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中华人民共和国国家生态环境标准Waterquality—Determinationofphytoplankton—0.1mlchamber—Microscopecountingm2021-11-29发布20生态环境部发布i 2 2 2 3 5 6 6 6 7 8 9 1水质浮游植物的测定0.1ml计数框-显微镜计数法样品浓缩50倍时,对角线方式计数方法检出限为9.2×103cells/L;行格方式计数方法检出限为3.0×103cells/L;全片方式计数方法检出限为9.2×102cells/L;随机视野方式计数的方法检出的视野数、显微镜视野面积有关,按附录A凡是未注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)显微镜计数视野microscopecou在显微镜下,利用0.1ml计数框对样品中的浮游植25.1碘(I26.2定性采样瓶:30ml~100ml广口聚6.5正置或倒置生物显微镜:物镜4×、10×、20×、40×,目镜10×或15×。6.6浓缩装置:1L~2L筒形分液漏6.7样品瓶:50ml具塞棕色6.8超声波发生装置:工作频率406.13目镜分划板:又称目镜测微尺入,将浮游生物网(6.1)提出水面,网内水自然通过网孔滤出,待底部还剩少许水样3时,将底端出口移入定性采样瓶(6.2)中,打开底端活塞开关收号浮游生物网(6.1)过滤特定水层样品,其他步骤同采集表层样品。定性样品采集完成后及时将浮游如有定性样品采集的技术规范,按技术规范有高,浮游植物数量较少时,应酌情增加采样体积。定量样品采集后,样品瓶不应装定性样品采集后立即加入鲁哥氏碘液(5.5用量为水样体积的1.0%~1.5%。镜检活体样品不加活体样品在4℃~10℃避光条件下可保存36h。样品在保存过程中,应每周检查鲁哥氏碘液(5.5)的氧化程度,若样品颜色变浅,应向样品中补加适量的鲁哥氏碘液(5.5直到样品的颜色恢复为黄褐色。注:若样品需长期保存,应加入甲醛溶液(5.3用量48.3.1.1预检中,用盖玻片(6.11)将计数框(6.10)完全盖住,静置片刻,无气泡可观察样品样。随机选取若干计数小格或视野,初步估计浮游植物的数a)群体中的浮游植物细胞个体较易被辨识,能够对群体中的细胞进行计应适时轻敲浓缩装置器壁。虹吸过程中,吸液口与浮游植物沉淀物间距离应大于3在显微镜(6.5)下观察,如仍存在大量未分散的细胞团,则应延长超声波处理时间,直至能够准确计数。超58.3.2.3计数植物细胞,并记录每行的分类计数结果。若浮游植物细胞体积较大时,可降低物镜倍在40×物镜下,随机抽取一定数量的视野,分类计数每个视野内所有浮游植物细胞,并记录每个9结果计算与表示9.1结果计算AcVV0A——计数框面积,mm2;6Ac——计数面积,当计数方式为对角线、行格和全片时计数面积分别为A/计数方式为随机视野时计数面积为总视野面积,m9.2结果表示6家实验室分别用全片计数、行格计数、对角线计数和随机视野计数对浮游植物密度水平分别为77实验中产生的废液应分类收集,集中保管,依法委托有资质8积和计数框面积有关。当浓缩f倍时,按照公式(A.1)计算方法检出限。ne×V×s×fA——计数框面积,cm2;f——浓缩倍数;8——面积换算系数,μm2/cm2。9用载物台测微计标定目镜分划板,再用目镜分划板测量视野直径,计算视野的B.1.3.1装入目镜分划板(6.13)。旋下目镜上的目透镜,将目镜分划板放入接目镜的中隔板上,使B.1.3.2装入载物台测微计(6.12)。将载物台测微计置于显微镜的载物台上,有刻度的一面朝上,B.1.3.3载物台测微计标定目镜分划板。先用低倍镜观察,对准焦距,待看清载物台测微计标尺的刻重合,再向右寻找两尺的另一条重合刻度线。载物台测微计标定目镜分划板见图B4 B.1.3.4记录两条重合刻度线间的目镜分划板标尺的格数Nw和载物台测微计标尺的格数Ns。按照公(B.1)Nw——两条重合刻度线之间目镜分划板标尺的格数,个;10——载物台测微计标尺上单格的长度,μm。B.1.3.5测量显微镜视野面积。用标定后的目镜分划板,测量视野的直径d,再用圆面积通过显微镜的目镜所观察到的圆形区域称为视野。按照公式(B.3)计算视野直径,再利用圆面积FN——目镜视场数,mm;M——标准物镜放大率。计数常用的物镜
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