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文档简介
放射免疫技术概述放射性核素作为示踪物常用的放射性核素：
125I、131I→γ射线，晶体闪烁计数仪
3H→β射线，液体闪烁计数仪方法学类型：放射免疫分析（RIA）免疫放射分析（IRMA）实验目的本次实验以放射免疫分析测定总三碘甲状腺原氨酸（TT3）为例，来验证放射免疫技术的基本原理，并通过实验熟悉其操作过程及临床应用实验原理*AgAb与样本中待测Ag的含量在一定范围内呈负相关，根据标准曲线可推算标本中待测抗原的含量注：*放射性物质竞争实验材料试剂：
1.125I-T32.抗T3微球
3.T3标准品（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0ng/mL）
4.质控血清（高值2.42～5.02ng/ml，低值0.32～0.66ng/ml）器材：试管、加样枪、加样头、水浴箱、晶体闪烁计数仪实验步骤1.试管编号总T管编号为T6个标准管编号分别为B0，1，2，3，4，5质控管编号为高，低注：每个编号均做复管2.加样：按照表格加试剂（μl）和操作T标准B0标准1-5高低T3标准品—5050——质控品———5050125I-T3200200200200200抗T3微球—20020020020037℃温育60min除T管外，各管离心3000rpm×15min，弃上清，测定各管沉淀部分的放射性计数率所加物试管编号实验结果实验数据NO.TIME（s）DOSECOUNTSCPMTOTLE3036007200B0300240048001300.545002301.040003302.032004304.016005308.0400标准曲线（log-logit数据转化）LogitB/B0lgTT3ng/ml0logitB/B0=(B/B0)/(1－B/B0)计算高值质控血清和低值质控血清的TT3浓度NO.TIMECOUNTSCPMConc.130???230???临床意义TT3增高：①TT3是诊断甲状腺功能亢进（甲亢）最灵敏的指标，甲亢时TT3可高出正常值4倍。②同时TT3是诊断T3型甲亢的特异性指标。TT3降低：常见于甲状腺功能减低（甲减）。低T3综合征，虽有T3降低，但无甲减症状，可见于恶性贫血、急性心肌梗死、肝硬化、尿毒症等急重病和慢性消耗性疾病。注意事项加样的顺序要严格按照操作顺序表。
加抗体微球前，要将试剂充分混匀。加125I-T3和抗T3微球后，都要将试管中的液体摇匀。离心后将上清直接倒掉后，马上将试管倒扣在吸水纸上，静置5min，不能拍打试管。操作时注意自我防护，放射性废弃物要按规定方法处理。方法学评价高灵敏度（pg/ml）放射性污染标记物半衰期短导致试剂有效期短标记物稳定性差，导致试剂盒批间、批内的变异较大，必须每次制
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