动物实验操作技术-小鼠、大鼠的实验操作

动物实验操作技术大鼠、小鼠的实验操作技术（采血）认识理解并善待实验动物学习目标任务描述知识平台任务描述

熟练掌握大鼠、小鼠采血操作，并培养团队合作意思。

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血样可帮助科学研究人员和技术人员确定动物的健康状况、诊断疾病，并为研究人员提供非常重要的信息。无论使用何种方法从啮齿类动物身上采集血样，都应特别重视保持血样的质量。小鼠与大鼠的采血1.最大抽血量

健康成年动物的平均血液量通常约相当于其体重的6-7%（g）。典型可承受最大抽血量（可以从一只动物中安全抽取的血液总量）最高约相当于一只动物循环血量的10%。品种单个样品最大抽血量放血量小鼠0.2–0.3ml1.6-3.2ml1.0–1.5ml大鼠2.0–3.0ml20.0–40.0ml8.0–12.0ml大鼠和小鼠中常用抽血量、最大量及放血量2.眼窝采血

眼窝抽血是将采血毛细管直接置于啮齿类动物眼窝的眼窝窦（或大鼠脉络丛）中进行抽血的过程。这种类型的抽血过程可能需要采用安乐死。1.颈背部保定小鼠，并将毛细管插入眼内眦（沿着动物鼻子的45°角）2.当血液键入采血管，轻轻扭转采血管，使其向前进入眼窦。3.倒转动物，利用重力帮助加速血液流入采血容器中。4.移除采血管，合上眼睑，轻轻压一下眼睛，以确保止血。3．尾静脉采血

尾静脉采血在小鼠和大鼠中均可进行。侧尾静脉是快速有效采集量至中量动物血液的一个很好部位。保定小鼠，露出尾巴2.握住尾根部，以加速血流。3.酒精擦拭尾部

4.斜面朝上插入针头至侧尾静脉5.从针头接口处收集血液6.移去针头，并轻压止血眼窝抽血、尾静脉抽血和心脏穿刺采血是比较费力的，涉及到动物保定、安乐死、采血管准备、采血、基本血样制备和储存，需要尽量减轻动物的疼痛和不适交流（1）由各组负责人示范小鼠大鼠的基本实验操作，教师讲解重点难点和注意事项；（2）各组在教师和该责任人的指导下完成小鼠大的基本实验操作；（3）所有学生撰写自己的工作记录；（4）考核小鼠的基本实验操作，再考核大鼠的基本实验操作；（5）该项目负责人撰写该实验的工作小结；（6）教师总结。思考与练习1.总结实验动物给药的方法。2.列表比较小鼠灌胃、皮下注射、肌肉注射和腹腔注射的操作要点的异同。3.某实验项目研究的是某饲料添加剂对雌性大鼠的影响。实验方案如下：共50只大鼠，分成五组，每组十只，各组动物用一个大笼盒饲养，共用5个大笼盒。第一组为对照组，第二、三、四、无组每日灌胃该饲料添加剂，浓度依次为1mg/kg、5mg/kg、30mg/kg、100mg/kg，连续灌胃30天，每日灌胃前对所有动物称重，并记录。第31日去动物小肠和血液检测生理生化指标。就在实验的第22天，由于饲养员疏忽，第三组的饮水瓶没盖紧，漏了一夜的水，致使第三组大鼠的体重和采食量明显下降。第三组实验数据的准确性受到很大的影响。于是，实验人员决定重新实验，他们如何改进实验的方式方法，才能避免类似情况发生。动物实验操作技术大鼠、小鼠的实验操作技术（麻醉）认识理解并善待实验动物学习目标任务描述知识平台

学习目标1.能进行小鼠、大鼠的麻醉全身麻醉；2.加深对动物3R和动物福利的认识，并在实验过程中予以贯彻，人道对待实验动物。

知识平台知识平台小鼠与大鼠的全身麻醉常用麻醉剂麻醉方法进行动物实验有时需要麻醉，安全、有效的麻醉方法和技术，可高质量地保障动物实验的顺利进行，并体现动物福利的宗旨。麻醉过浅或过深会使实验动物遭受过多痛苦，影响实验进程和实验结果，重者可导致实验动物死亡。小鼠与大鼠的麻醉1.常用的麻醉药从物理性质上可分为挥发性麻醉剂，如乙醚、氟烷、甲氧氟烷等；非挥发性麻醉剂，如巴比妥类、氯胺酮、水合氯醛、乌拉担和一些新型的复合麻醉剂如速眠新、速麻安等。（1）乙醚乙醚是最常用的挥发性麻醉药物，各种动物都可应用。其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。但由于乙醚局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加。（2）氨基甲酸乙酯

此药是比较温和的麻醉药，安全度大。多数实验动物都可使用,更适合于小动物。一般用作基础麻醉，如使用全部过程都用此麻醉时，动物保温尤为重要。（3）戊巴比妥钠

此药麻醉时间不很长,一次给药的有效时间可延续3-5小时,所以十分适合一般使用要求。给药后对动物循环和呼吸系统无显著抑制作用，药品价格也很便宜。（4）硫喷妥钠

为黄色粉末，有硫臭，易吸水。其水溶液不稳定，故必须现用现配，常用浓度为1～5％。此药作静脉注射时，由于药液迅速进入脑组织，故诱导快，动物很快被麻醉。2.麻醉药物的选择（1）根据不同实验动物选择麻醉药物不同实验动物对同一麻醉药物的敏感性存在差异。（2）根据不同动物实验选择麻醉药物（3）根据不同麻醉途径选择麻醉药物（4）复合麻醉的药物选择复合麻醉可以减少每种药物的剂量和副作用，避免单纯使用一种麻醉药物时麻醉过深或长时、大量使用对机体可能带来的不利因素，在保护实验动物的同时，更好地达到实验预期目的。3.常用全身麻醉方法（1）吸入麻醉法吸入法对多数动物有良好的麻醉效果，其优点是易于调节麻醉的深度和较快的终止麻醉，缺点是中、小型动物较适用，对大型动物如狗的吸入麻醉操作复杂，通常不用。2）注射麻醉法大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法进行全身麻醉。狗、兔等动物既可腹腔注射给药，也可静脉注射给药。在麻醉兴奋期出现时，动物挣扎不安，为防止注射针滑脱，常用吸入麻醉法进行诱导，待动物安静后再行腹腔或静脉穿刺给药麻醉。（4）复合麻醉的药物选择复合麻醉可以减少每种药物的剂量和副作用，避免单纯使用一种麻醉药物时麻醉过深或长时、大量使用对机体可能带来的不利因素，在保护实验动物的同时，更好地达到实验预期目的。（4）复合麻醉的药物选择复合麻醉可以减少每种药物的剂量和副作用，避免单纯使用一种麻醉药物时麻醉过深或长时、大量使用对机体可能带来的不利因素，在保护实验动物的同时，更好地达到实验预期目的。4.麻醉深度要根据动物体重、药物浓度，仔细计算好所需的麻醉药物剂量。5.麻醉后的动物监护防止麻醉后的动物因呼吸道阻塞而窒息死亡。在需要动物长时间处于麻醉状态的实验中，追加麻醉药物要严格控制剂量(一般不超过麻醉剂量的1/3).麻醉药名适用动物给药途径给药剂量

（mg/kg）常配浓度（%）给药量(ml/kg）维持时间乙醚各种动物吸入———实验过程中一直药吸入麻药，时间随实验而掌握氯仿各种动物吸入

同乙醚，毒性大戊巴比妥钠狗、猫、兔豚鼠大、小鼠鸟类静脉腹腔、皮下腹腔腹腔肌肉3040~5040~504550~100332221.01.4~1.72.0~2.52.32.5~5.02~4小时.中途加1/5量,可多维持1小时以上氨基甲酸乙酯(乌拉坦)狗、猫兔豚鼠大、小鼠腹腔，静脉直肠肌肉肌肉252520203~46.07.06.32~4小时,安全,毒性小,主要适用于小动物,有时可降低血压硫喷妥钠狗、猫兔、大鼠静脉、腹腔静脉、腹腔25~5050~100211.3~2.55.0~10.015~30分钟,效力强,宜慢性注异戊巴比妥钠狗、猫兔鼠类静脉腹腔、肌肉直肠、腹腔40~5080~100100100510101051010104~6小时常见实验动物的基本操作小鼠、大鼠的实验操作任务描述知识平台任务实施学习目标学习目的学习目的：1.了解手术缝合常见方法；2.熟练掌握连续缝合技术、结节缝合技术；

任务描述

通过本任务的学习，能够了解手术缝合常见方法；熟练掌握连续缝合技术、结节缝合技术；独立完成小鼠、大鼠皮肤和肌肉的缝合。

常见缝合方法：结节缝合连续缝合结节缝合三棱针皮肤表面连续缝合肌肉或内脏圆形针任务实施

?分组练习，完成老师要求的考核1.各学习小组制定工作计划、分配工作任务，确定小鼠抓取保定和性别判定操作的主要负责人；2.各学习小组利用相关教学材料，按照工作计划，分别学习小鼠抓取