GPC操作作业规程专业资料

排阻色谱SEQ分析排阻色谱SEQ分为GPC（凝胶渗入色谱）和GFC（凝胶过滤色谱）GPC重要用于聚合物领域，GFC重要用于生物科学领域。如下简介岛津GPC分析系统特点：★以分子量大小分离：分子量大先洗出，小后洗出。按保存时间计算分子量分布。★专用色谱柱分类：●以分子量大小分类（表白分离线性范畴）。●以流动相分类使用四氢呋喃作流动相。使用DMF作流动相。（二甲基甲酰胺）使用氯仿作流动相。使用水性溶液作流动相。依照色谱柱线性分布，色谱柱可以串连使用，先连接分子量大，再接分子量小。岛津GPCVol.1.02软件操作一方面，在CLASS-VP中对原则品进行色谱分析，优化积分后，得到抱负色谱图和数据，即去掉杂质峰和负峰（Method∈IntegrationEvents中MinArea最小峰面积，Intergateoff禁止积分，WIDTH半峰宽等等）。然后进入GPC分析软件：点击开始∈程序∈GPC∈GPCforCLASS-VP浮现下面对话框：在Datafilename下为从CLASS-VP中由色谱文献（***。dat）转换成相应GPC文献起名和排序号******.D**（如DLSICA。D01）。然后点击OK进入下面菜单：在窗口中有如下七个解决功能图标：GPCGPCMolGPCSuperSingleFileconfigurationMethodWeightBatchImposeChrmatogramManagerGPC配备GPC办法分子量批解决叠加单色谱文献管理上述图标中选取GPCGPC办法即可以满足寻常分析应用。Method2．下面再返回到CLASS-VP工作站中操作，先将其他界面最小化，如图：如图：选取File∈Data∈Open打开原则品色谱数据选取数据文献后，打开选取File∈Method∈Open打开分析该原则品办法（已优化积分完毕）选取Analysis∈Analyze分析计算该原则品一次。3．点击最下方图标栏中GPCforCLASS-VP图标，如图：进入下面界面：双击GPC办法图标，进入下面菜单：该菜单分为三某些：CalibrationCurveTable为校准曲线表，编辑原则品保存时间Time，分子量Molecular等参数CalibrationCurve（Linear）标定后，显示校准曲线。Chromatograph显示打开原则品GPC格式图谱。4．如图选取File∈LoadLCDatafile选取（2）中分析原则品时转换GPC数据文献，拟定后显示下面界面：点击该界面中GET键，得到下面界面：提问与否ClearCalibrationTable？（清除当前校准表？）选取是显示下面界面：在CalibrationCurveTable校准曲线表中Molecular项中，分别键入各个组分峰分子量然后点击该表左下角Draw显示得到拟合曲线界面：在该界面（CalibrationCurve（Linear）中，显示标定后校准曲线。如果校准曲线拟合不抱负，可以点击该曲线左下角Type键，显示下面界面，选中合理拟合类型：点击OK得到下面重新拟合后曲线：●修正：*如果样品与原则品一致（例如皆为聚苯乙烯）则不需修正。在上面界面中选取Parameter∈GPCParameter如图：浮现下面界面：NameQfactorV---αV---k样品名粘度系数原则品α值原则品k值如无则粘度系数Q和α，k皆输入1，点击OK校准曲线及时得到修正。*如果样品与原则不一致（原则与样品不一致）则需修正。在上面界面中选取Parameter∈MHConversion如图：浮现下面界面：V—α粘度系数（据MH公式手册查出键入），V—k粘度系数（据MH公式手册查出键入）PolymerA原则品α，k值。PolymerB样品α，k值。点击OK校准曲线及时得到修正。如果查不到样品粘度系数α，k值，则不做该相修正。粘度修正Parameter∈MHConversion在阐明书后有简介，请仔细阅读。有时样品α，k值化学手册查不到，可以不修正，则最后样品分析报告，为相对于标样(如聚苯乙烯)分子量分布。（Mn，M/W等）●保存校准曲线：点击File∈SaveFileAs浮现下面界面：在Filename中键入****在Pathname中拟定保存途径＊:\＊:\＊:\点击Save键，该校准曲线已保存完毕，将来使用者再做相似样品，相似条件GPC分析时可以随时打开调用，不用每次分析都做原则品分析标定。需要注意是，如果分析条件发生变化（如流动相，流速等），出峰保存时间产生偏移较大时，应当重新分析原则品标定校准曲线，以保证分析成果精确。5．样品GPC分析：当前可以返回到CLASS-VP中对样品进行色谱分析，分析结束后，执行分析计算一次即可。也可以调入已做完样品色谱数据，执行分析计算一次，都会得到相应转换GPC文献。然后进入GPC办法界面，点击如图Calculation∈GPCCalculation：浮现下面界面：在LCCalc。Data：中点击图标■打开需要样品GPC文献名在GPGMethod：中确认所用校准曲线文献名，如下图：点击拟定再点击上面界面中Calculation键，显示下面界面：样品GPC计算即告完毕。6．分析报告检查：点击View菜单中各项点击View∈Slice检查 切片数据点击View∈Peak检查 个峰数据点击View∈AverageMolecularWeight检查分子量数据点击Report∈Format编辑报告输出格式在下面界面