第三章 生药的鉴定课件_第1页
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文档简介

第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定Title生药的性状鉴定Title生药的显微鉴定重点Title生药的指纹图谱鉴定难点Title生药的理化鉴定Title生药的显微鉴定第三章生药的鉴定第一节生药鉴定的意义

生药鉴定(indentificationofcrudedrug):是综合利用传统的和现代的检测手段,依据国家药典、有关政策法规及有关专著、资料对生药作真实性、纯度及品质优良度的评价,最终达到确保生药的真实性、安全性和有效性。第三章生药的鉴定

生药鉴定的目的:1.发掘中医药学遗产,整理中药品种。尽量做到一药一名,互不混淆,保证生药品种的真实性、疗效和用药安全。2.制订生药质量标准,促进生药标准化。3.寻找和利用新药资源,发展中药事业。八个字——“鉴别真伪,保质寻新”。第三章生药的鉴定

1.生药的同名异物、同物异名现象普遍存在,严重影响生药的质量。(1)同名异物:它是指一种中药名称下有多种不同来源的植物(或动物)作相同的药物使用.如防已的商品药材多达10余种:粉防己(防己科粉防己的根);(又称汉防已)木防己(防己科植物木防己的根)广防己

(马兜铃科广防己的根)川防己

(马兜铃科植物川南马兜铃)第三章生药的鉴定[主要成分]防已\川乌(制)\白术\茯苓\肉桂\党参\甘草。[主治]风寒湿痹、关节疼痛,用于风寒麻痹,关节疼痛。没有注明是哪种防已,是不规范的!

第三章生药的鉴定(2)同物异名:批同一药用材料在不同地区称呼不同的名字,作不同的中药使用.虎杖(蓼科虎杖的根和根茎)又叫:大虫杖、苦杖、酸杖、斑杖、苦杖根、杜牛膝、酸桶笋、庄根、酸杆、斑根、黄药子、土地榆、酸通、雌黄连、蛇总管、大活血、紫金龙、酸汤杆、黄地榆、号筒草、斑龙紫、红贯脚、阴阳莲、活血龙、猴竹根、金锁王、大叶蛇总管、九龙根、山茄子、斑草、搬倒甑、九股牛、大接骨、老君丹.约有40多种不同的名称.(血瘀经闭,痛经者,可单用煎服;或与当归、川芎等配伍)

第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定

2.多基源生药品种的存在,严重影响生药的质量。我国中药现已达12807种,其中药用植物11146种(占87%),药用动物1581种(占12%),药用矿物80种(1%)。据统计《中国药典》(2005年版)收载的551种中药材中多基源生药有155种。其质量差异较大。如:关木通第三章生药的鉴定

关本通关木通:马兜玲科白木通:毛茛科木通:木通科龙胆泄肝丸里的所采用的木通是木通科的三叶木通或川木通,而非马兜玲科的.如:红花如:人参八个字——“鉴别真伪,保质寻新”。第三章生药的鉴定第二节生药鉴定的一般程序与方法

生药鉴定,一般包括原植(动)物的确认,以及性状、显微、理化鉴定等项目。包括以下内容:1.生药的取样;2.生药的常规检查;

第三章生药的鉴定1.生药的取样:(1)取样前的检查:取样前,应注意品名、产地、规格等级及包件式样是否一致,检查包装的完整性、清洁程度以及有无水迹、霉变或其他物质污染等,详细记录。凡有异常情况的包件,应单独检验。(2)从同批生药包件中抽取检定用样品原则如下:生药总包件数在100件以下的,取样5件;100~1000件按5%取样:超过1000件的,超过部分按1%取样;不足5件的逐件取样;对于贵重生药,不论包件多少均逐件取样。

第三章生药的鉴定1.生药的取样:(3)对破碎的、粉末状的或大小在1cm以下的生药,可用采样器(探子)抽取样品:每一包件至少在不同部位抽取2~3份样品,包件少的抽取总量应不少于实验用量的3倍;包件多的,每一包件取样量一般规定:一般生药100~500g;粉末状生药25g;贵重生药5~10g;个体大的生药,根据实际情况抽取代表性的样品。如个体较大时,可在包件不同部位(包件大的应从10cm以下的深处)分别抽取。第三章生药的鉴定1.生药的取样:(4)将所取样品混和拌匀,即为总样品。对个体较小的生药,应摊成正方形,依对角线划“×”字,使分为四等分,取用对角两份;再如上操作,反复数次至最后剩余的量足够完成必要的试验以及留样数为止,此为平均样品。个体大的生药,可用其他适当方法取平均样品。平均样品的量一般不得少于作真实性、纯度和品质优良等实验所需用量的3倍数,即1/3供实验室分析用,另1/3供复核用,其余1/3则为留样保存,保存期至少一年。

第三章生药的鉴定2.生药的常规检测:

(1)杂质的检测(2)水分的测定;(3)灰分的测定;(4)浸出物的测定第三章生药的鉴定(1)杂质的检测:生药中混杂的杂质,系指来源与规定相同,但其性状或部位与规定不符;来源与规定不同的物质;无机杂质如砂石、泥块、尘土等。检查方法可取规定量的样品,摊开,用肉眼或扩大镜(5~10倍)观察,将杂质拣出,如其中有可以筛分的杂质,则通过适当的筛,将杂质分出。然后将各类杂质分别称重,计算其在样品中的百分数。

第三章生药的鉴定(2)水分测定:水分测定的方法常用的有烘干法和甲苯法。

a.烘干法:

适用于不含或少含挥发性成分的生药。取样品2~5g,平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中,厚度不超过5mm,疏松样品不超过10mm,精密称定,打开瓶盖在100~105℃干燥5小时,将瓶盖盖好,移置干燥器中,冷却30分钟,精密称定重量,再在上述温度干燥1小时,冷却,称重,至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量,计算供试品中含有水分的百分数。

第三章生药的鉴定b.甲苯法:

适用于含挥发性成分的生药。仪器装置如图。c.减压干燥法:适用于含有挥发性成分的贵重药品。

第三章生药的鉴定(3)灰分的测定:

生药中灰分的来源,包括生药本身经过灰化后遗留的不挥发性无机盐,以及生药表面附着的不挥发性无机盐类,即总灰分。同一种生药,在无外来掺杂物时,一般都有一定的总灰分含量范围。规定生药的总灰分限度,对于保证生药的品质和纯净程度,有一定的意义。测定的方法有:常用的方法有总灰分测定法和酸不溶性灰分测定法。

第三章生药的鉴定(4)浸出物的测定:

对于有效成分尚不明确或尚无精确定量方法的生药,一般可根据已知成分的溶解性质,选用水或其它适当溶剂为溶媒,测定一药中可溶性物质的含量,以示生药的品质。通常选用水,一定浓度的乙醇(或甲醇)、乙醚等有机溶剂作浸出物测定。a.水溶性浸出物测定:一般采用冷浸法和热浸法;b.醇溶性浸出物测定:取适当浓度的乙醇或甲醇代替水为溶媒;c.醚溶性浸出物测定:用乙醚作溶剂.

第三章生药的鉴定(5)挥发油测定:

适用于含较多量挥发油的生药。仪器装置如图4-2。注意测定相对密度在1.0以下和1.0以上的挥发油的方法有点不相同。第三章生药的鉴定第三节生药的

原植(动)物鉴定又称分类学鉴定。应用植(动)物分类学的知识,对生药的来源进行鉴定研究,确定其正确的学名,以保证应用品种的准确无误。观察植物形态核对文献核对标本第三章生药的鉴定第四节生药的性状鉴定

性状鉴定:即通过眼观、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等十分简便的鉴定方法,是以性状,包括形性、大小、色泽、表面、质地、断面、气味等特征为依据对生药进行鉴别的方法。第三章生药的鉴定(一)形状(二)大小(三)色泽(四)表面特征(五)质地(六)断面(七)气(八)味第三章生药的鉴定

(一)形状(shape,form)

生药的形状与药用部位有关。如根类生药有圆柱形、圆锥形、纺锤形等;皮类生药有卷筒状、板片状等;种子类生药有圆球形、扁圆形等。第三章生药的鉴定老药工们常以简单、生动的语言加以概括,易懂易记:如防风的根茎部分称“蚯蚓头”“凤眼圈”;山参的主要特征被形象地描述为“芦长碗密枣核艼,紧皮细纹珍珠须”;海马的外形为“马头蛇尾瓦楞身”;第三章生药的鉴定防风的根茎部分称“蚯蚓头”“凤眼圈”第三章生药的鉴定山参的主要特征被形象地描述为“芦长碗密枣核艼,紧皮细纹珍珠须”第三章生药的鉴定海马的外形为“马头蛇尾瓦楞身第三章生药的鉴定海马的外形为“马头蛇尾瓦楞身第三章生药的鉴定在观察外形时,对皱缩的商品生药如叶和花类,鉴定时须先用热水浸泡,展平后观察;在观察某些果实种子类生药时,亦可用热水浸软,以便剥去果皮或种皮,观察内部特征。第三章生药的鉴定(二)大小(size)

生药的大小指长短、粗细、厚薄。有些很小的种子类生药,如车前子、菟丝子等,应在放大镜下测量。表示生药的大小,一般有一定的幅度。《中国药典》规定的大小幅度,系指生药的常见大小。第三章生药的鉴定(三)色泽(color)各种生药的颜色是不相同的,而同一生药的色泽变化与生药质量有关。玄参要黑,丹参要紫,茜草要红,黄连要黄。如加工条件变化、贮藏时间不同或灭菌不当等,就会改变生药的固有色泽,甚至引起内在质量的变化。第三章生药的鉴定在观察生药的色泽时,生药应干燥,并应在日光下观察。色泽的描述包括表面和断面色泽的内容。一般把质量好的色泽放在前面,二种色调组成描写的应以后一种色为主,如黄棕色,即以棕色为主。第三章生药的鉴定(四)表面特征(surfacecharacter)生药表面特征:有光滑、粗糙、皱纹、皮孔、毛茸等。(1)双子叶植物的根类生药顶部,有的带有根茎;(2)单子叶植物根茎,有的具膜质鳞叶;(3)蕨类植物的根茎,常带有叶柄残基和鳞片。第三章生药的鉴定(五)质地(texture)生药质地可分为:软硬、坚韧、疏松、致密、黏性或粉性等。形容生药质地的术语很多:如质轻而松、断面多裂隙,谓之“松泡”,如南沙参;生药富含淀粉,折断时有粉尘散落,谓之“粉性”,如山药;第三章生药的鉴定

质地柔软,含油而润泽,谓之“油润”,如当归;质地坚硬,断面半透明状或有光泽,谓之“角质”,如郁金。第三章生药的鉴定(六)断面(fracture)断面:一是指生药自然折断面,二是指用刀横切(或削)成的断面。对于根及根茎、茎和皮类生药的鉴别折断面观察很重要。如茅苍术易折断,断面放置能“起霜”(析出白毛状结晶),白术不易折断,断面放置不“起霜”;第三章生药的鉴定甘草折断时有粉尘散落(淀粉);杜仲折断时有胶丝相连;黄柏折断面,呈纤维性;苦楝皮的折断面,裂片状分层;厚朴折断面可见亮星。第三章生药的鉴定生药断面特征(cutsurfacecharacter)非常重要,可通过观察皮部与木部的比例、维管束的排列方式、射线的分布、油点的多少等特征区别易混品生药。对于横切面特征的描述,经验鉴别有很多术语,如:第三章生药的鉴定黄芪有“菊花心”;粉防已有“车轮纹”;苍术有“朱砂点”;大黄根茎可见“星点”;何首乌有“云锦纹”;松贝的“怀中抱月”;商陆有“罗盘纹”等第三章生药的鉴定黄芪有“菊花心”;第三章生药的鉴定粉防已有“车轮纹”;第三章生药的鉴定苍术“朱砂点”;第三章生药的鉴定大黄根茎可见“星点”;星点第三章生药的鉴定何首乌“云锦纹”第三章生药的鉴定商陆“罗盘纹”;第三章生药的鉴定松贝的“怀中抱月”(松贝是川贝母中品质最优的一种):指松贝表面类白色,外层两鳞片大小悬殊,大鳞片呈心脏行,小鳞片镶嵌于大鳞片之中露出部分,似新月形,故称“怀中抱月”。第三章生药的鉴定(七)气(odour)有些生药有特殊的香气或臭气,这是由于生药中含有挥发性物质的缘故,也成为鉴别该生药主要依据之一。如阿魏具有强烈持久的大蒜臭气;雄黄燃之有强烈蒜臭,并生黄白色烟气;硫黄有特异的臭气,燃烧时发出蓝色火焰,并放出刺激性二氧化硫臭气。第三章生药的鉴定(八)味(taste)

味是鉴别生药时口尝的实际滋味。生药的味与其含有的成分有关,每种生药的味感是比较固定的,生药的味感也是衡量生药品质的标准之一。三七有人参的气味,品尝之后先苦后甜;西洋参有独特的芳香气,味微甘,苦,洋参味浓;大黄嚼起来发黏,有沙粒感,唾液染成黄色;枸杞子味甜,唾液呈红黄色;哑巴吃黄连,有苦说不出”的黄连。第三章生药的鉴定如乌梅、木瓜、山楂均以味酸为好;黄连、黄柏以味越苦越好;甘草、党参以味甜为好。第三章生药的鉴定第五节生药的显微鉴定

显微鉴定(Microscopicalidentification):是利用显微镜来观察生药的组织构造、细胞形状以及内含物,描述显微特征,制定显微鉴别依据,用以鉴定生药品种和质量的重要手段之一。第三章生药的鉴定1.生药显微鉴别的一般方法显微鉴定组织鉴定:观察药材的切片或磨片,鉴别其组织特征,适合于完整的药材或粉末特征相似的同属药材的鉴别;粉末鉴定:观察药材的粉末制片或解离片鉴别其细胞分子及内含物的特征,适合于破碎、粉末状药材或中成药的鉴别。第三章生药的鉴定鉴定者:需具有植(动)物解剖的基本知识,掌握制片的基本技术。鉴定时:根据观察的对象和目的,选择具有代表性的药材,制备不同的显微制片,依法进行鉴别。第三章生药的鉴定植物性生药

根、根茎、茎藤、皮、叶等类,制作横切片观察,必要时制纵切片;果实、种子类须作横切片及纵切片观察;木类须观察横切、径向纵切及切向纵切三个面。第三章生药的鉴定鉴定叶、花、果实、种子、全草等类生药,可取叶片、萼片、花冠、果皮、种皮制表面片,以观察各部位的表面(皮)特征。也可将生药作粉末片进行观察。第三章生药的鉴定可制解离组织片,以观察某些细胞组织,如纤维、石细胞、导管等。对于中成药,可直接取目的物,选用不同试液制片,观察粉末的具有鉴别意义的组织、细胞及细胞后含物显微特征。第三章生药的鉴定切片类型横切片或纵切片切片方法徒手切片:10~20µm,最为简便、快速,较为常用。石蜡切片:便于教学用。滑走切片:有专用机器切制。冰冻切片:宜于科研,不利于教学,无法染色。第三章生药的鉴定解离组织片:可用氢氧化钾法,使细胞间质溶解,细胞分离后观察目的物。表面片:叶、花、果实、种皮等多用,可观察各部位的表皮特征。第三章生药的鉴定粉末片:水合氯醛透化片;水合氯醛不透化片;醋酸甘油片或稀甘油片或水装片。磨片:观察矿物药,相当于固定片。第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定目镜测微尺观察细胞和后含物时,常需要测量其直径、长短(以µm计),作为鉴定依据之一,测量可用目镜测微尺进行。先将目镜测微尺用载台测微尺标化,计算出每一小格的µm数,应用时将测得物的小格数,乘以每一小格的µm数,即得所欲测定物的大小。第三章生药的鉴定下面再以根与根茎类生药为例,重点介绍横切片和粉末的显微鉴定方法。第三章生药的鉴定(一)根类生药的横切片鉴定根类生药大多取自被子植物的根,包括药用为根或以根为主带有部分根茎的生药。如麦冬、人参、何首乌、牛膝、三七等。第三章生药的鉴定初生结构:由初生分生组织细胞分裂产生的细胞经生长、分化形成的结构。初生生长:由初生分生组织细胞经分裂、生长、分化形成初生结构的过程。1.根的初生构造第三章生药的鉴定双子叶植物根的初生结构1.表皮2.皮层⑴外皮层⑵皮层薄壁细胞⑶内皮层(凯氏带)

3.维管柱(中柱)⑴中柱鞘:⑵初生木质部(外始式)⑶初生韧皮部⑷薄壁细胞第三章生药的鉴定1.表皮:根最外面的一层细胞,由原表皮发育而成,细胞呈长方体(砖)形,排列紧密,外切向壁具角质膜(很薄),无气孔,有些细胞特化为根毛,其吸收作用远大于保护作用。

第三章生药的鉴定2.皮层:来源于基本分生组织。由外向内分为几层:⑴外皮层:由紧贴表皮的数层较小、排列紧密的细胞组成,并不明显区别于皮层薄壁细胞。⑵皮层薄壁细胞;⑶内皮层:第三章生药的鉴定皮层薄壁细胞:细胞大型,排列疏松,细胞间隙大,细胞圆球形,常有贮藏物质(以淀粉居多)。第三章生药的鉴定内皮层:最内方一层皮层细胞,细胞小,排列整齐,径向壁和横向壁常木质化和栓质化加厚成凯氏带(横切面上,凯氏带在相邻细胞的径向壁上呈点状,称凯氏点)。凯氏带连到质膜,使土壤溶质由皮层进入中柱要全部通过内皮层的选择透性的细胞质膜,因而可以阻止一些物质继续进入维管柱。

第三章生药的鉴定3.维管柱(中柱)来源于原形成层,位于皮层以内的中轴部分,由中柱鞘和维管组织组成,维管组织又可分为初生木质部、初生韧皮部、薄壁细胞等部分。⑴中柱鞘:薄壁细胞,具潜在分裂能力。维管形成层(部分)、木栓形成层、侧根等的发生及不定芽、乳汁管等的形成与之有关。⑵初生木质部:呈星芒状。外围原生木质部;中央部分后生木质部。这种初生木质部分子由外向内依次分化成熟的发育方式称外始式。⑶初生韧皮部:外始式,原生韧皮部在外,后生韧皮部在内。⑷薄壁细胞:初生木质部和初生韧皮部之间,将来成为形成层的部分。后生木质部原生木质部第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定单子叶植物根的初生结构

单子叶植物是须根系,由不定根组成,无次生生长,只有初生生长,不增粗。

第三章生药的鉴定1.表皮:根毛区有根毛,根毛区以上表皮脱落,由外皮层(厚壁细胞)代替其起保护作用。2.皮层:外皮层明显,有一至数层厚壁细胞组成。皮层薄壁细胞大型,疏松,间隙大,小麦中,细胞方形,辐射状成行排列;水稻中老根形成气腔,适应于湿生生长。第三章生药的鉴定2.根的次生生长与次生结构次生生长:由于侧生分生组织的活动,不断地产生次生的维管组织,使根、茎增粗的生长过程。次生结构:主要由次生成熟组织所组成的结构。一般裸子植物和木本的双子叶植物有次生生长,而单子叶植物和一年生的草本双子叶植物无次生生长。侧生分生组织有两类:维管形成层和木栓形成层。第三章生药的鉴定内皮层:五面增厚的细胞:横向壁、径向壁、内切向壁全面增厚,横切面上呈马蹄形;通道细胞:薄壁,夹于五面增厚的细胞间,与导管正对。

皮层细胞通道细胞马蹄形增厚中柱鞘初生韧皮部初生木质部内皮层第三章生药的鉴定(1)维管形成层的产生和活动

初生木质部与初生韧皮部之间的薄壁细胞初生木质部脊正对的中柱鞘细胞维管形成层片段维管形成层片段维管形成层环(波浪状→圆环)次生木质部次生韧皮部维管形成层环平周分裂外垂周分裂平周分裂内第三章生药的鉴定维管形成层除了产生次生韧皮部和次生木质部外,在正对初生木质部辐射角处,由中柱鞘发生的形成层段也分裂出呈径向排列的薄壁细胞——射线,起横向运输的作用。韧皮射线木射线形成层第三章生药的鉴定(2)木栓形成层的产生和活动

中柱鞘细胞木栓形成层木栓层栓内层木栓形成层周皮平周分裂外平周分裂内垂周分裂第三章生药的鉴定周皮木栓层木栓形成层栓内层第三章生药的鉴定维管形成层第三章生药的鉴定木质部初生木质部第三章生药的鉴定次生韧皮部韧皮纤维筛管伴胞射线第三章生药的鉴定双子叶植物根的次生结构双子叶植物的初生构造双子叶植物的次生构造第三章生药的鉴定双子叶植物根的次生结构双子叶植物的初生构造单子叶植物的初生构造第三章生药的鉴定双子叶植物根的次生结构第三章生药的鉴定双子叶植物和单子叶植物根的构造比较第三章生药的鉴定(3)

根的异常结构某些双子叶植物的根,除正常的次生构造外,还可产生一些特有的维管束,称异型维管束,并形成根的异常构造。异常构造、初生构造、次生构造也称三生构造。第三章生药的鉴定根的异常结构第三章生药的鉴定第一种类型:

当根的正常维管束形成不久,形成层往往失去分生能力,而在相当于中柱鞘部位的薄壁细胞恢复分生能力,形成新的形成层,向外分裂产生大量薄壁细胞和一圈异型的无限外韧维管束,如此反复多次,形成多圈异型维管束,其间薄壁细胞相隔,一圈套住一圈,呈同心环状排列。分2类:第三章生药的鉴定(1)不断产生的新形成层环均始终保持分生能力,并使层层同心性排列的异型维管束

不断增加而呈年轮状,如商陆的根。第三章生药的鉴定(2)不断产生的新形成层仅最外一层保持有分生能力,而内面各层环于异型维管束形成后即停止活动,如牛膝、川牛膝的根。第三章生药的鉴定第二种类型当中央较大的正常维管束形成后,皮层中部分薄壁细胞恢复分生能力,形成多个新的形成层环,产生许多单独的和复合的大小不等的异型维管束,相对于原有的形成层环而言是异心的,形成异常构造。故在横切面上可看到一些大小不等的圆圈状的花状纹理,是其鉴别的重要的特征,如何首乌的块根。第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定

2.粉末的显微鉴定粉末鉴定时,重点鉴别有鉴别特征的1)细胞后含物(淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、硅质块等);2)厚壁组织(纤维、纤维管胞、晶纤维、石细胞等);3)分泌组织(分泌细胞、分泌腔、分泌道、乳汁管等);其次鉴别表皮、下皮、根被或木栓组织、内皮层、导管及管胞。第三章生药的鉴定(二)根茎类生药根茎类生药是以植物的地下茎入药,包括根状茎(根茎)、块茎、鳞茎和球茎,如天南星、百合、大黄、土茯苓等。1.性状鉴定根茎类生药表面有节和节间,以单子叶植物的根茎为明显,节上常见有退化的鳞片状叶,有时可见叶痕和芽痕,周围或下侧有不定根或根痕。蕨类植物根茎的表面常有鳞片或鳞毛,有的周围密布整齐的叶柄基。根茎类生药的横断面,双子叶植物根茎呈放射状结构,中心有明显的髓;单子叶植物的根茎不呈放射状,内皮层环大多明显,环圈内外均散有维管束小点;蕨类植物根茎有的中心为木部,无髓,有的木部呈完整的环圈,中心有髓,有的数个分体中柱断续排列为圈状。第三章生药的鉴定2.组织构造

观察根茎类生药的组织构造,首先根据中柱、维管束的类型,区别其为双子叶植物或单子叶植物的根茎。

第三章生药的鉴定双子叶植物根茎大多有木栓组织,或有木栓石细胞(如苍术、白术);皮层中有时可见根迹维管束;中柱维管束无限外韧型,环列;中心有髓。第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定黄连第三章生药的鉴定少数种类有三生构造,髓部有异型复合维管束(如大黄)。第三章生药的鉴定掌叶大黄唐古特大黄药用大黄第三章生药的鉴定单子叶根茎的最外层多为表皮,皮层中有叶迹维管束,内皮层大多明显;中柱中散有多数有限外韧维管束,也有周木维管束(如菖蒲)。第三章生药的鉴定第三章生药的鉴定有的根茎类生药有油室(如川芎、苍术)或油细胞(如石菖蒲、香附)。单子叶植物根茎类生药颇多含草酸钙针晶束(如天南星、半夏、天麻、白及、玉竹、黄精),针晶束大多存在于粘液细胞中。此外,还应注意厚壁组织、导管以及草酸钙结晶的类型。第三章生药的鉴定3.根茎类生药粉末的观察与根类相似。注意鳞茎、块茎、球茎常含多量较大的淀粉粒,其形状、大小、脐点、层纹以及复粒、半复粒、多脐点单粒(如贝母类)等特征是鉴别的重要依据。第三章生药的鉴定传统的生药的性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别鉴别的不足:只分析生物的表现型

①特征的稳定性欠佳——这些特征均是生物的表现型,受遗传因素影响的同时,还与生物体的发育阶段及环境条件对生物体的作用有密切关系②局限性——对同属多来源生药及种内的一些变异(道地药材)、动物药等难以专属性地鉴别。第七节DNA分子标记鉴定

第三章生药的鉴定

生药DNA分子遗传标记鉴定是指通过比较生药间DNA分子遗传多样性差异来鉴别生药基源,确定其学名的方法。

DNA:脱氧核糖核酸,是染色体的主要化学成分,也是基因组成的。

DNA分子是由G、A、C、T四种碱基构成,为双螺旋结构的长链状分子,生物体特定的遗传信息便包含在特定的碱基排列顺序中,不同物种遗传上的差异表现在这4种碱基排列顺序的变化,这就是生物的遗传多样性(geneticdiversity)。第三章生药的鉴定DNA分子遗传标记技术特点(在生药鉴定中优点):①遗传稳定性——DNA分子作为遗传信息的直接载体,不受外界因素和生物体发育阶段及器官组织差异影响。②遗传多样性——DNA分子是由G、A、C、T四种碱基构成,生物体特定的遗传信息便包含在特定的碱基排列顺序中,不同物种遗传上的差异表现在这四种碱基排列顺序的变化,这就是遗传多样性。③化学稳定性——DAN分子比蛋白质、同功酶等具有较高的化学稳定性。在生物体死亡后,标本中保存下来的DNA仍能够用于DNA分子遗传标记的研究。

第三章生药的鉴定1.聚合酶链式反应(PCR)

是一种模拟自然DNA复制过程的体外酶促合成特异性核苷酸片段技术。它以待扩增的两条DNA链为摸板,由一对人工合成的寡核苷酸作为介导,通过DNA聚合酶反应,在体外进行特异DNA序列扩增。一、DNA分子遗传标记技术的方法及原理

第三章生药的鉴定1.限制性内切酶酶切片段长度多态性(RFLP):

物种的基因组DNA在限制性内切酶作用下,在特定的核苷酸顺序上切割,产生相当多的大小不等的DNA片段,用放射性同位素标记的DNA探针检测与被标记DNA相关的片段,构建多态性图谱。第三章生药的鉴定3.随机扩增多态性DNA(RAPD):

特点:①无需专门设计RAPD扩增反应的引物,也无需预知被研究的生物基因组核苷酸顺序,引物是随机合成或是任意选定的。②每个RAPD反应中,仅加单个引物,通过引物和摸板DNA链随机配对实现扩增,扩增无特异性。③退火

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