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项目17-3聚丙烯酸沉淀法提取溶菌酶

此法比较适用于用蛋壳膜提取溶菌酶，也可用于从蛋白中提取溶菌酶，可分为四个步骤：壳膜处理、除去卵蛋白、吸聚和提取溶菌酶。

项目17-3聚丙烯酸沉淀法提取溶菌酶

1．壳膜处理蛋壳膜水洗至中性后剪碎，然后加入其量1.2倍，浓度为0.5%的NaCl溶液，搅拌后加HCl调至pH6.0左右，于40℃下搅拌45min，过滤。

项目17-3聚丙烯酸沉淀法提取溶菌酶

2．去卵蛋白取滤液在沸水浴中加热至80℃，冷却后加醋酸调pH至4.6，再离心取得上清液。

项目17-3聚丙烯酸沉淀法提取溶菌酶

3．吸聚和提取溶菌酶上清液用20%的氢氧化钠溶液凋pH至6.0，然后搅拌加入5%聚丙烯酸调pH至3.0，静置30min而得溶菌酶——聚丙烯酸凝聚物，倒出上层清液，于凝聚物中加0.5MNa2CO3溶液调pH至9.5，使沉淀物溶解，然后加入5.0%的CaCl2溶液，使溶菌酶聚丙烯酸凝聚物解离，并进行离心。

项目17-3聚丙烯酸沉淀法提取溶菌酶

4．制取溶菌酶结晶离心所得上清液

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