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文档简介

2鸡球虫种类ITS1-PCR鉴定技术GB/T6682-2008,分析实验室用水规格和试验方法.PCR:聚合酶链式反应(PolymeraseITS:内转录间隔区(InternalTranscribedSpacer)DNA:脱氧核糖核酸(DeoxyribonucleicaciTAE:三羟甲基氨基甲烷-乙酸-乙二胺四乙酸(Tbp:碱基对(Basepair)PCR仪、4℃高速低温离心机、电泳槽,微量移液器、凝胶成像系统异硫氰酸胍、苯酚、氯仿、异戊醇、无水乙醇、70%酒精DNAMarkerDL-2000、2×TaqDNA聚合酶Mix、琼脂糖、饱和食盐水(1000m取2000个左右待检鸡球虫孢子化卵囊置于2mL离心管中,加入直径为1mm的3),倒混匀,12000g离心10min,弃上清;向沉淀加入70%酒上清;室温干燥后,加入50µL双蒸水溶鸡球虫的阳性对照样品和阴性对照样品与待检样品同步、相同方法处理,进行DNA抽提。另外,),凝胶电泳,电泳程序为恒压120V,时间30min,电泳结束后将凝胶置于凝胶成像系统下成像,观7.2在实验成立的前提下,被检样品出现××种球虫的目的条带,判为鸡球虫××种7.3在实验成立的前提下,被检样品未出现××种球虫的目的条带,判为鸡球虫××种阴4EimeriaacervulinaEimeriabrunettiEimeriamaximaEimeriamitis上游bcEimerianecatrixEimeriapraecoxAATAAATAGCGCAAAATTAAGEimeriatenella5[1]GB/T1.1-2020,标准化工作导则第1部分:标准化文[2]GB/T6682-2008,分析实验室用水规格和试验方法.[3]SN/T4881—2017,鸡球虫病检疫技术规范.[4]LewAE,AndersonGR,Minchinternaltranscribedspacer1(ITS-1)sequencesofAustralianisolatesofEimeriaspeciesfromchickens[J].[5]HaugA,TheboP,MattssonJG.AsimplifiedprotocolformolecularidentificationofEimeriasp

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