基因操作技术智慧树知到期末考试答案章节答案2024年黑龙江农业工程职业学院（松北校区）

基因操作技术智慧树知到期末考试答案+章节答案2024年黑龙江农业工程职业学院（松北校区）在DNA分子克隆中，通常将导入外源DNA分子后能稳定存在的受体细胞称为转化子。（）

答案:对净化台内可以存放不必要的物品，以保持洁净空气流流型不受干扰。（）

答案:错干扰素的作用具有广谱性，即抗病毒蛋白是一类酶类，作用无特异性。对多数病毒均有一定抑制作用。（）

答案:对质粒DNA小量试剂盒，1-4ml细菌培养物中提取多至20ug高纯的质粒DNA。（）

答案:对限制内切酶的主要功能是降解不同源DNA和同源DNA。（）

答案:错通过Southern杂交可以检测到外源基因是否存在于受体细胞中，但并不能确定源基因能否转录。（）

答案:对按受体细胞不同载体可以分为原核细胞和真核细胞的克隆载体。（）

答案:对土壤农杆菌介导的Ti质粒转化法是目前研究最多、机制最清楚、技术方法最为成熟的转基因方法。（）

答案:对碱裂解法提取质粒时，乙醇用于沉淀DNA。（）

答案:对CHO细胞分离自中国仓鼠肾脏，上皮样细胞，贴壁生长型，对水泡性口炎和Getah病毒敏感。（）

答案:错限制性内切酶以双链DNA为底物，识别特定的核苷酸序列，切断特定位置的磷酸二酯链，产生具有3’-OH和5’-P的DNA片段。（）

答案:对作为内切酶底物，DNA应该具备一定的纯度，其溶液中不能含这些因素的存在均不同程度影响限制性内切酶的活力（）。

答案:酚、氯仿###乙醚、SDS###EDTA、高盐浓度###酒精检测特异性蛋白质的方法包括（）。

答案:生化反应检测法###免疫学检测法###生物学活性检测法PCR反应注意事项有()。

答案:PCR应该在没有DNA的环境中进行###玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。###PCR的样品应在冰浴上融解###所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。碱裂解法提取质粒时，EDTA是螯合剂，可抑制DNA酶的活性，防止DNA被酶降解。()

答案:Ca2+###Mg2+常用抗生素基因筛选的抗生素有（）。

答案:氯霉素###链霉素###氨苄青霉素###卡那霉素下列属于细胞因子的是（）。

答案:干扰素###白细胞介素###生长因子细胞因子有哪些种类（）。

答案:干扰素###白细胞介素###肿瘤坏死因子###生长因子干扰素作用的特点（）。

答案:广普性###发挥作用迅速###间接性###种属特异性具有同特异性目标分子产生很强的相互作用并可对其相互作用的产物进行有效检测的DNA分子、RNA分子和蛋白质分子是（）。

答案:分子探针当DNA双螺旋被展开时，每一条链都用作一个模板，通过互补的原则补齐另外的一条链，即（）。

答案:延伸利用人工构建的磷脂双分子层组成的膜物质包裹DNA分子形成球形体,将重组DNA分子转运到细胞内是（）。

答案:脂质体介导既补充7种稀有密码子，又能促进二硫键的形成，帮助表达需要借助二硫键才能形成正确折叠构象的真核蛋白质的菌株是（）。

答案:Rosetta-gami2针对DNA分子进行的印迹杂交技术是（）。

答案:Southern印迹杂交将某种生物基因组DNA经超声或限制酶部分酶切处理后，与载体连接，转化宿主细胞，得到含全部基因的克隆群体是（）。

答案:基因组文库利用高速运行的金属颗粒轰击细胞，将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随之带入细胞进行表达的基因转化方法是（）。

答案:基因枪法电击转化法是一种电场介导的细胞膜渗透化处理技术。（）

答案:对基因工程所用的限制性内切酶可从生产厂家购买，国内市场上常用宝生物TaKaRa。（）

答案:对构建基因文库类型的包括（）。

答案:cDNA文库###基因组文库组成DNA的碱基有（）。

答案:鸟嘌呤###胞嘧啶###胸腺嘧啶###腺嘌呤质粒DNA小量试剂盒采用什么原理达到快速纯化质粒DNA的目的（）。

答案:SDS碱裂解法###DAN制备膜选择性吸附1.不是组成DNA的碱基为（）。

答案:尿嘧啶常见的植物转基因方法包括（）等。

答案:农杆菌Ti质粒介导转化法###花粉管法###化学诱导DNA直接转化法###植物病毒介导转化法组成遗传信息的核酸包括。()。

答案:核糖核苷酸###脱氧核糖核苷酸###RNA###DNA基因工程所用到的工具酶有（）

答案:结核病###鼠疫###某些白血病转化反应时热击感受态细胞的温度和时间是（）

答案:42℃90s下列温度中，目的基因和载体连接反应的最适温度是（）。

答案:4℃绝大多数的Ⅱ型限制性核酸内切酶都能够识别由（）核苷酸组成的特定的核苷酸序列。

答案:4~8个基因工程过程中，微生物培养最常用的培养基，用于培养大肠杆菌等细菌，其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基（）。

答案:LB培养基具平末端DNA片段之间的连接反应只能用T4DNA连接酶，并且必须增加酶的用量。（）

答案:对互补黏性末端的两个DNA片段之间的连接可用E.coliDNA连接酶，也可用T4DNA连接酶。（）

答案:对内切酶操作应在低温下进行（冰上）；使用时防止操作中对内切酶的污染。（）

答案:对放射性标记物是指以放射性同位素对核苷酸等进行标记后的产物，常见的放射性同位素有（）等。

答案:14C###3H###32P###125I核苷酸的非放射性标记物有（）等。

答案:荧光素###地高辛###生物素在DNA分子克隆中，通常将导入外源DNA分子后能稳定存在的受体细胞称为（）。

答案:转化子衍生自lacZY突变的BL21菌株，该突变能根据IPTG的浓度精确调节表达产物，使得表达产物量呈现IPTG浓度依赖性的菌株是（）。

答案:OrigamiB一种革兰氏阴性细菌，其遗传背景清楚，目标基因表达的水平高，培养周期短。是目前应用最广泛的基因表达系统（）。

答案:大肠杆菌几乎所有的大肠杆菌中都存在一种质粒，即2μm质粒，可利用它构建系列用于酵母转基因的质粒载体。（）

答案:错免疫学检测法使用DNA探针，而非抗体探针来鉴定靶基因表达产物。（）

答案:错回收小于100bp及大于10kb的DNA片段时，应加大溶胶液的体积，延长吸附和洗脱的时间。（）

答案:对细胞因子的分泌特点包括（）

答案:短暂的自限性分泌###自分泌###多细胞来源###旁分泌碱裂解法提取质粒时，冰醋酸把醋酸钠溶液的pH调到4.8，中和NaOH，使DNA变性。（）

答案:错常用的载体包括（）。

答案:质粒###噬菌体根据来源和理化性质，可将INF分为三种型别。（）。

答案:IFN-gβ###IFN-α###IFN-γSDS电泳法分离鉴定蛋白质时脱色液的主要成分（）。

答案:甲醇###.冰乙酸利用外源DNA插入位点两侧存在的特定序列设计引物，对外源DNA进行菌落PCR分析的方法称为（）。

答案:菌落PCR基因序列正读和反读是一样的，即有一个中心对称轴，从这个轴朝两个方向读序列是完全一样的（）。

答案:回文结构将在待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两个寡聚核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍的方法是（）。

答案:PCR利用显微注射仪，通过机械方法把外源DNA直接注入细胞质或细胞核内的基因转化方法是（）。

答案:显微注射显微注射翻译是以DNA为模板合成mRNA的过程。（）

答案:错平板划线分离法主要用于菌种分纯，获得单菌落。（）

答案:对干扰素是因其能干扰病毒感染而得名的。（）

答案:对时内切酶体积不能超过反应体系10％，因内切酶中含50％甘油，体系中甘油超过5％会抑制内切酶活力（）

答案:对转录是以mRNA为模板合成蛋白质的过程。（）

答案:对碱性磷酸酯酶催化一种DNA片段的5′端由磷酸基(-P)转变为羟基(-OH)。（）

答案:对高温处理用于制备DNA的器皿和试剂，防止DNaseⅠ的污染造成DNA的降解。（）

答案:对转染是采用与质粒DNA转化受体细胞相似的方法，将重组入噬菌体DNA分子直接导入受体细胞中的过程。（）

答案:对DNA电泳缓冲液中的蔗糖或甘油用来增加DNA样品的密度，确保DNA样品沉入点样孔内。（）

答案:对DNA标准品DL2000含有六条电泳条带。（）

答案:对基因工程奠定了理论基础的发现是（）。

答案:DNA是遗传物质###遗传信息传递的中心法则###DNA分子的双螺旋结构和半保留复制核酸分子杂交检测法可分为()等。

答案:Southern印迹杂交###Northern印迹杂交###菌落印迹原位杂交###斑点印迹杂交和PCR反应包括的基本步骤。()

答案:变性###退火###延伸质粒DNA转化大肠杆菌转化步骤()

答案:转入###吸附###自稳###表达目前常用的探针多是在体外进行标记的，标记方法包括（）。

答案:化学法###酶法PCR反应体系包括()

答案:反向引物###正向引物###模板DNA###TaqDNA聚合酶将外源DNA导入动物细胞的方法包括（）等。

答案:超声波法###电激穿孔法###显微注射法###基因枪法磷酸盐缓冲液PBS的成分包括（）。

答案:KH2PO4###Na2HPO4.12H2O###NaCL###.KCL利用动物病毒侵染动物细胞或组织的分子生物学特性，构建了一系列动物基因克隆载体。常用的病毒有（）等。

答案:痘苗病毒###SV40病毒###腺病毒###反转录病毒带有含T7噬菌体溶菌酶基因的质粒pLys，适用于毒性蛋白质和非毒性蛋白质的表达菌株是（）。

答案:BL21(DE3)pLys碱裂解法提取质粒时，增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械力（震荡）的作用而降解的是（）。

答案:葡萄糖能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞是（）。

答案:受体细胞限制－修饰作用实际就是细菌中的限制性内切酶降解外源DNA，维护自身遗传稳定的保护机制。（）

答案:对同一质粒尽管分子量相同，不同的构型电泳迁移率不同scDNA最快、lDNA次之、ocDNA最慢。

答案:对.大多数酶的最佳反应温度为37°C。（）

答案:对对于插入片段是大小相似的非目的基因片段的假阳性重组体电泳法仍不能鉴别。（）

答案:对某些限制性内切核酸酶在特定条件下，可以在不是原来的识别序列处酶切DNA，这种现象称为星号活性(Star活性)。（）

答案:对同尾酶是来源不同，识别的靶序列也不相同，但是酶切DNA分子所得的DNA片段具有相同的黏性末端的一组限制性内切核酸酶。（）

答案:对线状DNA分子，若某种限制性内切酶有n个识别序列，完全切割后可获得n个片段。（）

答案:错氨苄青霉素溶液的工作浓度50µg/ml，100ml培养基100ug/ul氨苄青霉素溶液储备液加50ul。（）

答案:对限制性核酸内切酶就是从其识别序列内切割DNA分子的。（）

答案:对同一菌株中所含有的限制性核酸内切酶都是相同的。（）

答案:错影响酶催化反应的因素包括酶浓度、底物浓度、pH和温度、激活剂和抑制剂。（）

答案:对质粒DNA小量试剂盒细菌裂解液中含有SDS和NAON。（）

答案:对pET系统是在E.coli中克隆表达重组蛋白的系统，受噬菌体T7强转录及翻译信号控制。（）

答案:对pET由于带有来自大肠杆菌的乳糖操纵子可以使用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)来诱导表达。（）

答案:对常用的人体白细胞重组干扰素包括IFN-α1b、IFN-α2a和IFN-α2b。（）

答案:对超净工作台宜可以安装在普通房间内，并不影响高效滤器寿命。（）

答案:错碱性磷酸酯酶能脱载体末端的磷酸基，避免在DNA重组时载体分子的自我连接。（）

答案:对1981年酿酒酵母表达了第一个外源基因人干扰素基因，随后又有一系列外源基因在该系统得到表达。（）

答案:对在将枪头（pipettetips）套上移液枪时，需要使劲地在枪头盒子上敲几下。（）

答案:错当带有抗菌素抗性基因载体进入受体菌后，受体菌能在含有抗菌素的培养基生长。（）

答案:对切胶时，紫外照射时间尽量短，以免对DNA造成损伤。（）

答案:对琼脂糖凝胶电泳上样时每一个样品不应更换一个加样头，以避免浪费，加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面。（）

答案:错外源靶基因在体外与载体形成重组DNA分子必须导入适宜的受体细胞中才能使外源靶基因得以大量扩增或表达。（）

答案:对BL21(DE3)菌株添加T7聚合酶基因，为T7启动子表达系统而设计。（）

答案:对常见的人工染色体载体有（）等。

答案:酵母人工染色体载体###细菌人工染色体载体###P1人工染色体载体干扰素所能治疗的疾病有（）。

答案:DNA连接酶###胰蛋白酶蛋白质电泳时一般加样体积为（）。

答案:10－15μL###.约2－10μg蛋白质DNA胶纯化时，促进胶块水浴时融解的方法有（）

答案:加溶胶液###将胶块切碎###水浴目前，在基因工程研究中广泛应用的DNA连接酶有（）等。

答案:E.coliDNA连接酶###T4DNA连接酶###TaqDNA连接酶为基因工程奠定了技术基础的是（）。

答案:工具酶的发现###大肠杆菌转化技术###载体的构建溴酚蓝是前沿指示剂，因其分子量小走在最前沿呈现一条肉眼可见的蓝色条带，DNA分子大走在后边，电泳时根据溴酚蓝的迁移距离判断电泳距离的长短。（）

答案:对基因工程操作过程（）。

答案:链接到载体###筛选阳性菌###获得目的基因###转化受体菌常用的哺乳动物受体细胞有（）等。

答案:小仓鼠肾细胞（BHK）###人胚胎肾细胞（HEK-239）###非洲绿猴肾细胞（COS）###中国仓鼠卵巢细胞（CHO）重组子的筛选方法主要有()

答案:核酸杂交法###遗传检测法###DNA测序检测法###免疫化学法基因工程四大要素（）。

答案:目的基因###载体###工具酶###受体细胞碱裂解法提取质粒时，高浓度NaAc有利于变性大分子沉淀（ABC）。

答案:RNA###蛋白质###DNA一段终止RNA聚合酶转录的DNA序列是（）。

答案:终止子重组基因导入原核受体细胞的主要途径有（）等。

答案:转化###转染###转导细胞因子作为细胞间信号传递分子，介导和调节免疫应答及炎症反应、刺激造血功能，参与组织修复等,包括（）。

答案:生长因子###干扰素###肿瘤坏死因子将能参与细胞壁裂解的酶统称为细胞裂解酶，常用的有（）等。

答案:蛋白酶K###溶菌酶###纤维素酶制备感受态细胞，促进转化的条件包括()

答案:低渗的CaCl2###42℃热击###低温（0℃）使用微量移液器时下列说法不正确的是（）。

答案:不使用时，要把移液枪的量程调整到最小的刻度IPTG的诱导浓度和诱导后培养时间一般为（）。

答案:3h###.0.3-1mmol/L制备感受态细胞时，设置低温冷冻离心机（）。

答案:4###4000rpm###10min高压蒸汽灭菌锅的使用温度与设定时间分别为（）。

答案:121℃20minDNA连接酶作用后形成（）。

答案:磷酸二酯键主要由活化的T细胞和NK细胞产生，又称II型干扰素的是（）。

答案:IFN-g限制性内切酶切断DNA链上磷酸二酯键的位置一般在识别序列的位置，如G↓GATCC,AT↓CGAT;（）。

答案:内部SDS电泳法分离鉴定蛋白质时染色液的主要成分是（）。

答案:考马斯亮蓝SDS电泳法用于分离鉴定（）。

答案:核酸是细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染色体上（）。

答案:．质粒在37℃时有利于连接酶活性的发挥，但在这一温度下酶的活力也不能保持太久。因此，在实际操作时，采用（）左右为宜，也可较温度如4℃下连接，但连接时间要延长。

答案:12-16℃由正二十面体的蛋白质头部和中空管状的蛋白质尾部组成。属温和噬菌体（）。

答案:l噬菌体碱裂解法提取质粒时，酚-氯仿为蛋白变性剂，使蛋白质沉淀。但易残留在DNA溶液中，现多用商品化的（）纯化DNA。

答案:层析柱通常表达质粒不应使外源基因始终处于转录和翻译之中，因为某些有价值的外源蛋白可能对宿主细胞有毒的，外源蛋白过量表达影响细菌的生长。（）

答案:对有乳糖存在时，lac操纵子即可被诱导，发生转录。（）

答案:对在原核基因表达调控中，阻遏蛋白与操纵基因系统起着重要的开关调节作用。（）

答案:对含有重组DNA分子的转化子为重组子。（）

答案:对当没有乳糖存在时，lac操纵子处于阻遏状态，抑制转录起动。（）

答案:对根据表达载体的不同，外源基因表达常采用化学诱导。（）

答案:对含有外源目的基因的重组子是目的重组子。（）

答案:对碱基互补配对总是出现于腺嘌呤与胸腺嘧啶之间，或者出现于鸟嘌呤与胞嘧啶之间，形成的键是（）。

答案:氢键长期存放菌株和pET重组子应保存于什么环境中。但是要注意高浓度过高(>10%)会导致质粒不稳定（）。

答案:甘油His•Tag是常用的融合标签，可以将以包涵体形式表达的蛋白在完全变性条件下溶解，继而进行亲和纯化（）

答案:蛋白质一类芽殖或裂殖进行无性生殖的单细胞真核生物，分属于子囊菌纲、担子菌纲和半知菌纲，是外源基因最理想的真核生物基因表达系统。（）

答案:酵母用基因工程方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系是（)

答案:工程菌用于检测和纯化目的蛋白，有时也通过增加目的蛋白在细胞质中的可溶性或帮助将目的蛋白运转到细胞周质中以提高目的蛋白的生物活性（）。

答案:融合标签把混杂在一起的微生物用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到独立分布的单细胞，培养后繁殖成单菌落的操作（）。

答案:平板划线分离法化学的方法制备的感受态细胞，通过热击处理将载体DNA分子导入受体细胞。使用的化学试剂是（）。

答案:CaCl2下列菌株中经诱变的菌株，缺乏DNA修饰，即其自身DNA不会被修饰，不会对导入的外源DNA进行切割；对青霉素敏感，常用于基因工程受体菌的是（）。

答案:DH5α不同的pET载体带有不同的筛选标记，如什么缩写为Ap以及kan(卡那霉素抗性)。这两种筛选非常常用（）。

答案:氨苄青霉素抗性环状DNA分子上，若某种限制性内切酶有n个识别序列，则完全切割后可获得片段。（）。

答案:n碱裂解法提取质粒时，NaOH强碱，提供pH>12的碱性条件，使DNA双链复性。（）

答案:错严谨型质粒在细胞内复制时