分解纤维素的微生物的分离

第第页分解纤维素的微生物的分离专题课题3

二微生的培物养与应用分解纤维素的生物的分微离

.基一础识㈠知.维纤素与纤维酶1素.纤素维纤维素是种由葡一糖萄尾首连相成而的分子化合物高是，含最量丰的多糖类富质物。

考思纤维素：是球上含地最丰量的富多类物质糖，植每物产年生的维纤素超过70亿吨但却不会在地球，大量上积的，为累什？

么纤维能素土壤被某些中微物生分解利用这，由于是它们能产生纤维够素。酶人可应类分用解维纤的微素生将秸物秆等弃物转变成酒废，用纤维精素处酶理服面料装。

棉花等是自界中然纤维含量素高的最然产天。物

一

.础知识基.㈠维素与纤维素纤酶2.维素纤酶纤维素酶是一复种合，一酶般认它为少至包三种括分组，C即酶1(外酶)切、C酶(内切*)酶和葡萄糖苷酶前，种酶两纤使素分维成纤解二糖维第，种酶将三维纤二分解成糖萄葡糖

纤。维素

1酶、C*酶

纤C维糖

二葡糖苷酶

葡萄萄

糖一.

基知础识㈠.纤素维与纤维素酶.纤维3的分解：素分解纤维的微素物生，各种细有、菌真菌少和放线菌数。

实:纤验维素酶解分维纤的实素验①取支二02mL的试管各②入一加张滤纸条③加各pH4.入，物质8为量.01om/lL醋的酸-醋酸缓冲液1钠1ml1和m0l④乙在试管中入加1Lm纤素酶维⑤两支管固定在锥形瓶试，中放在10r/m4ni摇的床振荡1h⑥结上果乙：试的滤纸管消逝条甲乙

讨：乙论试管的滤纸为条么什消逝会？试管的作用甲是什么?

一基础知.识㈡.维纤分解细菌的素选：1.方法：筛刚果染红法。色.2原：理刚果红可以与纤素维形成红色复物合当，维素被纤维纤素分酶后解红，复色合无法形物，涌现成纤维以分解素菌为中的心透圈明，们可我以过是否通生透产明来筛圈选纤素分维解菌。3.优点该方：法以通可颜色反应过径直选。筛

操作

步

骤1、土壤样取：富纤维素的环含中境分布环①境②缘由由于生物适一应定环的境环，境生对有选物择用作在，富纤维含素环的境，纤中素分解菌维的量含相对高，提此因从种这土样中获目得微的物的几生率要于一般高境。环③实：例树中多林年叶落成的形殖腐，土多年累积的枯枝败等。叶④

论:讨果找如不到适合的境环可以将，滤纸在埋壤中土，将纸埋滤在壤中土有么作用？你认什为纸应当埋在土壤中滤深多

答？将滤：埋在土壤纸中能纤使素维分解菌相集对中事实上，是人工置设纤维素分解菌生的相宜环境存。一应般将纸滤埋于约1深cm0右的左土中壤

。.实二验设与操作计.试验㈠设计土：取样壤择选养培度稀释

将样品涂梯布鉴别到纤维素解菌的培分养基上

选择生产明圈的菌透落

2选、择培①养目的：加纤维素分增解菌浓的度，确保以能够从品样分别所中要的微需生。

物

、选2培择②制养选备培择养：阅读书基P29本纤维素解菌的分择选培育基方配回，问题。

答A、旁栏的中方是配液培育基还体是体固培育基？为什？B么这、培个基养微生物对是具否有择选用？如作果有具，是如何进行择选的？C你能否、设一计个照试验对说，明择选养培的基用

答作有：择选作用，配方本以纤维中作为答：素是体液养培基，原是配因中方无凝固剂答：牛肉用蛋膏白胨养基与培之照对或。唯一源，只有能分解碳维纤素的微生可以物(琼脂)者纤维将素改为葡萄。大量繁糖殖

。2、

选培育③操择作：称取样土20g在，无条菌件加入装下30m有L培育基的瓶摇中将。摇置瓶摇于床上，3在℃0振下荡培1~2养，至培d基变混浊养吸取一。的培养定(约液m5L)转，至另移瓶新鲜一的择选培基中，养同样以方法培的养到培育液变浊。浑也可重复选择培。养

〖旁思栏考题〗什为么选培育能够“择缩浓所”的需生物微

在选择？养的培条件下，以可使些能那适应这种营养条件的够微物生得到快速繁殖，而那不些适这种应养条营的件微物的生繁殖被抑，制因可此起到以浓“缩”的作。用

二.试验

计与设操㈠作试验设.计：土壤取样选择培育梯稀释度将样品涂布到别鉴纤维素解分的菌培养基上选产生挑明圈透菌落

3的梯度稀释.照课按题1稀的操作释方法将选择培育，后培育的进基行比稀释等11010~7倍

。101

120

103

14015

100

6

.4将品涂布到鉴别纤样维分素解菌的养培基上鉴别培基养—在培育—基中入某种指示加或化剂学品药用,以⑴备制鉴别培基养:别不鉴同类的种微物。生配方见书本92页操。作过见课题1程(2涂)平布：板将稀度为释104106的菌~悬液各取.01m涂l布到平板养基上培，30倒置培育。℃

5刚果红.色法染

法一方先：养培生微物再，加入果刚进行颜红色应。反法二：在方倒平板就加时入刚果。红〖栏思旁题〗考两这方种各有法哪优些点与足？染色法不优点色反应颜基本方法一是上维素纤分菌的作用解操作简不便存在菌落混杂问题缺点作操繁琐刚果红会使菌落之间生混发杂产淀粉生的酶生物也产生微模透糊圈，明有些微物生降能色素解，成形明的显透亮圈。方二

法思索：

方一法中NCla溶的液作？用漂洗作用，洗去与纤素结合维不的牢刚果红，以免涌现的透亮圈够清不晰用。这方可以法判断酶力的大活小，实上刚际红是结果合培育基到多糖的底物，但分解纤素维的细菌以产生纤可维酶素能分，这解个多糖物成为单底糖，样这果红刚就能不结合上了，去化氯钠液溶就以使结合可牢的刚不红果洗去这样，留下大大