《人参单体皂苷鉴定及检测方法GBT 41726-2022》详细解读

《人参单体皂苷鉴定及检测方法GB/T41726-2022》详细解读contents目录1范围2规范性引用文件3术语和定义425种人参单体皂苷的基本信息和结构式4.1基本信息4.2结构式contents目录5方法原理5.1熔点原理5.2比旋光度原理5.3薄层色谱法原理5.4质谱法原理5.5核磁共振法原理5.6高效液相色谱法原理contents目录6环境条件7试剂和材料8仪器设备9鉴定及检测方法9.1感官检测方法9.2理化常数检测方法9.3定性检测方法contents目录9.4定量检测方法附录A(资料性)人参单体皂苷13C-NMR数据附录B(规范性)人参单体皂苷定量检测方法(HPLC)011范围本标准规定了人参单体皂苷的鉴定方法及检测方法人参单体皂苷的定性鉴定方法01人参单体皂苷的定量检测方法02方法的准确性和精密度的要求03人参药材及饮片人参提取物及制品适用于人参及其制品中单体皂苷的检测含有人参的保健食品和药品为质量控制和标准化提供依据010203提供人参单体皂苷的准确含量数据确保人参产品的质量和安全性促进人参产业的标准化和规范化发展022规范性引用文件GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备，该标准规定了化学试剂标准滴定溶液的制备方法，对于人参皂苷的定量测定具有重要意义。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法，此标准确保了实验用水的质量，从而保证人参皂苷检测的准确性。国家标准YY/T0995实验动物环境和设施，为实验提供了标准化的环境和设施要求，确保实验条件的稳定性和可重复性。行业标准ISO/IEC17025检测和校准实验室能力的通用要求，该标准确保了实验室的检测和校准能力，为人参皂苷的准确检测提供了保障。国际标准其他相关文件计量技术规范JJF1070，提供了计量技术的基本规范，确保测量设备的准确性和可靠性，对于人参皂苷的定量测定至关重要。《中国药典》一部，二部，四部，其中包含了关于药品质量标准、检验方法以及制剂的通则等，对于人参皂苷的鉴定和检测具有指导意义。033术语和定义药理作用人参皂苷具有多种药理作用，如抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤、提高免疫力等。定义人参皂苷是从人参中提取的一类具有药理活性的三萜皂苷类化合物，是人参的主要有效成分之一。分类根据化学结构不同，人参皂苷可分为多种类型，如人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1、Rh2等。人参皂苷定义人参总皂苷是指从人参中提取的所有皂苷类化合物的总和，包括多种类型的人参皂苷。提取方法通常采用醇提法、水提法等方法从人参中提取人参总皂苷。用途人参总皂苷被广泛用于药品、保健品、化妆品等领域，具有提高免疫力、改善记忆、延缓衰老等功效。人参总皂苷定义通常采用色谱分离技术，如硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法分离纯化单体皂苷。分离方法研究价值单体皂苷具有更高的药理活性和特异性，对于深入研究人参的药理作用和开发新药具有重要意义。单体皂苷是指从人参总皂苷中分离纯化得到的单一类型的人参皂苷。单体皂苷04425种人参单体皂苷的基本信息和结构式人参皂苷种类该标准详细列出了25种人参单体皂苷，涵盖了人参中主要的人参皂苷类型。人参皂苷的基本信息化学名称和分子式每种人参皂苷都给出了明确的化学名称和分子式，便于准确识别和检测。CAS号每种人参皂苷都对应一个唯一的CAS号，这是其在国际化学物质登记中的唯一标识符。结构特点人参皂苷的结构式反映了其苷元（三萜类化合物）与糖基的连接方式，是理解和研究人参皂苷性质的关键。图形表示标准中提供了每种人参皂苷的结构式图形，直观地展示了其分子结构。结构解析通过对结构式的解析，可以深入了解人参皂苷的化学性质和生物活性，为其在医药、保健品等领域的应用提供理论依据。人参皂苷的结构式054.1基本信息正式名称《人参单体皂苷鉴定及检测方法GB/T41726-2022》简称或常用名（若存在）标准名称本标准规定了人参单体皂苷的鉴定方法及高效液相色谱法检测人参皂苷含量的方法。适用范围适用于人参及其制品中人参皂苷的定性鉴别和定量测定。适用对象标准范围与适用性引用标准包括但不限于高效液相色谱法、紫外-可见分光光度法等相关国家或行业标准。引用规范详细列明所引用的具体条款或章节，确保准确引用。引用标准与规范一类存在于人参中的具有药理活性的天然化合物，是评价人参质量的重要指标之一。人参皂苷一种常用的色谱分析方法，具有高分辨率、高灵敏度等优点，适用于复杂体系中组分的分离和测定。高效液相色谱法利用物质在紫外-可见光区的吸收特性进行定性鉴别和定量测定的方法。紫外-可见分光光度法术语和定义064.2结构式糖苷键连接人参皂苷是由皂苷元和糖基通过糖苷键连接而成的化合物，具有多种结构类型。常见的皂苷元人参皂苷的结构特征人参皂苷的皂苷元主要包括达玛烷型四环三萜类化合物，如人参二醇型、人参三醇型等。0102人参皂苷的分类及结构根据糖基的不同，人参皂苷可分为多种类型，如Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1和Rh2等。每种人参皂苷都有其独特的结构式和化学性质，这些差异导致了它们在药理作用和生物活性上的不同。通过高效液相色谱法（HPLC）对人参皂苷进行分离和纯化，结合紫外-可见分光光度法（UV-Vis）进行检测，可以准确地鉴定出各种人参皂苷。此外，还可以利用质谱（MS）、核磁共振（NMR）等先进技术对人参皂苷的结构进行更深入的研究和确认。人参皂苷的鉴定方法结构式的重要性了解人参皂苷的结构式对于研究其药理作用、生物活性以及开发新药具有重要意义。通过对结构式的分析，可以预测人参皂苷与生物体内分子的相互作用方式，从而为其在医药领域的应用提供理论依据。075方法原理高效液相色谱法原理概述高效液相色谱法是一种基于样品中各组分在固定相和流动相之间分配平衡的差异，实现混合物分离的方法。分离机制检测器应用在液相色谱中，固定相和流动相之间的相互作用力决定了各组分在色谱柱中的保留时间，从而实现不同组分的分离。使用紫外检测器或荧光检测器等对分离后的组分进行检测，根据色谱峰的位置和面积，可以确定各组分的种类和含量。标准曲线法是通过测定一系列已知浓度的标准溶液，建立浓度与响应值（如峰面积）之间的线性关系。原理概述制备一系列浓度梯度的标准溶液，分别测定其响应值，绘制浓度-响应值曲线。曲线制备测定待测样品的响应值，根据标准曲线计算出样品的浓度。样品测定标准曲线法对照品比较法010203原理概述对照品比较法是通过与已知浓度的对照品溶液进行比较，来确定待测样品中目标组分的含量。对照品选择选择与待测组分结构相似、性质稳定且易于获得的化合物作为对照品。含量计算根据对照品和待测样品的色谱峰面积之比，计算出待测样品中目标组分的含量。内标法01内标法是在样品中加入一种已知浓度的内标物，通过测定内标物和待测组分的峰面积之比，来消除实验条件波动对测定结果的影响。选择与被测组分性质相近、保留时间相近且不与被测组分发生反应的物质作为内标物。在相同实验条件下，分别测定内标物和待测组分的峰面积，根据峰面积之比计算出待测组分的含量。0203原理概述内标物选择测定与计算085.1熔点原理熔点是指物质从固态转变为液态时的温度。对于人参单体皂苷，熔点是其物理性质之一，可用于鉴定和纯度检查。熔点定义毛细管法是将待测物装入毛细管中，通过加热观察其熔化过程来确定熔点。显微熔点测定法则是利用显微镜观察待测物在加热过程中的熔化现象来确定熔点。常用的熔点测定方法有毛细管法和显微熔点测定法。熔点测定方法熔点与纯度的关系一般来说，纯度越高的物质，其熔点越接近理论值。如果人参单体皂苷的熔点与标准值相差较大，可能说明其纯度不够或者存在杂质。010203熔点测定时需要使用纯净的试剂和干燥的仪器，以避免杂质和水分对测定结果的影响。加热速度应适中，过快或过慢都可能影响测定结果的准确性。需要进行多次测定并取平均值，以提高测定结果的可靠性。熔点测定的注意事项095.2比旋光度原理比旋光度的定义比旋光度是单位浓度和单位长度下的旋光度，是旋光性物质的特征物理常数。它反映了物质对偏振光旋转的能力，对于鉴定和检测旋光性物质具有重要意义。比旋光度的测量原理比旋光度的测量基于旋光仪的工作原理，通过测量偏振光通过样品后的旋转角度，计算得到比旋光度。旋光仪主要由光源、起偏镜、检偏镜和盛液管组成，能够准确测定旋光度和旋光方向。人参皂苷作为人参的主要活性成分，具有特定的比旋光度值，这为其鉴定和检测提供了重要依据。通过测定人参皂苷的比旋光度，可以判断其纯度和质量，确保人参产品的安全性和有效性。人参皂苷的比旋光度特性105.3薄层色谱法原理薄层色谱法（TLC）是一种层析分离技术。薄层色谱法定义将固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，形成均匀薄层。用于药品的鉴别、杂质检查或含量测定。利用不同物质在固定相和展开剂中的分配系数不同，实现物质的分离。通过比较样品与对照品在薄层板上的比移值（Rf）进行定性分析。可用于快速分离和定性分析少量物质，也可用于跟踪反应进程。薄层色谱法原理010203ABCD制备薄层板选择合适的固定相和展开剂，涂布于基片上形成薄层。薄层色谱法操作步骤展开将点样后的薄层板放入展开室中，加入适量的展开剂进行展开。点样将待测样品和对照品点于薄层板上。显色与观察展开完成后，取出薄层板进行显色处理，观察并记录色谱图。010203可用于分离和鉴定人参中的单体皂苷成分。通过与对照品色谱图的比较，确定样品中是否含有特定的人参单体皂苷。可用于检测人参产品的质量和纯度，为中药质量控制提供依据。薄层色谱法在人参单体皂苷鉴定中的应用115.4质谱法原理质谱法是一种通过测量离子质荷比（m/z）来分析物质的方法。通过检测离子的质荷比和相对强度，可以获得样品的分子结构、分子量以及化学成分等信息。在质谱法中，样品分子被电离成离子，并在电场和磁场的作用下，根据质荷比进行分离。质谱法的基本概念质量分析器利用电场和磁场对离子进行分离，根据质荷比将离子分配到不同的轨道上。检测器用于检测分离后的离子，并将其转化为电信号进行记录和分析。离子源用于将样品分子电离成离子，常用的电离方法包括电子轰击电离（EI）、化学电离（CI）等。质谱仪的构成通过质谱法可以准确地测定人参单体皂苷的分子量，从而确定其化合物组成。质谱法在人参单体皂苷鉴定中的应用利用质谱图中的特征峰，可以对人参单体皂苷进行定性和定量分析。结合其他分析技术（如核磁共振、红外光谱等），可以进一步确认人参单体皂苷的结构和性质。VS高灵敏度、高分辨率、能够提供丰富的结构信息、适用于复杂样品的分析等。局限性对于某些难以电离的化合物可能无法检测、样品前处理过程可能较为复杂等。优势质谱法的优势与局限性125.5核磁共振法原理010203核磁共振（NMR）是一种物理现象，利用原子核在磁场中的行为进行检测。人参皂苷分子中的氢原子具有核磁共振活性，可以通过NMR技术进行检测。NMR技术能够提供分子的结构信息，包括化学键、构象等。核磁共振技术介绍可以对人参皂苷进行定量分析，确定其在样品中的含量。NMR技术还可以用于研究人参皂苷在生物体内的代谢过程和作用机制。通过NMR技术可以准确鉴定人参皂苷的种类和结构。核磁共振法在人参皂苷鉴定中的应用将待测样品溶解在适当的溶剂中，制备成适合NMR测试的溶液。样品制备将样品溶液放入NMR仪器中进行测试，获取NMR图谱。NMR测试对NMR图谱进行解析，确定人参皂苷的种类和结构，并进行定量分析。数据处理与分析核磁共振法检测步骤010203NMR技术具有高精度、高分辨率的特点，能够准确鉴定人参皂苷的种类和结构；同时，该技术对样品无损伤，可进行无损检测。优点NMR设备价格昂贵，测试成本较高；同时，该技术需要专业人员操作和分析，技术要求较高。缺点核磁共振法的优缺点135.6高效液相色谱法原理高效液相色谱法（HPLC）是一种利用高压输液系统，以液体为流动相，通过色谱柱将样品中各组分进行分离的色谱分析方法。色谱柱色谱柱是高效液相色谱法的核心部件，内部填充有固定相，用于实现样品组分的分离。高效液相色谱法基本概念高效液相色谱法原理检测系统分离后的组分依次进入检测系统，通过紫外检测器、荧光检测器等检测器对各组分进行检测和记录，得到色谱图和峰信息。分离过程样品溶液经进样器进入色谱柱后，各组分在固定相和流动相之间进行多次分配平衡。由于各组分在固定相和流动相中的溶解度、吸附能力、亲和力等性质不同，导致各组分在色谱柱中的迁移速度不同，从而实现分离。输液系统高效液相色谱法采用高压输液系统，将流动相（单一溶剂或混合溶剂、缓冲液等）以恒定的流速泵入色谱柱。分离效果好高效液相色谱法具有高分辨率和高灵敏度，能够有效地分离和检测人参皂苷等复杂成分。定性定量分析通过对色谱图和峰信息的分析，可以对人参皂苷进行定性和定量分析，准确测定其含量和种类。方法可靠高效液相色谱法是一种成熟的分析方法，具有较高的准确性和重现性，适用于人参皂苷等天然产物的质量控制和研究。020301高效液相色谱法在人参皂苷检测中的应用146环境条件01温度控制实验室温度应保持在20-25℃，以确保实验设备的稳定性和实验结果的准确性。实验室环境02湿度要求相对湿度应控制在45%-60%，以避免样品受潮或干燥，影响实验结果。03光照条件实验室应避免直接阳光照射，使用柔和的室内光源，以减少光化学反应对实验结果的影响。实验前应确保所有实验设备的清洁度，避免残留物对实验结果造成干扰。设备清洁实验室内应保持低尘埃环境，以减少对样品和实验设备的污染。尘埃控制实验室内应采取适当的消毒和灭菌措施，以降低微生物对实验结果的影响。微生物控制设备与环境清洁度安全与防护措施个人防护实验人员应穿戴适当的防护服、手套和护目镜，以确保个人安全。01化学品储存化学品应储存在安全、干燥、通风的地方，避免化学品泄漏或挥发对实验结果和人员安全造成影响。02废弃物处理实验过程中产生的废弃物应按规定进行分类和处理，以保护环境和人员健康。03157试剂和材料7.1试剂甲醇用于制备对照品溶液和供试品溶液，确保溶解和稀释的准确性。香草醛高氯酸试液1%浓度，用于标准曲线的制备和样品的显色反应。硫酸溶液77%浓度，用于增强显色反应的灵敏度。人参皂苷Re对照品用于制备对照品溶液，建立标准曲线，以及后续的含量测定。7.2对照品人参总皂苷标准品用于验证检测方法的准确性和可靠性。7.3标准品“提供60℃的恒温环境，保证显色反应的稳定性和可重复性。恒温水浴用于检测样品的吸光度，进而计算人参总皂苷的含量。紫外-可见分光光度计用于标准曲线的制备和样品的显色反应，确保反应过程的密闭性。具塞试管7.4其他材料168仪器设备输液系统具备高精度、低脉动的输液泵，能提供稳定的流速。数据处理系统能进行数据采集、处理和分析，提供准确的定量结果。检测系统紫外-可见光检测器，具有高灵敏度和宽动态范围。高效液相色谱仪提供稳定、连续的光谱范围，确保准确的吸光度测量。紫外-可见分光光度计光源系统具有高灵敏度的光电检测器，能够检测微弱的光信号。检测系统自动记录和分析测量数据，提供可靠的定量和定性分析结果。数据处理系统能够精确称量样品和对照品，确保实验的准确性。高精度测量具有良好的抗震性能和温度稳定性，确保称量结果的可靠性。稳定性好具有人性化的操作界面和便捷的称量功能，提高实验效率。易于操作精密天平精确控温能够提供稳定的加热温度，确保实验条件的一致性。大容量设计安全可靠恒温水浴锅可容纳多个样品同时加热，提高实验效率。具有过热保护和防干烧功能，确保实验安全。179鉴定及检测方法适用范围适用于人参皂苷Re等单体皂苷的定性和定量分析。操作步骤包括对照品溶液和供试品溶液的制备，以及标准曲线的绘制和样品测定。注意事项需严格控制色谱条件，如流动相配比、柱温、检测波长等，以确保测定结果的准确性和可靠性。9.1高效液相色谱法适用范围适用于人参总皂苷的含量测定，具有操作简便、快速等优点。操作步骤包括样品的制备、标准曲线的绘制和样品测定。其中，样品需经香草醛高氯酸试液处理，并在特定条件下进行加热和冷却。注意事项需消除气泡干扰，确保比色皿的清洁度，以提高测定结果的准确性。9.2紫外-可见分光光度法010203适用范围操作步骤注意事项适用于人参皂苷的分子结构确认和定性分析，具有高分辨率和高灵敏度等优点。包括样品的制备、质谱条件的设定和数据分析。其中，质谱条件需根据具体皂苷类型进行调整。需确保样品的纯度和浓度符合质谱分析要求，以提高分析结果的可靠性。9.3质谱法0102039.4其他辅助方法红外光谱法可用于人参皂苷的结构表征和辅助定性分析，提供分子结构信息。核磁共振法可用于人参皂苷的深入结构解析和定量分析，但操作相对复杂且成本较高。薄层色谱法可用于人参皂苷的初步定性和半定量分析，操作简单易行。030201189.1感官检测方法观察人参皂苷的颜色优质的人参皂苷应为黄白色或淡黄色，若发现颜色偏深或有杂质，则可能品质不佳。检查粉末的细腻程度人参皂苷应为无定形粉末，若发现有颗粒状或结晶状物质，则可能含有杂质或品质下降。视觉检查嗅闻人参皂苷的气味优质的人参皂苷应有一种特殊的草药香味，若气味淡薄或有异味，则可能品质不佳。嗅觉检查触摸人参皂苷的质地用手指轻轻捻动粉末，应感觉细腻且均匀，若有颗粒感或粗糙感，则可能含有杂质。手感检查品尝人参皂苷的味道虽然人参皂苷具有苦味，但若有过于苦涩或刺激性的味道，则可能品质有问题。此项检查因人参皂苷的苦味较重，不推荐作为常规检测手段。品尝检查（不推荐常规使用）199.2理化常数检测方法溶解度测试通过在不同溶剂中测定人参皂苷的溶解度，了解其溶解性能，有助于后续提取和纯化工艺的优化。溶解速度测定测定人参皂苷在不同条件下的溶解速度，为制剂的制备提供参考。溶解性熔点热稳定性考察通过加热实验，观察人参皂苷在不同温度下的稳定性，为其储存和使用提供指导。熔点测定利用熔点仪测定人参皂苷的熔点，以判断其纯度及鉴定其种类。旋光度测定利用旋光仪测定人参皂苷的旋光度，进一步验证其结构和纯度。比旋光度计算通过旋光度测定值，计算人参皂苷的比旋光度，为其质量控制提供依据。旋光度使用折射仪测定人参皂苷的折射率，有助于了解其光学性质。折射率测定研究不同溶剂对人参皂苷折射率的影响，为其在实际应用中的选择提供参考。溶剂影响考察折射率209.3定性检测方法薄层色谱法操作步骤供试品溶液与对照品溶液同时点于同一硅胶G薄层板上，以特定比例的有机溶剂为展开剂展开，取出晾干后喷以10%硫酸乙醇溶液，加热显色。结果判断在日光及紫外光灯（365nm）下检视，根据供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，是否显相同颜色的斑点或荧光斑点进行鉴别。原理利用各成分随展开剂在薄层板上展开的速率不同，从而分离各种成分，达到定性的目的。030201液相色谱法结果判断通过比较供试品溶液与对照品溶液的色谱图，根据保留时间和峰形进行鉴别。操作步骤按照规定的色谱条件，如色谱柱、流动相、流速、检测波长等，进行液相色谱分析。原理利用液相色谱技术分离和分析人参皂苷单体。利用质谱技术对人参皂苷单体进行分子量和结构分析。原理将供试品进行质谱分析，获得质谱图。操作步骤通过对比供试品质谱图与已知人参皂苷单体的质谱图，根据分子量、碎片峰等信息进行鉴别。结果判断质谱法红外光谱法利用红外光谱技术对人参皂苷单体进行结构分析，通过对比供试品与对照品的红外光谱图进行鉴别。核磁共振法利用核磁共振技术对人参皂苷单体进行结构确证，该方法具有较高的准确性和灵敏度，但成本较高。其他定性方法219.4定量检测方法原理利用不同物质在固定相和移动相之间分配平衡的差异，将混合物中的各组分分离开来。操作步骤精密称取样品，制备供试品溶液；按照标准曲线制备方法，制备不同浓度的对照品溶液；将供试品溶液和对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图；根据色谱峰面积或峰高，计算样品中各组分含量。优点分离效果好，灵敏度高，可同时测定多种成分。高效液相色谱法原理利用物质对紫外-可见光的吸收特性，对物质进行定性和定量分析。紫外-可见分光光度法操作步骤精密称取样品，制备供试品溶液；按照标准曲线制备方法，制备不同浓度的对照品溶液；在选定波长下，分别测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度；根据吸光度值，计算样品中各组分含量。优点操作简便，设备成本较低，适用于大批量样品的快速测定。但需注意消除干扰因素，提高测定准确性。样品制备需确保样品制备过程中无损失、无污染，以保证测定结果的准确性。仪器校准操作规范定量检测方法的注意事项定期对仪器进行校准和维护，确保仪器处于良好状态，提高测定结果的可靠性。操作人员需熟练掌握定量检测方法，遵循操作规范，避免人为误差的产生。同时，需做好实验记录和数据整理工作，以便后续数据分析和结果比对。22附录A(资料性)人参单体皂苷13C-NMR数据人参皂苷在13C-NMR谱图上具有特定的化学位移，这些特征峰可以用于确定人参皂苷的存在和结构。特征峰不同种类