药材商品的质量课件

三、显微鉴定显微鉴定(microscopicidentification)是利用显微镜、显微技术及显微化学等方法对中药进行分析鉴定，以确定其真伪、纯度或品质。

在鉴定过程中，以采用显微镜观察植物、动物的组织构造、细胞形状、内含物的特征，以及矿物的光学特征等为主要内容。显微鉴定的目的多用于品种鉴定，部分用于定量分析。药材商品的质量

显微鉴定的方法分组织鉴定、粉末鉴定、显微常数测定、显微化学鉴定（细胞壁及内含物的性质）和显微定量。（一）组织构造与细胞形态鉴别1、横切或纵切片

对于根、根茎、茎藤、皮、叶类中药，一般制作横切片观察，必要时制作纵切片；果实、种子类须作横切片和纵切片；木类须观察横切、径向纵切及切向纵切三个面。药材商品的质量

切片方法有徒手切片、滑走切片和石蜡切片和冰冻切片法等。

切片的处理和封藏方法：（1）一般装片法（甘油醋酸、蒸馏水）；（2）特殊装片法（水合氯醛）。2、解离组织片观察细胞全貌，如纤维、导管、管胞、石细胞。KOH法硝铬酸法氯酸钾法木化程度低木化程度高药材商品的质量3、表面制片适用于叶、花、果实、种子、全草。药材商品的质量4、粉末制片

某些药材中特别的细胞形态、颜色、大小及内含物的特殊性，有至关重要的鉴别意义。多用水合氯醛制作临时装片。草麻黄粉末药材商品的质量5、花粉粒与孢子制片灵芝孢子药材商品的质量药材商品的质量6、矿物药制片干涉色药材商品的质量（1）淀粉粒加碘液变为蓝紫色；（2）糊粉粒加碘液变棕黄色，加硝酸汞变砖红色；（3）菊糖用95%的乙醇装片，加10%α—萘酚和浓硫酸变为紫色并逐渐溶解；（4）草酸钙结晶加稀盐酸可以溶解，加硫酸可以析出硫酸钙针状结晶；（二）细胞内含物的鉴定和细胞壁性质检查1、细胞内含物的鉴定药材商品的质量（5）碳酸钙钟乳体加稀盐酸可以溶解并产生气泡；（6）硅质加硫酸不溶解；（7）粘液加钌红试液变为红色；（8）脂肪油、挥发油或树脂加苏丹III变为橘红色、紫红色或红色，在90%的乙醇中挥发油溶解而脂肪油不溶解。药材商品的质量2、细胞壁性质的鉴定（1）木质化细胞壁加间苯三酚和浓盐酸可以变红；（2）木栓化或角质化细胞壁加苏丹III，微热后可变红；（3）纤维素细胞壁加氯化锌碘，稍放置，再加33~50%硫酸变为蓝色或紫色。（4）硅质化细胞壁加硫酸无变化。药材商品的质量

观察细胞和后含物时，常需要测量其直径、长短(以μm计)作为鉴定依据之一。测量可用目镜测微尺进行。

先将目镜测微尺用载台测微尺标化，计算出每一小格的μm数，应用时将测得目的物的小格数，乘以每一小格的μm数，即得所欲测定物的大小。测量微细物体宜在高倍镜下进行，因在高倍镜下目镜测微尺的每一格的μm数较少，测得的结果比较准确，测量较大的物体可在低倍镜下进行。（三）显微测量药材商品的质量药材商品的质量（四）电子显微镜的应用基本类型为扫描电镜，其优点有：①直接观察表面特征，样品尺寸大②样品制备简单③三度空间内调整方向④图像有立体感⑤图像放大范围广，分辨率高。放大倍数可在10~40万倍之间连续调动，分辨率一般为1~6nm。⑥对样品损伤小，污染较小。⑦可作微区成分分析药材商品的质量山茶花的新鲜花朵的花粉粒气孔药材商品的质量四、理化鉴定（一）物理常数的鉴定理化鉴定(physicalandchemicalidentification)就是利用中药中存在化学成分的化学性质和物理性质，通过化学的、物理的或仪器分析的手段，鉴定其真伪、纯度、内在质量以及有害物质的含量多少。

是使用仪器或其它方法测定某些中药，如挥发油、油脂类、树脂类、加工品类（如阿胶）、提取物（如浸膏）以及某些液体中药的物理常数，以鉴定其真伪和纯度的一种方法。包括相对密度、熔点、凝点、折光率、旋光度、粘稠度、体积比等。药材商品的质量（二）常规检查1、水分测定（1）烘干法适用于不含或少含挥发性成分的中药，烘干温度100~105℃。

供测试的样品应先破碎为直径不超过3mm的颗粒或碎片。（2）减压干燥法适用于含挥发性成分的贵重药材，用五氧化二磷作干燥剂。药材商品的质量（3）甲苯法适用于含挥发性成分的中药，用化学纯甲苯直接测定，蒸馏，使水分和挥发性成分分离，并用亚甲蓝将水染蓝，以便分层明显。药材商品的质量2、灰分测定

有总灰分和酸不溶性灰分，前者可用于所有中药，后者尤其适用于含大量草酸钙结晶的药材。【总灰分测定法】

测定用的供试品须粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后，取供试品2～3g（如须测定酸不溶性灰分，可取供试品3～5g），置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量(准确至0.01g)，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品中含总灰分的百分数。药材商品的质量【酸不溶性灰分测定法】

取上项所得的灰分，在坩锅中注意加入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩锅,置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中含酸不溶性灰分的百分数。大黄药材商品的质量3、膨胀度检查

含有粘液、果胶、树脂等成分的药材可以吸收水分而体积膨胀，测定其体积膨胀的倍数。葶苈子药材商品的质量药材商品的质量苦杏仁4、酸败度检查

含有油脂或脂肪油的药材贮藏不当，会发生酸败现象。指标：过氧化值、酸值、羰基值药材商品的质量用于含挥发油的中药变质情况的检查。5、色度检查白术药材商品的质量6、有害物质的检查（1）有机农药的检测

有机氯农药残留量的测定：DDT、六六六有机磷农药残留量的测定：敌百虫甘草药材商品的质量（2）黄曲霉毒素的检查：

B1、B2、G1、G2（3）重金属的检查

如铅、锑、银、汞、铜等。甘草药材商品的质量（4）砷盐检查

砷盐检查法是指用于药品中微量砷的限量检查。《中国药典》采用古蔡氏法或二乙基硫代氨基甲酸银法两种。砷盐限度一般不得过百万分之十，一般低于百万分之二不列入检查之中。石膏药材商品的质量（三）一般理化鉴别1、呈色反应马钱子胚乳矾酸铵H2SO4HNO3紫色橙红色2、沉淀反应如生物碱有生物碱沉淀剂苦参水煎液碘化汞钾黄白色沉淀药材商品的质量

皂苷具有能溶血和水溶液振摇后产生泡沫的特性。3、泡沫指数和溶血指数的测定

溶血指数是指皂苷对同一动物来源的红细胞稀悬浮液，在同一等渗、缓冲条件下，造成完全溶血的最低浓度。如薯蓣皂苷为四十万分之一。猪牙皂药材商品的质量4、微量升华

利用中药中所含的某些小分子量化学成分，在一定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微镜下观察其形状、颜色以及化学反应，作为鉴别特征。如茶叶（咖啡碱）、薄荷（薄荷醇）、斑蝥（斑蝥素）。药材商品的质量5、显微化学反应（1）用中药切片或粉末进行反应（2）用中药的浸提物进行反应（3）显微化学定位6、荧光分析（1）自然光下发生荧光如秦皮“取皮渍水便碧色”。（2）紫外灯下发生荧光大黄粉末有棕色荧光。（3）经化学处理后在紫外光下产生荧光（4）附着真菌或地衣而发生荧光（5）荧光分析观察化学成分存在部位紫外波长常用365nm，短波254~265nm需加以说明。药材商品的质量1、薄层色谱法以氧化铝、硅胶或纤维素为载体。中国药典2000年版有232种，2005年版有1523种中药采用此法。常用薄层扫描仪。（四）色谱法3、高效液相色谱法此法比气相色谱适用范围广，流出组分容易收集。2、气相色谱法流动相为气体，通常为氮气，固定相有两种（固体吸附剂，涂在固体表面的液膜）。适用于气体和含挥发性成分的中药，精密度高，分离效果比薄层色谱好。4、蛋白电泳色谱法动物药和果实种子类药材含有多种氨基酸、蛋白质，可使用聚丙烯酰胺凝胶进行蛋白电泳，从而分离鉴别。药材商品的质量

（五）光谱法1、紫外分光光度法200~400nm紫外光区多加入显色剂。用于定量分析和物理常数的测定。不饱和程度含量差异峰位峰的强度定性分析定量分析2、可见分光光度法400~850nm可见光区药材商品的质量

本法用于无机元素和杂质检查，是目前测定中药微量元素含量的最常用的方法。3、红外分光光度法2.5~15um红外光区官能团差异红外吸收曲线不同定性分析结构分析4、原子吸收分光光度法

此法集中了色谱技术高分离效能和光谱技术高鉴别能力的优点，故广泛使用于中药的化学成分或组分的分离和含量测定。（六）色谱光谱联用分析法药材商品的质量

用于有效成分不明确或无法精确定量的中药。通常选用水（冷浸法和热浸法）、一定浓度的乙醇或甲醇、乙醚或氯仿作溶媒。样品需过二号筛，并混匀。（七）浸出物测定百部药材商品的质量（八）含量测定挥发油测定适用于含较多挥发油的中药，分甲法和乙法，前者用于比重小于1.0的挥发油，后者用于比重大于1.0的挥发油。八角茴香药材商品的质量

五、新技术和新方法简介（一）DNA分子遗传标记技术方法：(1)聚合酶链式反应(PCR)(2)限制性内切酶酶切片段长度多态性(RFLP)(3)随机扩增多态性DNA(RAPD)和任意引物PCR(4)DNA测序方法特点：遗传稳定性、遗传多样性、化学稳定性药材商品的质量（二）指纹图谱技术特点：(1)利用指纹图谱特征性，鉴别药材真伪或产地。(2)制定指纹图谱主要特征峰的面积或比例，控制样品质量。方法：(1)薄层色谱（TLC）指纹图谱(2)高效液相色谱（HPLC）指纹图谱(3)气相色谱（GC）指纹图谱(4)高速逆流色谱（HSCCC）指纹图谱(5)X射线衍射指纹图谱(6)磁共振（NMR）指纹图谱(7)质谱（MS）指纹图谱(8)色谱质谱联用指纹图谱(9)DNA指纹图谱药材商品的质量（三）高效毛细管电泳技术优点：高效、快速、微量、可自动化。分析模式：(1)毛细管区带电泳（CZE）(2)毛细管胶束电动色谱（MECC）(3)毛细管等速电泳（CITP）(4)毛细管等电聚焦电泳（CIEF）(5)毛细管凝胶电泳（CGE）药材商品的质量（四）组织化学色谱法

显微操作取得细胞后含物，结合色谱技术，鉴定其化学成分。（五）计算机技术

特点：中药组织形态的三维化、可视化、定量化。药材商品的质量第四节中药质量标准的制定中药质量标准的特点：（1）权威性（2）科学性（3）时间性一、中药材质量标准的制定（一）质量标准（二）起草说明（三）中药拉丁名命名法二、中药制剂质量标准的制定（一）质量标准（二）起草说明药材商品的质量思考题1、中药鉴定的依据有哪些？2、中药鉴定过程中取样的一般原则。3、中药鉴定的一般程序。4、中药鉴定的主要方法有哪些？5、原植物鉴定的程序。6、性状鉴定的主要内容。7、中药理化鉴定的常规检查项目有哪些？8、中药的一般理化鉴定方法有哪些？9、中药理化鉴定的新技术有哪些？药材商品的质量第六章药材商品的质量药材商品的质量第一节药材商品质量的概念商品质量是指商品使用价值的优劣程度。对药材商品质量的基本要求是“有效、无害”。药材商品的质量第二节保证和提高药材商品质量的意义1、保证药材质量就是保证人民身体健康和生命安全2、保证药材质量是继承、发扬中医学的关键3、提高药材质量是节约资源的重要途径药材商品的质量第三节影响药材商品质量的因素一、动物、植物的生长环境二、药材的采收三、药材加工四、药材的包装贮藏药材商品的质量第四节药材质量标准《中华人民共和国药典》部颁标准：《中华人民共和国卫生部药品标准》、《中华人民共和国卫生部进口药材标准》地方标准药材商品的质量1、中药鉴定的依据：三级标准中国药典：即中华人民共和国药典，是国家药品的法律。部颁药品标准：即中华人民共和国卫生部药品标准。

地方药品标准：各地区根据自己的实际情况制定出来的药品标准。药材商品的质量出版《中华人民共和国药典》（1953年，1963年，1977年，1985年，1990年，1995年，2000年，2005年版）和部颁标准药材商品的质量第五节药材纯度与优良度测定一、杂质检查法（重点）二、水分测定法三、灰分测定法四、浸出物测定法药材商品的质量4、化学定量分析（1）灰分测定总灰分：杂质灰分、生理灰分（含有草酸钙、碳酸钙）杂质灰分：无机物（泥沙）（将总灰分用盐酸处理，溶解生理灰分后剩下残渣）药材商品的质量测定方法：精确称取药材置坩埚中缓缓加热至碳化，温度升高到500-600度，使完全灰化，计算总灰分的含量。酸不溶性灰分的测定：取已灰化的灰分，加10ml稀盐酸，加热滤过，残留则为酸不溶性灰分，计算其含量。药材商品的质量（2）水分测定烘干法适用于少量或不含挥发油的药材。条件100-105度，烘5小时甲苯法适用于含挥发油的药材。将水与挥发油蒸馏出来，水油分层，读数计算减压干燥法适用于含挥发油的贵重药材（真空干燥）如麝香药材商品的质量（3）浸出物测定法

适用于有效成分不明确或尚无定量分析方法的药材水溶性浸出物测定醇溶性浸出物测定（两者分别有冷浸法和热浸法）药材商品的质量（4）杂质检测物种来源与质量标准规定不符的物质杂质来源与规定相符但部位与规定不符无机杂质（砂石、泥沙、尘土等）方法：称量、选出杂质、称量、计算百分比。药材