实验一光学显微镜技术

关于实验一光学显微镜技术实验报告六、作业一、实验目的二、实验原理三、实验材料五、实验结果及分析四、实验步骤第2页,共46页，2024年2月25日，星期天实验一光学显微镜技术第3页,共46页，2024年2月25日，星期天实验目的了解普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜和微分干涉显微镜的构造、工作原理和使用方法。学习测微尺的用法并测量细胞的大小。第4页,共46页，2024年2月25日，星期天显微镜,目镜测微尺(eyepiecesor

ocularmicrometer),镜台测微尺（stagemicrometer）,载玻片,盖玻片等。

实验用品第5页,共46页，2024年2月25日，星期天夹竹桃叶片横切片实验材料小肠切片鸡红细胞洋葱

采鸡血（阿氏液：血2：1)(阿氏液红细胞保存液：葡萄糖2.05g

柠檬酸钠0.88g

氯化钠0.42g

加蒸馏水至100ml，过滤分装，灭菌后在0－4℃冰箱中可保存两周。)第6页,共46页，2024年2月25日，星期天普通光学显微镜光镜主要由三部分组成：（1）光学放大系统：目镜与物镜（2）照明系统（3）机械和支架系统第7页,共46页，2024年2月25日，星期天第8页,共46页，2024年2月25日，星期天调节光瞳间距，使左、右两个视场像合二为一;调节屈光度以适应观察者的视力，调节方法随镜的不同而不同.第9页,共46页，2024年2月25日，星期天物镜标示

第10页,共46页，2024年2月25日，星期天将孔径光阑缩至物镜数值孔径的60%～80%或合适的范围。注意：当物镜或标本更换时，需重新调节视场光阑和孔径光阑。第11页,共46页，2024年2月25日，星期天注意事项移动显微镜，一手托镜座，一手拿镜臂!更换物镜时，转动物镜转换盘!使用油镜后，用镜头液清洗镜头。只有100倍物镜为油镜，在低倍镜下调焦清晰后，再转到油镜!固定切片不要使用油镜!第12页,共46页，2024年2月25日，星期天暗视野显微镜原理：利用暗视野聚光器使入射光束从聚光器斜向照明样品，使之发出反射和散射光。由样品发出的散射光和反射光形成了明亮的物体影象。背景是黑暗的。第13页,共46页，2024年2月25日，星期天相差显微镜原理：利用相差装置将透过细胞标本不同区域（密度不同）的光的光程差变成振幅差，从而使细胞内的各种结构之间呈现出清晰可见的明暗差异的显微镜。第14页,共46页，2024年2月25日，星期天在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处：

1.环形光阑（annulardiaphragm）位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上。2.相位板（annularphaseplate）在物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。分为两种：

A+相板：将直射光推迟1/4λ，两组光波合轴后光波相加，振幅加大，标本结构比周围介质更加变亮，形成亮反差（或称负反差）。B+相板：将衍射光推迟1/4λ，两组光线合轴后光波相减，振幅变小，形成暗反差（或称正反差），结构比周围介质更加变暗。第15页,共46页，2024年2月25日，星期天第16页,共46页，2024年2月25日，星期天微分干涉显微镜DIC利用的是偏振光，有四个特殊的光学组件：偏振器（polarizer）、DIC棱镜、DIC滑行器和检偏器（analyzer）。偏振器直接装在聚光系统的前面，使光线发生线性偏振。优点是能显示结构的三维立体投影影像。第17页,共46页，2024年2月25日，星期天第18页,共46页，2024年2月25日，星期天

四种不同显微镜显微镜所拍摄的体外培养成纤维细胞图像比较（A）普通明视场显微镜（B）相差显微镜（C）微分干涉显微镜（D）暗场显微镜第19页,共46页，2024年2月25日，星期天实验内容和方法细胞形态的观察细胞大小的测量第20页,共46页，2024年2月25日，星期天不同形状的动植物细胞第21页,共46页，2024年2月25日，星期天一、细胞观察动物细胞的观察

植物细胞的观察

小肠切片:细胞的形状，细胞核，核仁，细胞质

鸡血红细胞:红细胞的特点夹竹桃叶横切片:表皮细胞和叶肉细胞洋葱表皮细胞:内表皮细胞第22页,共46页，2024年2月25日，星期天第23页,共46页，2024年2月25日，星期天第24页,共46页，2024年2月25日，星期天第25页,共46页，2024年2月25日，星期天第26页,共46页，2024年2月25日，星期天1、红细胞2、中性粒细胞3、嗜酸性粒细胞4、嗜碱性粒细胞5、单核细胞6、淋巴细胞7、异嗜性粒细胞8、凝血细胞第27页,共46页，2024年2月25日，星期天第28页,共46页，2024年2月25日，星期天第29页,共46页，2024年2月25日，星期天Onionepidermalcells第30页,共46页，2024年2月25日，星期天二、细胞测量如何使用测微尺?如何测量细胞的大小?如何计算细胞的大小?第31页,共46页，2024年2月25日，星期天如何使用测微尺?目镜测微尺（Eyepiecemicrometer）镜台测微尺（Stagemicrometer）第32页,共46页，2024年2月25日，星期天目镜测微尺镜台测微尺第33页,共46页，2024年2月25日，星期天

镜台测微尺的格数目镜测微尺每格的微米数=------------------------------10

目镜测微尺的格数

第34页,共46页，2024年2月25日，星期天如何测量细胞的大小?测量一个洋葱表皮细胞的大小第35页,共46页，2024年2月25日，星期天如何计算细胞的体积?椭球形V=4πab2/3圆球形V=4/3πr3圆柱形V=πr2h*a:长半径;b:短半径；r:半径;h:高第36页,共46页，2024年2月25日，星期天作业计算不同倍数物镜下，一格目镜测微尺所代表的长度。第37页,共46页，2024年2月25日，星期天暗视野、相差、微分干涉显微镜与普通光学显微镜相比在结构上有何特点及用途。绘洋葱表皮细胞的模式图，注明物镜的倍数；并测量五个细胞的长、宽。动物细胞和植物细胞的异同点

。第38页,共46页，2024年2月25日，星期天镜油瓶的使用方法(1)(2)(3)(4)第39页,共46页，2024年2月25日，星期天(5)(6)(7)镜油瓶的使用方法第40页,共46页，2024年2月25日，星期天第41页,共46页，2024年2月25日，星期天第42页,共46页，2024年2月25日，星期天第43页,共46页，2024年2月25日，星期天第44页,共46页，2024年2月25日，星期天细胞生物学实验绘图方法与要求

二、用铅笔绘图，线条要明确清晰，图的深浅明暗一律以点的疏密来表示，点要圆而一致，不得涂暗影或进行其它美术加工。一、在仔细观察的基础上，选