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文档简介

岗位演练香菇多糖的提取纯化1任务七细胞色素C的三氯乙酸沉淀查阅资料，了解香菇多糖的性质，理解热水浸提和乙醇沉淀香菇多糖的原理。查阅设计《香菇多糖的提取纯化操作记录》，在任务实施过程中同步填写。按照标准操作步骤，以水提醇沉法，对香菇子实体提取纯化香菇多糖。设计实操设计（一）任务描述2（二）实训材料1.材料、试剂香菇（取子实体）、蒸馏水、无水乙醇、Sevage试剂2.仪器设备分析天平、高速离心机、离心试管、冷冻干燥机、磁力搅拌器、恒温水浴锅、烧杯等3（三）实训操作0504030201配制溶液提取Sevage法除蛋白乙醇沉淀香菇多糖含量测定（苯酚-硫酸法）配制Sevage试剂：取三氯甲烷和正丁醇，按照5﹕1的体积比进行混合，放置在棕色瓶中备用。将干燥的香菇子实体粉碎，用沸水提取2h，过滤，滤渣再按第相同提取工艺提取1次，将上清液合并后于80℃下浓缩。在冷却后的浓缩液中加入一定量95%的乙醇，离心沉淀，用真空冷冻干燥机冻干称取得到的样品10g（含水率9.7%）充分溶解于100mL蒸馏水中。加入一定体积的Sevage试剂，用磁力搅拌器剧烈搅拌20min左右，离心，去除粗多糖溶液中蛋白质沉淀。重复2次。

上清液中缓慢加入95%的乙醇，至乙醇浓度为75%（v/v），使多糖均匀沉淀。放在4℃冰箱中6h，离心弃去上清液，将沉淀溶解，重复以上过程3次，冷冻干燥机冻干制得香菇粗多糖。根据实训方案标准操作绘制标准曲线并测定多糖提取率4（四）任务分析与总结1.Sevage试剂的作用是什么？沉淀蛋白质是什么原理？2.熟练计算乙醇稀释料液时的用量。如向2L乙醇含量为20%的料液中加入95%乙醇，要将料液的乙醇浓度提高至70%，请问需添加多少95%乙醇？3.以醇沉法为例，简述有机溶剂沉到操作的注意事

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