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文档简介

荧光标记技术荧光标记技术荧光标记技术是用荧光素标记在抗体或抗原上，与相应的抗原或抗体特异性结合，然后用荧光显微镜观察所标记的荧光，以分析示踪相应的抗原或抗体的方法。其中，最常用的是荧光素标记抗体或抗抗体，用于检测相应的抗原或抗体。该技术是标记免疫技术中发展最早的一种。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。基本原理荧光素在10-6的超低浓度时，仍可被专门的短波光源激发，在荧光显微镜下可观察到荧光。荧光抗体标记技术就是将抗原抗体反应的特异性，荧光检测的高敏性，以及显微镜技术的精确性三者结合起来的一种免疫检测技术。荧光素荧光素是能产生明显荧光，能作为染料使用的有机化合物。主要是以苯环为基础的芳香族化合物和一些杂环化合物。它们受到激发光(如紫外光)照射后,可发射荧光。可用于标记的荧光素有异硫氰酸荧光黄、四乙基罗丹明和四甲基异硫氰酸罗丹明，其中异硫氰酸荧光黄应用最广，为黄色结晶。抗体经荧光素标记后，不影响与抗原的结合能力和特异性。当荧光抗体与相应的抗原结合时，就形成了带有荧光性的抗原抗体复合物，从而可在荧光显微镜下检出抗原存在。基本步骤1.制作标本片。根据被检样品的不同，采用不同的制备方法，固定处理环节尤为重要。2.使荧光抗体与标本切片中组织或细胞表面的抗原进行反应。3.洗涤除去游离的荧光抗体。4.

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