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文档简介
胚胎移植动医095班*胚胎移植胚胎移植胚胎移植概述
发展史和意义胚胎移植的原理
1.胚胎移植的生理学基础
2.胚胎移植的基本原则胚胎移植技术程序
1.供体和受体的选择
2.同期发情和超数排卵处理
3.供体母畜的配种
4.胚胎的收集
5.胚胎的检查
6.胚胎的保存与培养
7.胚胎的移植
8.供体和受体的术后观察胚胎移植的思考
*胚胎移植1.1国外胚胎移植发展史1.2国内胚胎移植发展史GeorgeWalterHeapeFHAMarshall和JohnHammondWarwick,Berry和Horlache张明觉ElwynWilledIETS20世纪70年代初郭志勤、谭丽玲等内蒙古、新疆和黑龙江、北京*胚胎移植1.3胚胎移植的意义1.3.1低产母畜得到高产后代1.3.2加速引进品种的繁殖和新品种的培育1.3.3优秀种畜遗传资源得到充分利用1.3.4加速家畜改良的进度(MOET)1.3.5增加双胎率,加速繁殖1.3.6可使优秀种畜遗传资源得到充分利用,加速育种速度和畜牧良种化进程。1.3.7可用于治疗动物和人类的不育。如:体外受精技术,特别是显微受精技术。1.3.8促进基础理论的研究1.3.9畜牧业现代化的需要,胚胎移植的经济效益*胚胎移植2.1
胚胎移植的生理学基础2.2.胚胎移植的基本原则成千上万“两同”游离无排斥联系与独立“三一致”性(属性、生理、剖位置)期限性质量*胚胎移植选择供体母畜受体母畜……同期发情处理……超数排卵供体公畜配种冲卵质量检查、培养胚胎移植妊娠检查分娩(胚胎移植的幼畜)3.胚胎移植的基本程序*胚胎移植3.1供体与受体的选择3.2同期发情和超排处理孕激素法:皮下埋植、阴道栓塞和口服前列腺素法:一次PG法和两次PG法.二者结合使用,目前被认为是控制母羊同期发情最可靠、最准确的方法。常用的超排方案:
FSH法PMSG法FSH预处理一、供、受体的主要职能供体:产生具有优良遗传特性的胚胎受体:完成繁重而漫长的妊娠和育仔的任务二、供体和受体应具备的条件同一物种发情一致遗传优势良好育种价值和繁殖机能
应营养良好、体质健壮健康无疾病繁殖机能,体质健康多对一
供体受体*胚胎移植羊同期发情——放栓供体超排处理*胚胎移植3.3供体母畜的配种3.4胚胎的收集(采胚时间)手术法非手术法术前准备输卵管冲胚(两个方向)
子宫冲胚
插冲胚管
接集卵皿
注冲卵液
钳夹子宫
扎孔
插冲卵管接集卵皿
插套管针
注冲卵液
控水绝食全身麻醉
剪毛、消毒、保定寻找子宫角镇静剂处理聚氯乙烯细棒聚氯乙烯直棒聚氯乙烯管导液管与同种优秀公牛配种或人工受精超排供体的配种次数应比自然供体多一些,每次输入的精子数也应增多。超排的受精率较自然供体低胚胎*胚胎移植供体羊胚胎收集6天收集的胚胎(未拣)*胚胎移植3.5胚胎的检查根据透明带、胚胎细胞、发育阶段及细胞在透明带中的比例确定胚胎级别:
胚胎的发育、形态、大小胚内细胞的变化、胞质、空泡、脱出、碎片透明带完整性主要分:A、B、C、D四级*胚胎移植3.6胚胎保存冷冻保存的方法
胚胎移植不受时间和地点的限制,提高了胚胎移植技术的效率;长期保存优良母牛基因最可靠的技术措施;便于国际间交流;替代种畜引种。冷冻保存的意义⑴常规冷冻法:“植冰”后控制降温速度,避免过快以免胚胎内部形成大块冰晶;避免过慢,以免胚胎过分脱水而产生溶质效应。⑵超速冷冻法:非渗透性防冻剂对胚胎进行冻前脱水处理,将胚胎平衡一段时间,而后投入液氮保存。⑶玻璃化冷冻法:应用高浓度防冻剂,使胚胎内外液的同源晶核形成温度与玻璃态转化温度基本接近,控制防冻剂与胚胎的平衡时间和温度,使防冻剂对胚胎毒性降低到最低程度。胚胎内外液能迅速转化形成玻璃体,直接投入液氮保存。*胚胎移植3.7胚胎的移植手术法非手术法可将人工授精枪通过子宫颈,把胚胎注入子宫角内,也可绕过子宫颈而通过阴道穹窿移胚通过阴道穹窿移胚,避免刺激子宫颈,引起子宫收缩而使胚胎被排出*胚胎移植腹中线切口,暴露子宫子宫角下部用镊子段子一小切口用钝头针扩大切口导管插入子宫腔注入空气,封闭末端注入冲胚液宫管结合部插入针头注入冲胚液收集检查胚胎手术法移植过程*胚胎移植①将胚胎吸入0.25ml细管中,位于两个气泡之间。②将细管装入卡苏枪,枪外由一塑料套保护。③将受体保定好,进行硬膜外麻醉,由直肠触摸黄体位于何侧。④将胚胎送到黄体同侧的子宫角中部。*胚胎移植3.8供受体的护理与观察(1)术后供受体的抗炎处理(2)健康状况检查(3)返情状况的检查(4)妊娠检查及妊娠确定4胚胎移植的思考影响胚胎移植的主要因素(关键)(1)超排技术(2)移植胚胎的质量(3)供体、胚胎与受体的同期化程度(5)操作技术(4)移植胚胎的数目(6)其它*胚胎移植胚胎移植目前存在的问题(1)胚胎来源限制了ET(embryotransfer)的效率和实际应用(2)缺乏熟练操作技术人员及我国优秀畜种比例低(3)ET费用高,人力和时间耗费大,条件严格制约了其推广应用(4)胚胎冷冻保存任存在很多问题(5)胚胎采集和移植主要采用手术法的畜禽易造成粘连
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