微生物代谢教学

关于微生物代谢教学代谢概论代谢（metabolism）：细胞内发生的各种化学反应的总称代谢分解代谢(catabolism)合成代谢(anabolism)复杂分子(有机物)分解代谢合成代谢简单小分子ATP[H]第2页,共46页，2024年2月25日，星期天第一节微生物的代能量谢一切生命活动都是耗能反应,因此,能量代谢是一切生物代谢的核心问题。能量代谢的中心任务,是生物体如何把外界环境中的多种形式的最初能源转换成对一切生命活动都能使用的通用能源------ATP.最初能源有机物还原态无机物日光化能异养微生物化能自养微生物光能营养微生物通用能源（ATP）第3页,共46页，2024年2月25日，星期天一．生物氧化生物氧化就是发生在或细胞内的一切产能性氧化反应的总称.生物氧化的形式包括某物质与氧结合、脱氢或脱电子三种.生物氧化的功能为：产能（ATP）、产还原力[H]和产小分子中间代谢物.第4页,共46页，2024年2月25日，星期天（一）、底物脱氢的四条主要途径EMP途径，又称糖酵解途径HMP途径，又称己糖-磷酸途径ED途径，又称2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸裂解途径TCA循环，即三羧酸循环第5页,共46页，2024年2月25日，星期天1、葡萄糖的酵解作用

(又称：Embden-Meyerhof-Parnas途径，简称：EMP途径)活化移位氧化磷酸化葡萄糖激活的方式己糖异构酶磷酸果糖激酶果糖二磷酸醛缩酶甘油醛-3-磷酸脱氢酶磷酸甘油酸激酶甘油酸变位酶烯醇酶丙酮酸激酶第6页,共46页，2024年2月25日，星期天磷酸果糖激酶EMP途径的关键酶，在生物中有此酶就意味着存在EMP途径需要ATP和Mg++在活细胞内催化的反应是不可逆的反应第7页,共46页，2024年2月25日，星期天3-磷酸甘油醛(3-磷酸甘油醛脱氢酶)1,3-二磷酸甘油酸(磷酸甘油酸激酶)3-磷酸甘油酸(磷酸甘油酸变位酶)2-磷酸甘油酸烯醇式丙酮酸磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)(丙酮酸激酶)4、脱氢氧化磷酸化底物水平磷酸化底物水平磷酸化第8页,共46页，2024年2月25日，星期天2、HMP途径葡萄糖ATPADP6-磷酸葡萄糖NAD(P)+NAD(P)H+H+

6-磷酸-葡萄糖酸NAD(P)+NAD(P)H+H++CO25-磷酸-核酮糖5-磷酸-木酮糖5-磷酸-核酮糖5-磷酸-核糖5-磷酸-木酮糖+5-磷酸-核糖

TK

6-磷酸-景天庚酮糖+3-磷酸-甘油醛TA

6-磷酸-果糖+4-磷酸-赤藓糖

4-磷酸-赤藓糖+5-磷酸-木酮糖TK

6-磷酸-果糖+3-磷酸-甘油醛注：TK为转羟乙醛酶TA为转二羟丙酮基酶第9页,共46页，2024年2月25日，星期天HMP途径降解葡萄糖的三个阶段HMP是一条葡萄糖不经EMP途径和TCA循环途径而得到彻底氧化，并能产生大量NADPH+H+形式的还原力和多种中间代谢产物的代谢途径1.葡萄糖经过几步氧化反应产生核酮糖-5-磷酸和CO22.核酮糖-5-磷酸发生同分异构化或表异构化而分别产生核糖-5-磷酸和木酮糖-5-磷酸3.上述各种戊糖磷酸在无氧参与的情况下发生碳架重排，产生己糖磷酸和丙糖磷酸第10页,共46页，2024年2月25日，星期天HMP途径的总反应

耗能阶段C62C3

产能阶段4ATP2ATP2C32丙酮酸

2NADH2C6H12O6+2NAD++2ADP+2Pi2CH3COCOOH+2NADH2+2H++2ATP+2H2O

第11页,共46页，2024年2月25日，星期天HMP途径的总反应6葡萄糖-6-磷酸+12NADP++6H2O

5葡萄糖-6-磷酸+12NADPH+12H++12CO2+Pi第12页,共46页，2024年2月25日，星期天HMP途径的生理意义为核苷酸和核酸的生物合成提供戊糖-磷酸产生大量的NADPH2，一方面参与脂肪酸、固醇等细胞物质的合成，另一方面可通过呼吸链产生大量的能量四碳糖（赤藓糖）可用于芳香族氨基酸的合成在反应中存在3-7碳糖，使具有该途径的微生物的碳源谱更广泛通过该途径可产生许多发酵产物，如核苷酸、氨基酸、辅酶、乳酸等第13页,共46页，2024年2月25日，星期天3、Pk途径Pk途径又称磷酸解酮酶途径，它们催化的反应分别为：

5-磷酸木酮糖（果糖-6-磷酸）

磷酸戊糖解酮酶（磷酸己糖解酮酶）乙酰磷酸磷酸甘油醛（磷酸-4-赤藓糖）乙酸丙酮酸与HMP途径相连乳酸许多微生物（如双歧杆菌）的异型乳酸发酵即采取此方式第14页,共46页，2024年2月25日，星期天4、ED途径

ATPADPNADP+NADPH2葡萄糖6-磷酸-葡萄糖6-磷酸-葡萄糖酸

~~激酶（与EMP途径连接）~~氧化酶

(与HMP途径连接)EMP途径3-磷酸-甘油醛~~脱水酶

2-酮-3-脱氧-6-磷酸-葡萄糖酸EMP途径丙酮酸~~醛缩酶有氧时与TCA环连接无氧时进行细菌发酵

第15页,共46页，2024年2月25日，星期天ED途径的总反应

ATP

C6H12O6

ADPKDPGATP2ATPNADH2NADPH22丙酮酸

6ATP2乙醇

(有氧时经过呼吸链)（无氧时进行细菌乙醇发酵）第16页,共46页，2024年2月25日，星期天ED途径的特点ED途径的特征反应是2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸（KDPG）裂解为丙酮酸和3-磷酸甘油醛ED途径的特征酶是2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸（KDPG）醛缩酶ED途径中的两分子丙酮酸来历不同，一分子由2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸直接裂解产生，另一分子由磷酸甘油醛经EMP途径转化而来1摩尔葡萄糖经ED途径仅产生1摩尔ATP此途径主要存在与Pseudomonas,好氧时与TCA循环相连，厌氧时进行乙醇发酵第17页,共46页，2024年2月25日，星期天

二、递氢、受氢和ATP的产生根据葡萄糖脱氢后，递氢过程，尤其是受氢体的不同，生物氧化可分为下列三种类型：生物氧化反应发酵呼吸有氧呼吸厌氧呼吸第18页,共46页，2024年2月25日，星期天1.呼吸作用呼吸作用与发酵作用的根本区别：

电子载体不是将电子直接传递给底物降解的中间产物，而是交给电子传递系统，逐步释放出能量后再交给最终电子受体。第19页,共46页，2024年2月25日，星期天(1)有氧呼吸葡萄糖糖酵解作用丙酮酸发酵有氧无氧各种发酵产物三羧酸循环被彻底氧化生成CO2和水,释放大量能量.第20页,共46页，2024年2月25日，星期天二、异养微生物的生物氧化

有氧呼吸：电子传递链

氧分子最终电子受体第21页,共46页，2024年2月25日，星期天（2）无氧呼吸概念：一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物（个别为有机氧化物）的生物氧化，是一种无氧条件下进行的产能效率较低的特殊呼吸。无氧呼吸的最终电子受体不是氧,而是NO3-、NO2-、SO42-、S2O32-、CO2等无机物,或延胡索酸（fumarate）等有机物.第22页,共46页，2024年2月25日，星期天由于部分能量随电子转移传给最终电子受体,所以生成的能量不如有氧呼吸产生的多.无氧呼吸也需要细胞色素等电子传递体,并在能量分级释放过程中伴随有磷酸化作用,也能产生较多的能量用于生命活动。第23页,共46页，2024年2月25日，星期天无氧呼吸（anaerobicrespiration）无氧呼吸的类型硝酸盐呼吸：NO3-NO2-,NO,N2

无机盐呼吸

硫酸盐呼吸：SO42-SO32-,S3O62-,S2O32-,H2S

硫呼吸：S0S-2

碳酸盐呼吸CO2,HCO3-CH3COOHCO2,HCO3-CH4

延胡索酸呼吸：延胡索酸琥珀酸第24页,共46页，2024年2月25日，星期天3.发酵(fermentation)有机物氧化释放的电子直接交给本身未完全氧化的某种中间产物,同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。有机化合物只是部分地被氧化,因此,只释放出一小部分的能量。发酵过程的氧化是与有机物的还原偶联在一起的.被还原的有机物来自于初始发酵的分解代谢,即不需要外界提供电子受体。第25页,共46页，2024年2月25日，星期天常见的发酵种类：由EMP途径中的丙酮酸出发的发酵

乙醇发酵，同型乳酸发酵，丙酸发酵，

2,3-丁二醇发酵，混合酸发酵，丁酸型发酵通过HMP途径的发酵异型乳酸发酵通过ED途径进行的发酵细菌的酒精发酵（异型酒精发酵）第26页,共46页，2024年2月25日，星期天酒精（乙醇）发酵酵母菌（在pH3.5-4.5时）的乙醇发酵

~脱羧酶~脱氢酶丙酮酸乙醛乙醇细菌(Zymomonasmobilis)的乙醇发酵通过ED途径产生乙醇，总反应如下：葡萄糖+ADP+Pi2乙醇+2CO2+ATP细菌(Leuconostocmesenteroides)的乙醇发酵通过WD途径产生乙醇、乳酸等，总反应如下：葡萄糖+ADP+Pi乳酸+乙醇+CO2+ATP同型酒精发酵：产物中仅有乙醇一种有机物分子的酒精发酵异型乳酸发酵：除主产物乙醇外，还存在有其它有机物分子的发酵第27页,共46页，2024年2月25日，星期天乳酸发酵同型乳酸发酵：通过EMP途径仅产生乳酸的发酵异型乳酸发酵：通过HMP(PK)途径产生乳酸、乙醇、乙酸等有机化合物的发酵第28页,共46页，2024年2月25日，星期天异型乳酸发酵途径2×葡萄糖

2ATP2ADP果糖-6-磷酸果糖-6-磷酸

转醛酶磷酸解酮酶转酮酶赤藓糖-4-磷酸乙酰磷酸

ADP

木酮糖-5-磷酸ATP

乙酸第29页,共46页，2024年2月25日，星期天异型乳酸(乙醇)发酵途径5-磷酸-木酮糖

磷酸(戊糖)解酮酶

乙酰磷酸3-磷酸甘油醛

ADPPi+2ADP2ATP

乙酰CoA磷酸激酶

NADH2

ATP

乙醛乙酸

NADH2

NADH2

乙醇乳酸第30页,共46页，2024年2月25日，星期天混合酸发酵概念：通过EMP途径将葡萄糖转变成琥珀酸、乳酸、甲酸、乙醇、乙酸、H2和CO2等多种代谢产物，由于代谢产物中含有多种有机酸，故将其称为混合酸发酵。发酵途径：磷酸烯醇式丙酮酸草酰乙酸

2丙酮酸乳酸~甲酸裂解酶乙酰CoA甲酸

甲酸氢解酶乙酰-PCO2+H2

乙酸+ATP第31页,共46页，2024年2月25日，星期天

4、电子传递与氧化呼吸链电子传递1、部位：电子传递链在真核细胞发生在线粒体内膜上，在原核细胞发生在质膜上。2、成员：电子传递是从NAD到O2，电子传递链中的电子传递体主要包括FMN、CoQ、细胞色素b、c1

c

a

a３和一些铁硫旦白。这些电子传递体传递电子的顺序，按照它们的氧化还原电势大小排列，电子传递次序如下：第32页,共46页，2024年2月25日，星期天第33页,共46页，2024年2月25日，星期天MH2NADFMNC0Qb(-0.32v)(0.0v)C1Caa3O2H2O(+0.26)(+0.28)(+0.82v)

呼吸链中NAD+/NADH的E0’值最小，而O2/H2O的E0’值最大，所以，电子的传递方向是从NADHＯ２。第34页,共46页，2024年2月25日，星期天

上述反应式表明还原型辅酶的氧化，氧的消耗，水的生成。NADH+H+和FADH2的氧化，都有大量的自由能释放。证明它们均带电子对，都具有高的转移势能，它推动电子从还原型辅酶顺坡而下，直至转移到分子氧。电子传递伴随ADP磷酸化成ATP全过程又称为氧化呼吸链。第35页,共46页，2024年2月25日，星期天第36页,共46页，2024年2月25日，星期天细胞色素类细胞色素类是含Fe电子传递体。铁原子处于卟啉的结构中心，构成血红素。细胞色素以血红素作为辅基。线粒体的电子传递链至少含有5种不同的细胞色素，称为细胞色素b，c

c１

aa3

。细胞色素bcc1aa3整合在一起存在。细胞色素aa3以复合物形式存在，称为细胞色素氧化酶。细胞色素aa3含有两个必需的铜原子。由还原型a3将电子直接传递给分子氧。电子从CｏQ传到bcc1

，Fe-S旦白,aa3

。第37页,共46页，2024年2月25日，星期天三．能量转换1、光合磷酸化（photophosphorylation）光能转变为化学能的过程：

当一个叶绿素分子吸收光量子时,叶绿素性质上即被激活,导致其释放一个电子而被氧化,释放出的电子在电子传递系统中的传递过程中逐步释放能量,这就是光合磷酸化的基本动力。光合磷酸化和氧化磷酸化一样都是通过电子传递系统产生ATP第38页,共46页，2024年2月25日，星期天（1）环式光合磷酸化光合细菌主要通过环式光合磷酸化作用产生ATP不是利用H2O,而是利用还原态的H2

、H2S等作为还原CO2的氢供体,进行不产氧的光合作用第39页,共46页，2024年2月25日，星期天非环式光合磷酸化的反应式：2NADP+＋2ADP＋2Pi＋2H2O→