型肝炎转移因子活性。

1试剂

1.1RPMI1640培养液：称取2.2g碳酸氢钠、5.9gHEPES，加1000ml1640培养液使溶解。经0.22μm滤膜过滤除菌，4℃保存。

1.23.6%氯化钠溶液：称取3.6g氯化钠，溶于100ml水，经121℃、15分钟高压灭菌。2测定法

2.1小鼠白细胞悬液的制备

取体重22～25g健康小鼠5只，由眼静脉放血，无菌取出脾脏，以1640培养液洗3次，用无菌铜网轻轻压碎制成细胞悬液，用1640培养液洗3次（1500r/min离心15分钟），然后每只鼠脾脏加3ml水破坏红细胞，再加3.6%氯化钠溶液1ml调整渗透压，混匀后用200目尼龙网过滤，滤液经1500r/min离心5分钟，再分别用0.9%氯化钠溶液和1640培养液各洗1次，收集细胞，用1640培养液调整细胞浓度为1.0×106-3.0×106个/ml，备用。2.2取供试品，按标示量加注射用水制成1mg/ml的溶液。取洁净的离心管2支，各加细胞悬液1ml，一管加供试品1ml，为供试品管；另一管加无菌0.9%氯化钠溶液1ml，为对照管。置37℃致敏30分钟，1500r/min离心10分钟，弃上清夜，每管沉淀分别准确加入1640培养液1ml。取无菌培养瓶6个，前3瓶各加供试品管细胞悬液0.2ml，后3瓶各加对照管细胞悬液0.2ml，然后每瓶内加纯化的30～100μg/mlHBsAg0.2ml，1640培养液0.6ml，置CO2培养箱内37℃培养1-2小时后，取出轻轻摇匀，静置1-3分钟，显微镜下计数未粘附的白细胞数。3结果计算

按下式计算结果：

NAI=（S-C）/C×100%。

式中：NAI未

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