植物染色体带型分析

关于植物染色体带型分析1、了解染色体带型分析的有关概念。2、了解染色体C-带显色技术。3、学会植物染色体C-带分析方法。一、实验目的第2页,共17页，2024年2月25日，星期天二、实验原理染色体是遗传物质的载体，如果染色体发生变化了，生物的外在性状必然发生变化。染色体数目的变化比较容易察觉，但是染色体结构和组成成分的变化就比较难以发现。染色体显带技术使不可察觉的染色体结构和成分变化转变为可以定量表述的带型变化。染色体分带技术：染色体经物理、化学因素处理后，再进行染色，使其呈现特定的深浅不同带纹（band）的方法。染色体分带技术可分为两大类，一类是产生的染色带分布在整个染色体和长度上，如Q、G和R带；另一类是局部性的显带，它只能使少数特定的带或结构染色，如C、T和N带等。第3页,共17页，2024年2月25日，星期天第4页,共17页，2024年2月25日，星期天其中C-带主要显示着丝粒附近的异染色质，故称为C-带，其他异染色质均可显示。染色体经酸（HCl）、碱[Ba(OH)2]和缓冲盐溶液（2×SSC）处理后，再以Giemsa染液染色而显示的带型。它包括染色体C-带结构特征、C-带位置、染色强度，异染色质含量等。作为细胞分类学指标，染色体C-带核型可以从不同层次上反映其生物类群间的分类关系。染色体C-带在同一属内有一明显而恒定的C-带结构模式，往往构成“标志性C-带带纹”，由此可以进行属级分类单元的比较。第5页,共17页，2024年2月25日，星期天材料：经C-分带技术处理得到的黑麦染色体的图片。器具：显微镜、测微尺、毫米尺、镊子、剪刀、绘图纸、圆规、铅笔等。三、仪器与材料第6页,共17页，2024年2月25日，星期天四、实验说明植物C带主要包括四种带型：1、着丝粒带（centromericband，C），是指着丝粒及其附件的带。2、中间带（intercalaryband，I），分布于染色体着丝粒至末端之间的带。3、末端带（telomericband，T），位于染色体的末端的带。4、核仁缢痕带（nucleolaronstrictionband，N），是指核仁染色体特殊的带型，位于核仁组织中心区。第7页,共17页，2024年2月25日，星期天C带分类方法：1、完全带类型：处理染色后，同时出现四种带型。2、不完全带类型：只显示三种以下的带类别。aCIN型：缺乏末端带类型。bCTN型：不具有中间带类型。cTN型：只有末端带和缢痕带。dN型：只有缢痕带。第8页,共17页，2024年2月25日，星期天第9页,共17页，2024年2月25日，星期天四、实验程序1、测量图片上的每条染色体的相对长度，进行核型分析。2、分析每条染色体C-带位置。3、每对同源染色体上相对应的C-带是否纯合，即在某一特定位置相配对的两条染色体是否都具有带纹，带纹大小、染色程度是否一致，如不一致，则按杂合计。第10页,共17页，2024年2月25日，星期天

4、各染色体C-带带纹的着色程度。在同样的处理程序下，染色体组中各染色体C-带带纹上存在恒定的深浅不同的着色反应，它表示C-带结构异染色质在质上的差异。可以四级表示法：特强：染色极深；强：染色较深；中：染色程度中等；弱：染色极淡。5、根据以上C-带各项统计结果，描述各染色体的C-带特征，并据此绘制出黑麦染色体C-带带型示意图。第11页,共17页，2024年2月25日，星期天[重要实验步骤]：在观察染色体C-带型时，同时要考虑染色体长度、着丝粒位置等核型特征。第12页,共17页，2024年2月25日，星期天[实验注意事项]

：带型辨别是要考虑到因制片、分带处理而导致的带型可能出现的变化。另外染色体排队时也要从大到小，短臂向上、长臂向下，各染色体的着丝粒排在一条直线上。第13页,共17页，2024年2月25日，星期天例如节节麦C-带第14页,共17页，2024年2月25日，星期天排队：模式图：第15页,共17页，2024年2月25日，星期天对各染色体的描述1D：短臂具有端带及亚端带，长臂具有两条不太明显的中间带。2D：短臂具有端带及明显的近着丝粒带，长臂具端带及两条小的中间带。3D：短臂显示端带及亚端带。4D：短臂具有端带及近着丝粒带，长臂具有1条明显的特征带。5D：是节节麦中唯一一组随体染色体，短臂具有端带和1条中间带，随体经C-分带后不易观察。6D：为等臂染色体，长臂及短臂各具有1条明显的中间