2025届天津市武清区等五区县高三最后一模生物试题含解析

2025届天津市武清区等五区县高三最后一模生物试题注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．土壤内含有松散的颗粒，有利于微生物和小动物的生存，下列说法正确的是（）A．土壤中微生物的存在有利于生态系统的物质循环B．土壤中微生物能将有机物分解，释放的能量供给绿色植物利用C．利用土壤小动物的避光趋湿怕高温，可采用带灯罩的日光灯制作诱虫器来进行收集D．为调查土壤中小动物的丰富度，可选用样方法，并随机取样2．肺炎双球菌转化实验中，S型菌的部分DNA片段进入R型菌内并整合到R型菌的DNA分子上，使这种R型菌转化为能合成荚膜多糖的S型菌，下列叙述正确的是（）A．R型菌转化为S型菌后，其DNA中嘌呤碱基总比例发生改变B．整合到R型菌内的DNA分子片段能表达合成荚膜多糖C．肺炎双球菌离体转化实验与TMV感染实验两者的实验设计思想一致D．从S型肺炎双球菌中提取的DNA可以使小鼠死亡3．在电子显微镜下，蓝细菌（蓝藻）和黑藻细胞中都能被观察到的结构是（）A．叶绿体 B．线粒体C．核糖体 D．内质网4．下图为生物遗传信息传递与表达过程示意图，数字表示过程。下列有关叙述正确的是（）A．烟草花叶病毒遗传信息传递的过程与上图表示的过程是相同的B．②、③过程中的碱基配对方式是相同的C．参与①和②过程的酶相同D．图示③的生理过程完全可能发生在动物细胞有丝分裂间期5．人体的一切生命活动都是在一定环境条件下进行的。人体内的绝大多数细胞并不与外环境直接接触，而是浸浴和生存在内环境之中。下列关于人体内环境及其稳态的叙述中，正确的是（）A．体液中含有许多离子和化合物，约2／3的体液属于内环境B．组织液、血浆、淋巴均可相互转化，以维持化学成分的相对稳定C．组织液渗透压增大或血浆渗透压减小都可能造成组织水肿D．代谢的主要场所是内环境，受内环境的pH、温度等影响6．苔草被旅鼠大量啃食时会产生“化学防御”：产生胰蛋白酶抑制因子，减少旅鼠肠道对氨基酸的吸收。不同样地的旅鼠种群密度与苔草化学防御水平如下图。分析正确的是（）A．可预测样地一的苔草化学防御水平将下降B．苔草与旅鼠相互抑制对方数量增长，属于种间竞争关系C．调查样地中旅鼠的种群密度一般用样方法D．“化学防御”说明信息传递有利于生命活动正常进行二、综合题：本大题共4小题7．（9分）番茄为一年生草本植物，因果实营养丰富深受人们喜爱。番茄的紫茎(A)对绿茎(a)为显性，正常果形(B)对多棱果(b)为显性，缺刻叶(C)对马铃薯叶(c)为显性，三对基因独立遗传。现有基因型分别为AABBcc、AAbbCC、aaBBCC三个番茄品种甲、乙、丙。请回答以下问题：（1）利用甲、乙、丙三个品种通过杂交培育绿茎多棱果马铃薯叶的植株丁的过程为：_____________________________________________。此过程至少需要_______________年。（2）在种植过程中，研究人员发现了一棵具有明显特性的变异株。要进步判断该变异株的育种价值，首先要确定它是否属于_______________变异。若该变异株具有育种价值，要获得可以稳定遗传的植株，可根据变异类型及生产需要选择不同的育种方法。如果变异株是个别基因的突变体，则可采用育种方法①，使突变基因逐渐_______________培育成新品种A；但若是显性突变，则该方法的缺点是______________________________。为了规避该缺点，可以采用育种方法②，其中处理1采用的核心手段是_______________。若要在较短时间内获得大量具有该变异的幼苗，可采用育种方法③，该育种方法的基本原理是_______________。8．（10分）水稻（2N=24）是一种雌雄同株的植物，现有多个纯合优良水稻品种，其特点如下表所示。某实验小组欲通过杂交育种将它们的优点集中起来。品种优良性状基因染色体位置①高产IaⅠ②高产IIBⅡ③抗倒伏CⅢ④抗锈病DIV⑤抗旱EⅢ回答下列问题：（1）水稻植株细胞内染色体组数目最多时所处的时期为__________。（2）品种①和②杂交，F1的基因型为________________（只写相关的基因即可），保留F2中的最高产性状个体并自交，F3中最高产个体所占的比例为__________。（3）若要培育出集合各种优良性状的杂交水稻，需要开展长期的育种工作，F2性状多样性的来源有（不考虑基因突变）：①减数第一次分裂后期，非同源染色体上的非等位基因的自由组合，导致配子具有多样性。②____________________。③____________________。（4）现有一批基因型CcEe的种子，为确定抗倒伏基因（C）与抗旱基因（E）的位置关系，可选择的杂交方案是___________，当杂交后代出现__________时，可说明基因C与基因E不位于同一条染色体上（不考虑交叉互换）。9．（10分）神经纤毛蛋白-1（NRP-1）是血管内皮生长因子的新型受体，经实验证明，与正常组织细胞相比，NRP-1在乳腺癌（MCF7）细胞中高表达，通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成，进而促进肿瘤体积的增长。本研究将为NRP-1单克隆抗体靶向治疗乳腺癌提供数据基础。（1）取乳腺癌（MCF7）组织块，运用____________________技术获得MCF7细胞用于后续实验。用人的_____________________蛋白对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，制备杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取培养孔中的________________（填上清液或沉淀细胞），应用_________________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养，获得NRP-1单克隆抗体（NRP-1MAb）。（2）将MCF7细胞制成单细胞悬液，等量注入4组裸鼠（即无胸腺裸鼠）右前腋下，接种后3天开始给药NRP-1单克隆抗体（NRP-1MAb），共给药7次，对照组注射等量的生理盐水。每隔5天测算一次肿瘤的体积，如下图所示：从上图中可以看出_________________________（3）结合题干信息，综合以上研究请你推测NRP-1MAb抑制肿瘤的作用机理是_____________________。（4）注射不同剂量NRP-1MAb33天后，剥离肿瘤组织称重，实验结果如下图：从该结果中可以看出___________________________。综合比较（3）和（5）的实验结果，可见中高剂量和低剂量的NRP-1MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现了不一致性。通过实验研究，有助于指导实践中科学用药。10．（10分）细胞生命活动的稳态离不开基因表达的调控，mRNA降解是重要调控方式之一。（1）在真核细胞的细胞核中，_________酶以DNA为模板合成mRNA。mRNA的5′端在相关酶作用下形成帽子结构，保护mRNA使其不被降解。细胞质中D酶可催化脱去5′端帽子结构，降解mRNA，导致其无法_________出相关蛋白质，进而实现基因表达调控。（2）脱帽降解主要在细胞质中的特定部位——P小体中进行，D酶是定位在P小体中最重要的酶。科研人员首先构建D酶过量表达细胞。①科研人员用_________酶分别切割质粒和含融合基因的DNA片段，连接后构建图1所示的表达载体。将表达载体转入Hela细胞（癌细胞）中，获得D酶过量表达细胞，另一组Hela细胞转入_________作为对照组。在含5%_________的恒温培养箱中培养两组Hela细胞。②通过测定并比较两组细胞的D酶基因表达量，可确定D酶过量表达细胞是否制备成功。请写出从RNA和蛋白质水平检测两组细胞中D酶量的思路。RNA水平：_________。蛋白质水平：_________。（3）为研究D酶过量表达是否会促进P小体的形成，科研人员得到图2所示荧光测定结果。①D酶过量表达的Hela细胞荧光结果表明，D酶主要分布在_________中。②比较两组荧光结果，推测_________。（4）研究发现细菌mRNA虽没有帽子结构，但其与mRNA降解相关的R酶也具有脱帽酶活性，可推测脱帽活性可能出现在真核生物mRNA的帽子结构出现_________；从进化的角度推测，D酶和R酶的_________序列具有一定的同源性。11．（15分）某动物黑色毛和棕色毛这一对相对性状分别由常染色体上的基因B、b决定，同时X染色体上基因I会抑制黑色与棕色色素的形成，从而使毛色变白，基因i无此作用。请回答下列相关问题。（1）种群中黑色雌性个体的基因型为________________，白色个体的基因型共有______________种。（2）群体中，理论上棕色雄性个体数_______________（填“多于”“等于”或“少于”）棕色雌性个体，理由是_____________________________。（3）现有基因型为BBX1Y的个体与纯合棕色雌性杂交，F1出现了黑色雌性个体。推测变异的原因可能是：①发生了基因突变；②发生了X染色体上I基因片段的缺失。某学生采用F1黑色雌雄个体相互交配的方式对变异原因进行研究，判断其能否依据交配后代的表现型及比例确定变异原因，并阐述你的理由：___________________________________________________________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、A【解析】

土壤中微生物能将有机物分解成无机物可供绿色植物利用，但其分解释放的能量不能供给绿色植物利用；利用土壤小动物的避光趋湿怕高温，可采用带灯罩的热光源制作诱虫器来进行收集；在进行调查土壤中小动物的丰富度时常用取样器取样的方法进行采集、调查。【详解】A、土壤中既有分解者也有生产者和消费者，因此，土壤中微生物的存在有利于生态系统的物质循环，A正确；B、土壤中微生物能将有机物分解成无机物可供绿色植物利用，但其分解释放的能量除了满足自身生命活动需要，其余均以热能的形式散失了，绿色植物无法利用这部分能量，B错误；C、利用土壤小动物的避光趋湿怕高温，可采用带灯罩的热光源制作诱虫器来进行收集，C错误；D、许多土壤动物有较强的活动能力，而且身体微小，因此不适于用样方法或标志重捕法进行调查，在进行调查土壤中小动物的丰富度时常用取样器取样的方法进行采集、调查，D错误。故选A。2、C【解析】

肺炎双球菌转化实验包括格里菲斯体内转化实验和艾弗里体外转化实验，其中格里菲斯体内转化实验证明S型细菌中存在某种“转化因子”，能将R型细菌转化为S型细菌；艾弗里体外转化实验证明DNA是遗传物质。【详解】A、R型细菌和S型细菌的DNA都是双链结构，其中碱基的配对遵循碱基互补配对原则，因此R型菌转化为S型菌后的DNA中，嘌呤碱基总比例不会改变，依然是占50%，A错误；B、整合到R型菌内的DNA分子片段，直接表达产物是蛋白质，而不是荚膜多糖，B错误；C、在“肺炎双球菌离体转化实验”中和在“噬菌体侵染细菌的实验”中，实验设计的关键思路都是把DNA和蛋白质分开研究，C正确；D、艾弗里实验证明从S型肺炎双球菌中提取的DNA可以使R型细菌转化为有毒的S型细菌，导致小鼠死亡，而不是S型细菌的DNA导致小鼠死亡，D错误。故选C。【点睛】本题考查肺炎双球菌转化实验、噬菌体侵染细菌实验，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验现象及结论等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。3、C【解析】

本题借助于电子显微镜，考查原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同。蓝细菌是原核生物，黑藻是真核生物，原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核（没有核膜、核仁和染色体）；原核细胞只有核糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质结构，含有核酸和蛋白质等物质。【详解】A、蓝细菌是原核生物，其细胞中没有叶绿体，A错误；

B、蓝细菌是原核生物，其细胞中没有线粒体，B错误；

C、真核细胞和原核细胞共有的一种细胞器是核糖体，C正确；

D、蓝细菌是原核生物，其细胞中没有内质网，D错误。

故选C。4、D【解析】

据图分析，①表示DNA的自我复制，形成两个子代DNA分子；②表示转录，形成单链的RNA；③表示翻译，形成多肽链。甲表示mRNA，是翻译的模板。【详解】A、烟草花叶病毒属于RNA病毒，其遗传信息传递的过程与上图表示的过程是不同的，A错误；B、②表示转录，③表示翻译，两个过程都遵循碱基互补配对原则，但是碱基配对方式不完全相同，前者有T-A，后者有A-U，B错误；C、参与①和②过程的酶不相同，前者有解旋酶和DNA聚合酶，后者有RNA聚合酶，C错误；D、图示③表示翻译过程，该生理过程完全可能发生在动物细胞有丝分裂间期，合成蛋白质，D正确。故选D。5、C【解析】

内环境稳态是在神经、体液和免疫调节的共同作用下，通过机体的各器官，系统的分工合作，协调统一而实现的；内环境中血糖含量、温度、pH等保持在适宜的范围内，是机体进行正常生命活动的必要条件。【详解】A、体液中含有许多离子和化合物，约1/3的体液属于内环境，A错误；B、只有组织液和血浆可相互转化，淋巴中的物质只能进入血浆，B错误；C、组织液渗透压增大或血浆渗透压减小都可能引起组织液增多，造成组织水肿，C正确；D、代谢的主要场所是细胞质基质，受内环境的pH、温度等影响，D错误。故选C。6、A【解析】

题意分析：当苔草大量被旅鼠捕食时，苔草会产生胰蛋白酶抑制因子，会抑制旅鼠消化道内蛋白质的水解，进而影响旅鼠的进一步捕食，这种“化学防御”有助于维持苔原生态系统的稳定。生态系统所具有的保持或恢复自身结构和功能相对稳定的能力，称为生态系统的稳定性。生态系统之所以能维持相对稳定，是由于生态系统具有自我调节能力。【详解】A、样地一旅鼠种群密度小，对苔草的啃食少，未来苔草的化学防御水平会下降，A正确；B、旅鼠与苔草为捕食关系，B错误；C、调查旅鼠种群密度一般用标志重捕法，C错误；D、“化学防御”说明信息传递有利于调节种间关系，维持生态系统稳定，D错误。故选A。【点睛】本题主要考查了生态系统的结构和稳定性的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断。二、综合题：本大题共4小题7、甲与乙杂交得到杂交一代，杂交代与丙杂交，得到杂交二代，杂交二代自交，收获种子，播种种子选育出表现型为绿茎多棱果马铃薯叶植株4年可遗传纯合获得新品种所需的时间(或周期)长花药离体培养和秋水仙素处理(使染色体数目加倍)植物细胞的全能性【解析】

由图可知，方法①表示杂交育种，方法②表示单倍体育种，方法③是植物组织培养。【详解】（1）根据题意，能培育出绿茎多棱果马铃薯叶的植株。培育过程：甲(AABBcc)与乙(AAbbCC)杂交得到杂交一代(AABbCc)，杂交一代(AABbCc)与丙(aaBBCC)杂交，得到的杂交二代中有基因型为AaBbCc的个体，杂交二代自交，收获种子，播种种子得到杂交三代，其中基因型为aabbcc的个体表现型为绿茎多棱果马铃薯叶植株。以上培育过程中甲×乙杂交需1年，杂交一代与丙杂交需1年，杂交二代自交需一年，收获的种子从播种到长出所需植株需一年，因此至少需要4年。（2）要判断变异株的育种价值，首先要确定它是否属于可遗传变异。如果变异株是基因突变导致，则可采用育种方法①即杂交育种，使突变基因逐渐纯合，培育成新品种A。但若是显性突变，则该方法的缺点是获得新品种所需的时间(或周期)长。若要明显缩短育种年限，可采用单倍体育种的方法即育种方法②，其中处理1采用的核心手段是花药离体培养和秋水仙素处理(使染色体数目加倍)。育种方法③即通过植物组织培养快速繁殖，原理是植物细胞的全能性。【点睛】杂交育种的原理是基因重组，诱变育种的原理是基因突变，植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。8、有丝分裂后期AaBb5/6减数第一次分裂前期，同源染色体上非姐妹染色单体的交叉互换，导致配子具有多样性受精作用过程中，雌雄配子的随机结合，导致受精卵的多样性种植这批种子，让这些植株自交（种植这批种子，让这些植株与不抗倒伏不抗旱的植株杂交）抗倒伏不抗旱：抗倒伏抗旱：不抗倒伏抗旱=1：2：1（抗倒伏不抗旱：不抗倒伏抗旱=1：1）【解析】

杂交育种可以将不同个体的优良性状集合到同一个个体中，都使用的原理为基因重组，一般杂交育种的育种年限较长，需要经过长期的杂交和自交以及筛选工作来完成。当细胞在进行分裂过程时染色体会出现加倍现象，其中有丝分裂后期染色体数目可以达到最多。有性生殖过程中由于基因重组存在，会增加配子的种类。【详解】（1）水稻是二倍体植物，体细胞进行有丝分裂时，在有丝分裂后期着丝点分裂，姐妹染色体分开成为子染色体，在纺锤丝的牵引下移向两极，此时含有4个染色体组；在进行减数分裂时，处于减数第二次分裂前期、中期及末期结束形成的成熟生殖细胞（如精子、卵细胞）内仅含1个染色体组；（2）每个纯合水稻品种具有一对优良基因，则品种①的基因型为aabb，品种的基因型为AABB，则F1的基因型为AaBb；F2中的最高产性状个体的基因型为1/3aaBB、2/3aaBb，自交后子代最高产性状的个体（aaB_）占1/3+2/3×3/4=5/6；（3）若要培育出集合各优良性状的杂交水稻，需要开展长期的育种工作，F2性状多样性的来源有：①减数第一次分裂后期，非同源染色体上非等位基因的自由组合，导致配子具有多样性；②减数第一次分裂前期，同源染色体上非姐妹染色单体的交叉互换，导致配子具有多样性；③受精作用过程中，雌雄配子的随机结合，导致受精卵的多样性；（4）为确定基因型CcEe植株中基因C基因E的位置关系，可采用自交方案或测交方案两种。种植这批种子，让这些植株自交，若子代植株中抗倒伏抗旱：不抗倒伏不抗旱=3：1，则说明基因C与基因E位于同一条染色体上（即C、E位于同一条染色体上，c、e位于同一条染色体上）；若子代植株中抗倒伏不抗旱：抗倒伏抗旱：不抗倒伏抗旱=1：2：1，则说明基因C与基因E不位于同一条染色体上（即C、e位于同一条染色体上，c、E位于同一条染色体上）；或：种植这批种子，让这些植株与不抗倒伏不抗旱的植株杂交，若子代植株中抗倒伏抗旱：不抗倒伏不抗旱=1：1，则说明基因C与基因E位于同一条染色体上（即C、E位于同一条染色体上，c、e位于同一条染色体上）；若子代植株中抗倒伏不抗旱：不抗倒伏抗早=1：1，则说明基因C与基因E不位于同一条染色体上（即C、e位于同一条染色体上，c、E位于同一条染色体上）。【点睛】该题的难点为判定两个基因的位置关系，可以用假设法进行推导，做两个基因位于两条不同的染色体上，那么在自交或测交实验中，会遵循分离定律的相关比例。若两个基因位于同一条染色体上，则可以书写遗传图解进行进一步的分析。9、动物细胞培养神经纤毛蛋白-1（NRP-1）上清液抗原—抗体杂交NRP-1MAb能够有效地降低肿瘤的体积，中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的效果更显著NRP-1在MCF7细胞中高表达，NRP-1MAb与NRP-1特异性结合，阻断了血管内皮生长因子与NRP-1的结合，抑制了肿瘤血管生成，进而降低了肿瘤的体积NRP-1MAb能够有效地降低肿瘤组织的重量，中、高剂量抗体的降低效果稍微没有低浓度的好，不同剂量降低效果的差异并不显著【解析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。【详解】（1）取乳腺癌组织块，通过动物细胞培养技术获得MCF7细胞用于后续实验；用人的神经纤毛蛋白对小鼠进行注射使小鼠产生免疫反应；抗体较轻，会留在上清液中，故要吸取培养孔中的上清液；应用抗原-抗体杂交技术进行抗体阳性检测；（2）根据题图分析可知，经过给药NRP-1MAb处理的肿瘤体积均小于对照组，说明NRP-1MAb能够有效地降低肿瘤组织的重量且中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的效果更显著；（3）已知NRP-1在乳腺癌（MCF7）细胞中高表达，通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成，进而促进肿瘤体积的增长，而NRP-1单克隆抗体则可以和NRP-1特异性结合，故阻断了血管内皮生长因子与NRP-1的结合，抑制了肿瘤血管生成，进而降低了肿瘤的体积；（4）分析题图可知，比较实验组与对照组的肿瘤组织重量NRP-1MAb能够有效地降低肿瘤组织的重量，但中、高剂量抗体的降低效果稍微没有低浓度的好，不同剂量降低效果的差异并不显著。【点睛】本题考查学生对单克隆抗体培养的相关知识，同时结合题干信息进行比较分析，考查学生对未知问题进行合理的推理、解释，并作出准确的判断的能力。10、RNA聚合翻译XhoⅠ和SalⅠ空质粒（不含融合基因的质粒）CO2分别提取两组细胞总RNA，逆转录形成cDNA，用D酶基因的特异性序列设计引物，通过PCR技术，测定并比较两组细胞D-mRNA量（提取两组细胞的总RNA，用D酶基因的特异性序列设计基因探针，测定并比较两组D-mRNA量）检测两组细胞中红色荧光的量来反映D酶的量细胞质D过量表达会促进P小体形成之前氨基酸【解析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。目的基因的检测与鉴定

①首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。②其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交技术。③最后检测目的基因是翻译成蛋白质，方法是采用抗原一抗体杂交技术。④讲行个体生物学鉴定。生物进化的方向是：从简单到复杂，从低级到高级，水生到陆生，由原核到真核。基因能够通过控制蛋白质的合成来控制生物的性状，基因控制蛋白质合成需要经过转录和翻译两个过程。【详解】（1）在真核细胞的细胞核中，以部分解旋的DNA的一条链为模板在RNA聚合酶的催化下，利用细胞核内游离的核糖核苷酸合成RNA（mRNA）的过程称为转录。通常情况下，转录出的mRNA从核孔进入细胞质中与核糖体结合，完成后续的翻译过程，实现基因对蛋白质的控制，当细胞质中D酶可催化脱去5′端帽子结构，降解mRNA，导致其无法翻译出相关蛋白质，进而实现基因表达调控。（2）①由图中表达载体的模式图显示XhoⅠ和SalⅠ两种限制酶的识别位点位于融合基因的两端，故可推测科研人员用XhoⅠ和SalⅠ酶分别切割质粒和含融合基因的DNA片段，进而实现了基因表达载体的构建。将表达载体转入Hela细胞（癌细胞）中，获得D酶过量表达细胞，为了设置对照，对照组的处理是将空质粒（不含融合基因的质粒）转入Hela细胞。在含5%CO2的恒温培养箱中培养两组Hela细胞。②基因的表达包括转录和翻译两个步骤，转录的产物是RNA，翻译的产物是蛋白质，为了检测比较两组细胞的D酶基因表达量，可通过比较两组细胞中RNA和蛋白质水平即可在RNA水平采取的方法为：分别提取两组细胞总RNA，逆转录形成cDNA，用D酶基因的特异性序列设计引物，通过PCR技术，测定并比较两组细胞D-mRNA量（提取两组细胞的总RNA，用D酶基因的特异性序列设计基因探针，测定并比较两组D-mRNA量）。蛋白质作为生物性状的表达者，由于D酶基因和荧光基因融合在一起，故可通过检测荧光蛋白的量确定D酶的表达量，具体做法为：检测两组细胞中红色荧光的量来反映D酶的量。（3）为研究D