临床常用免疫学检查医学知识培训专家讲座

临床惯用免疫学检验苏大附二院检验科冯萍临床常用免疫学检查医学知识培训第1页掌握：免疫球蛋白、补体临床意义病毒性肝炎血清标识物检测肿瘤标识物检测熟悉：感染免疫检验本身抗体检测临床常用免疫学检查医学知识培训第2页第一节体液免疫检验临床常用免疫学检查医学知识培训第3页一、血清免疫球蛋白检测

免疫球蛋白是指由浆细胞所产生,含有抗体活性和(或)抗体样结构球蛋白.主要分为:IgG,IgA,IgM,IgE和IgD五类.临床常用免疫学检查医学知识培训第4页IgGIgAIgM测定IgG:含量最多或最主要Ig（75%），唯一能够经过胎盘IgIgA:约占10%，分为分泌型和血清型，在局部免疫中起主要作用IgM：分子量最大，是抗原刺激后最早出现抗体临床常用免疫学检查医学知识培训第5页临床常用免疫学检查医学知识培训第6页检测方法：免疫比浊法参考值：成人IgG：7.0～16.0g/LIgA：0.7～5.0g/LIgM：0.4～2.8g/L临床常用免疫学检查医学知识培训第7页临床常用免疫学检查医学知识培训第8页临床意义免疫球蛋白增高多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝病肝硬化、淋巴瘤和一些本身免疫性疾病，如SLE、类风湿关节炎等单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病，如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等临床常用免疫学检查医学知识培训第9页临床意义免疫球蛋白降低

常见于各类先天性免疫缺点病、重链病、轻链病、取得性免疫缺点病、肾病综合征、联合免疫缺点病及长久使用免疫抑制剂病人。

IgG下降：细菌感染IgA下降：重复呼吸道感染IgM下降：败血症临床常用免疫学检查医学知识培训第10页二、血清M蛋白检测

M蛋白或称单克隆免疫球蛋白，是一个单克隆B淋巴细胞异常增殖产生，含有相同结构和电泳迁移率免疫球蛋白分子或其分子片断，普通不含有抗体活性．

临床常用免疫学检查医学知识培训第11页

[参考值]

阴性[临床意义]见于单克隆免疫球蛋白增殖病：①MM②巨球蛋白血症③重链病(γ、α、μ重链)④轻链病(κ、λ轻链)⑤半分子病：IgA、IgG型⑥恶性淋巴瘤⑦良性M蛋白血症临床常用免疫学检查医学知识培训第12页临床常用免疫学检查医学知识培训第13页三、血清补体检测

补体(complement,C)是一组含有酶原活性糖蛋白,共有20余种组分,含有溶细胞、调理作用、中和与溶解病毒和炎症介质、去除免疫复合物等作用。是抗体发挥溶细胞作用必要补充条件，故称为补体。按功效分为经典路径、旁路激活路径、膜攻击组分和调整分子4种。临床常用免疫学检查医学知识培训第14页

总补体溶血活性检测（CH50）抗原:绵羊红细胞+抗体:兔抗羊红细胞抗体(溶血素)+补体溶血100806040201234血清(ml)溶血%溶血程度与补体含量关系临床常用免疫学检查医学知识培训第15页[参考值]试管法:50-100u/ml[临床意义]主要反应补体传统路径活化活性程度.CH50增高:见于急性炎症、组织损伤（风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、多发性关节炎、伤寒）和一些肿瘤。临床常用免疫学检查医学知识培训第16页CH50降低：更有意义。见于肾小球肾炎、本身免疫性疾病（SLE、RA）、感染性心内膜炎、病毒性肝炎、慢性肝病和遗传性血管神经水肿。临床常用免疫学检查医学知识培训第17页在患SLE、RA等本身免疫病时，血清补体水平随病情发生改变。细菌感染，尤其是革兰阴性细菌感染时，常因补体旁路路径活化过分引发血清补体水平降低。心肌梗塞、甲状腺炎、大叶性肺炎、糖尿病、妊娠等情况下血清补体水日常升高。临床常用免疫学检查医学知识培训第18页补体C3检测

C3是补体系统中含量最多物质，主要由巨噬细胞和肝脏合成，在C3转化酶作用下，裂解成C3a与C3b,在传统路径和旁路途经中发挥主要作用。临床常用免疫学检查医学知识培训第19页[参考值]成人:0.82～1.70g/L[临床意义]

增高：急性炎症、传染病早期、肿瘤、排斥反应。降低：①消耗增多：肾炎、活动性SLE、RA。②合成不足：肝病。③大量丧失：肾病综合症、大面积烧伤等。临床常用免疫学检查医学知识培训第20页补体C4检测

C4由肝脏、巨噬细胞合成，为C1s底物，参加经典激活路径，在补体活化、促进吞噬、预防免疫复合物从容和中和病毒等方面发挥作用。

临床常用免疫学检查医学知识培训第21页

[参考值]成人：0.15～0.49g/L[临床意义]

增高:组织损伤性疾病.

降低:狼疮性肾炎、SLE、本身免疫性肝炎、Ⅰ型糖尿病、胰腺癌、多发性硬化症、RA、IgA型肾炎、遗传性

IgA缺乏症。临床常用免疫学检查医学知识培训第22页第二节细胞免疫检验

人淋巴细胞可分为：T、B、NK等细胞群他们有不一样表面标志和功效。T、B细胞还分为不一样亚型。临床常用免疫学检查医学知识培训第23页一、淋巴细胞表面标志物检测E玫瑰花形成试验：T细胞表面有绵羊红细胞受体，与SRBC结合形成花结样细胞，可用于T淋巴细胞计数。分化抗原测定：荧光标识抗体与T细胞反应，用荧光显微镜或流式细胞仪计数。临床常用免疫学检查医学知识培训第24页临床意义降低：见于免疫缺点疾病，如恶性肿瘤、免疫性疾病、一些病毒感染、大面积烧伤、多发性神经炎、淋巴增殖疾病。升高：见于甲亢、甲状腺炎、重症肌无力、慢性活动肝炎等。临床常用免疫学检查医学知识培训第25页T细胞亚群检测CD3代表总T淋巴细胞CD4是辅助、诱导T细胞标志CD8是抑制、杀伤性T细胞标志应用单抗和荧光标识二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD百分率。CD3CD8CD3CD4临床常用免疫学检查医学知识培训第26页参考值

免疫荧光法（IFA）：CD3

为63.1%±10.8%；CD4

为42.8%±9.5%；CD8为19.6%±5.9%；CD4/CD8为（2.2±0.7）/1。临床常用免疫学检查医学知识培训第27页流式细胞术：CD3

61%～85%；CD4

28%～58%；CD8

19%～48%；CD4/CD8

0.9～2.0/1临床常用免疫学检查医学知识培训第28页

①CD3下降:本身免疫性疾病、免疫缺点病、放疗、化疗后、肾上腺素治疗后②CD4下降:恶性肿瘤、免疫缺点病、免疫抑制剂使用、病毒感染、严重创伤、大手术③CD8下降：本身免疫性疾病、变态反应疾病临床意义临床常用免疫学检查医学知识培训第29页④CD4/CD8增高：本身免疫性疾病、恶性肿瘤、病毒感染、变态反应⑤CD4/CD8下降：HIV（<0.5)、传单、巨细胞病毒感染等⑥器官移植排斥反应监测:升高预示可能发生排斥发应;连续下降提醒感染发生,<0.2必须停顿使用免疫抑制剂。临床常用免疫学检查医学知识培训第30页B淋巴细胞表面标志测定膜表面免疫球蛋白(SmIg)测定：升高与淋巴细胞恶性增殖相关，降低与体液免疫缺点相关分化抗原测定：CD19为最主要B淋巴细胞标识分子，升高主要见于淋巴系统恶性肿瘤临床常用免疫学检查医学知识培训第31页二、淋巴细胞功效检测T细胞转化试验原理：在体外培养时，T细胞在刺激物作用下，转化为淋巴母细胞，部分发生有丝分裂，计数淋巴细胞及转化母细胞数，求出转换百分数。意义：判断机体细胞免疫功效水平、预计疾病疗效和预后。临床常用免疫学检查医学知识培训第32页1.形态法2.H-TdR掺入法3.MTT法临床常用免疫学检查医学知识培训第33页混合淋巴细胞反应

原理：两个无关个体淋巴细胞混合培养时，双方淋巴细胞会以对方为抗原发生反应，T淋巴细胞发生转化意义：反应机体整体细胞免疫功效水平、用于HLA细胞学分型临床常用免疫学检查医学知识培训第34页NK细胞活性测定能直接杀伤效应细胞，含有抗肿瘤、抗感染和免疫调整等功效，亦参加移植物排斥反应、本身免疫病和超敏反应发生临床常用免疫学检查医学知识培训第35页方法：乳酸脱氢酶释放法、51Cr释放法、流式细胞术意义：肿瘤疗效观察与预后、免疫调整功效临床常用免疫学检查医学知识培训第36页第三节、病毒性肝炎血清

标志物检测临床常用免疫学检查医学知识培训第37页临床常用免疫学检查医学知识培训第38页临床常用免疫学检查医学知识培训第39页甲型肝炎病毒标志物检测甲型肝炎病毒抗原和RNA检测[参考值]均阴性[临床意义]①HAVAg阳性:HAVAg在发病前两周可从粪便中排出.②HAV-RNA阳性:早期诊疗及特异性诊疗。在病人粪便中检出表明病人急性感染,且病人及其排泄物皆为传染原。临床常用免疫学检查医学知识培训第40页甲型肝炎病毒抗体检测机体可产生IgM,IgG,IgA,HAV-IgM是病毒衣蛋白抗体,HAV-IgA是肠道粘膜分泌局部抗体,HAV-IgG可长久存在.[参考值]均为阴性.临床常用免疫学检查医学知识培训第41页①抗HAV-IgM阳性:是机体早期诊疗指标,说明机体正处于感染期,是感染特异性指标。②抗HAV-IgA阳性:早期和急性期在粪便中测得,是早期诊疗指标之一。③抗HAV-IgG阳性:阳性提醒既往感染,可作为流行病学调查指标。临床意义临床常用免疫学检查医学知识培训第42页乙型肝炎病毒标志物检测TheinfectiousvirioniscalledtheDANEparticle.临床常用免疫学检查医学知识培训第43页临床常用免疫学检查医学知识培训第44页HBsAg:含有抗原性,无传染性[参考值]阴性[临床意义]1.HBsAg为乙肝患者首先出现病毒标志物,可作为乙肝早期诊疗和普查项目。在急性肝炎潜伏期即可阳性,而临床表现及肝功异常要在4周后才出现,乙肝发病时HBsAg达高峰。是诊疗乙肝最惯用指标。临床常用免疫学检查医学知识培训第45页2.3个月后不转阴,变为慢性:慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌。3.慢性HBsAg携带者。临床常用免疫学检查医学知识培训第46页HBsAb:针对HBsAg产生,有一定中和作用,阳性表明机体有一定免疫力。[参考值]阴性[临床意义]①阳性提醒急性感染后康复,在发病后转阳或效价升高有意义.普通3-6月后出现,可连续多年。②判断疫苗质量最主要指标。③接收HBsAb阳性血受血者,可出现短暂阳性。临床常用免疫学检查医学知识培训第47页HBeAg:关键颗粒可溶性蛋白,含有抗原性。[参考值]阴性[临床意义]

①HBeAg阳性是乙肝传染性标志物,含有传染性,病人处于活动期.HBeAg与DNA复制成正比,也和肝损成正比。②母婴传输。③判断急性乙肝预后。临床常用免疫学检查医学知识培训第48页HBeAb:比HBsAb转阳要早.[参考值]阴性[临场意义]①急性肝炎患者HBeAg转阴,HBeAb出现,认为病情好转,预后良好,病毒复制水平下降,传染性降低,但并非无传染性。②潜在HBeAb阳性可能是慢性迁延和恶性变信号。临床常用免疫学检查医学知识培训第49页HBcAg:存在于Dane颗粒关键,是一个关键蛋白,被HBsAg包裹,普通测不出来。[参考值]阴性[临床意义]乙肝传染性活动性病变标志:

HBsAg、HBeAg和HBcAb等指标是体内存在乙肝病毒间接标志，而HBcAg是直接标志，与HBVDNA呈正相关，可反应HBV活动性复制程度。临床常用免疫学检查医学知识培训第50页HBcAb:有IgG、IgM、IgA三种。[参考值]阴性[临床意义]

1HBcAb总抗体：主要反应IgG。①HBV感染指标②乙肝急性期辅助诊疗：“窗口期”③流行病学调查指标④献血员筛选⑤观察疫苗安全性临床常用免疫学检查医学知识培训第51页2HBcAb-IgM

①急性乙肝诊疗:感染早期HBcAb-IgM上升,数月后不论HBsAg是否消失,HBcAb-IgM都稳定。

HBsAg阴性急性感染者HBcAb-IgM阳性且高滴度,也可诊疗。临床常用免疫学检查医学知识培训第52页②判断病毒复制指标:有利于区分慢活肝或非活动性肝炎,慢活肝HBcAb-IgM阳性，低度低。③有利于判别近期感染或即往感染临床常用免疫学检查医学知识培训第53页3HBcAb-IgG①流行病学调查②有利于区分慢活肝或非活动性肝炎:尤其是急性乙肝和乙肝携带者急性发作临床常用免疫学检查医学知识培训第54页

BragHBsAbHBeAgHBeAbHBcAbDiagnosis1+-+--earlyHBVinfection2+-+-+acuteHBVinfection(highinfectivity)3+--++HBVinfectione-antibody-conversion(lowinfectivity)4---++convalescentwindowstage5-+-++earlyconvalescentstage6----+

acuteorchronicHBVinfection7-+---vaccination

临床常用免疫学检查医学知识培训第55页HBV-DNA:[参考值]阴性[临床意义]

①乙肝直接诊疗依据②母婴垂直传输临床常用免疫学检查医学知识培训第56页丙型肝炎病毒标志物检测HCV-RNA[参考值]阴性[临床意义]

①早期病原学诊疗②判断预后临床常用免疫学检查医学知识培训第57页HCV-IgM

[参考值]阴性[临床意义]急性丙肝患者4周后阳性,6个月内治愈转阴,不然转变为慢性。临床常用免疫学检查医学知识培训第58页HCV-IgG:出现慢,2-6月后阳性[参考值]阴性[临床意义]①抗HCV-IgG阳性表明已经有HCV②献血员筛选

临床常用免疫学检查医学知识培训第59页第四节、感染免疫检验临床常用免疫学检查医学知识培训第60页抗链球菌溶血素o测定(ASO)[参考值]乳胶凝集法<500U[临床意义]

增高：A族溶血性链球菌感染所引发疾病：风湿热(风湿性关节炎、风湿性心肌炎)，急性上呼吸道感染(扁桃体炎)，急性肾小球肾炎等。临床常用免疫学检查医学知识培训第61页临床常用免疫学检查医学知识培训第62页伤寒和副伤寒沙门氏菌检测肥达氏反应(Widal)[参考值]

o凝集效价<1:80伤寒H凝集效价<1:160,副伤寒A,B,C凝集效价<1:160

临床常用免疫学检查医学知识培训第63页[临床意义]1伤寒:O>1:80,H>1:1602副伤寒甲:O>1:80,A>1:160乙:O>1:80,B>1:160丙:O>1:80,C>1:1603单O升高:感染早期或其它沙门氏菌与O抗原交叉反应4单H升高:预防接种或非特异性反应临床常用免疫学检查医学知识培训第64页C反应蛋白测定(C-reactiveprotein,CRP)[参考值]免疫比浊法:<10mg/L[临床意义]

1组织损伤:大手术,严重创伤,烧伤,心梗2细菌感染,病毒感染升高不显著3风湿热活动期4恶性肿瘤,器官移植后排斥反应临床常用免疫学检查医学知识培训第65页TORCH感染免疫检测TO：toxoplasmagondii,弓形虫R：rubellavirus,风疹病毒C：cytomegalovirus,巨细胞病毒H：herpessimplexvirus,单纯疱疹病毒孕妇感染后可经过胎盘传染给胎儿，造成流产、死胎、早产、先天畸形和智力障碍，已被作为孕期检验常规项目。临床常用免疫学检查医学知识培训第66页第五节、肿瘤标志物检测

肿瘤标志物(tumormarker):肿瘤在发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身合成、释放或机体对肿瘤反应而产生一个物质。反应细胞恶变各阶段表型及基因特征性。临床常用免疫学检查医学知识培训第67页甲种胎儿蛋白（AFP）：早期胎儿肝脏合成，出生后受抑制。当肝脏细胞或生殖腺胚胎组织恶变时显著增高。[参考值]定性:阴性，定量:<20ug/L

临床常用免疫学检查医学知识培训第68页[临床意义]①原发性肝癌诊疗与预后:>300ug/L②生殖腺胚胎癌中利用:在睾丸癌、卵巢癌、畸胎癌诊疗、疗效观察和预后判断中都有意义。③其它：判别妊娠和绒毛癌；在胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、胎儿先天性开放性神经管畸形，病毒性肝炎、肝硬化。临床常用免疫学检查医学知识培训第69页癌胚抗原（CEA）：胎儿早期消化管和一些组织均可合成，孕6个月后下降，出生后极低。[参考值]<15ug/l[临床意义]

①由内胚层分化来恶性肿瘤：尤其是消化道腺体肿瘤检出率较高，尤其是结肠癌；②一些良性肿瘤:直肠息肉轻度一过性增高,结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病、肺气肿、支气管哮喘；③其它体液：良性胸腹水CEA<血清胃液CEA增高，且先于血清对诊疗胃癌有一定价值。临床常用免疫学检查医学知识培训第70页癌抗原125（CA-125)

属于糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于卵巢肿瘤上皮细胞。[临床意义]①卵巢癌诊疗、疗效观察、判断复发、有主要意义。②妇科恶性肿瘤：卵巢上皮细胞肿瘤、透明细胞癌、生殖细胞肿瘤、宫颈癌中均升高。③其它：肝癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、均可增高，良性卵巢肿瘤、子宫肌瘤也可增高。临床常用免疫学检查医学知识培训第71页前列腺特异性抗原（PSA):存在于前列腺导管上皮细胞中。可分为复合PSA（C-PSA）和游离PSA（F-PSA）[参考值]T-PSA<40ug/l，F-PSA<0.8ug/L,F-PSA/T-PSA>0.25[临床意义]有器官特异性，无肿瘤特异性①前列腺癌筛选：T-PSA增高,F-PSA/T-PSA<10%②前列腺炎、单纯前列腺肥大可轻度升高。临床常用免疫学检查医学知识培训第72页

f-PSA/PSA

probabilityofprostatecancer0-10%56%10-15%28%15-20%20%20-25% 16%>25% 8%>50% 0%临床常用免疫学检查医学知识培训第73页临床常用免疫学检查医学知识培训第74页第六节、本身抗体检验本身免疫性疾病（AID）：一些原因减弱或破坏健康人本身免疫耐受，免疫系统对本身组织或成份产生免疫应答，称本身免疫。因为本身免疫而产生疾病称本身免疫病。临床常用免疫学检查医学知识培训第75页本身抗体检验类风湿因子（RF）：靶抗原为变性IgGFc部分，有IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五种类型。90%RA患者呈阳性，IgA-RF与骨质破坏相关，早期升高提醒病情严重，预后不良。IgE-RF升高时已属病情晚期。

RF无严格特异性，不是RA诊疗惟一标准临床常用免疫学检查医学知识培训第76页不一样疾病时RF检出率疾病阳性率%

类风湿性关节炎79

干燥综合征95SLE30

硬皮病80

皮肌炎80

混合结缔组织病20

临床常用免疫学检查医学知识培训第77页抗核抗体（ANA）：ANA是以本身真核细胞各种细胞核成份作靶抗原一组本身抗体总称，ANA性质主要是IgG,

ANA无种属和器官特异性可与全部动物细胞核发生反应。临床常用免疫学检查医学知识培训第78页临床常用免疫学检查医学知识培训第79页可提取性核抗原性多肽抗体谱测定（ENA）：包含Sm、RNP、Jo-1、Scl-70、SSA/Ro、SSB/La等抗DNA抗体：抗ds-DN