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文档简介

山慈姑（独蒜兰）种子无菌萌发与植株再生兰科植物独蒜兰[Pleionebulbocodioides(Franch.)Rolfe]是生药山慈姑的基原植物,为常用中药,其假鳞茎具有清热化痰、解毒、消痈散结的作用。由于资源有限,加之近年来的过度开采,野生资源已临枯竭而成濒危物种。山慈姑(独蒜兰)种子数目众多,且种子是一团未分化的胚细胞,由于种子难透水、难透气、胚乳发育不完全等原因,在自然条件下几乎不萌发。本实验以山慈姑(独蒜兰)种子作为外植体,通过设计不同培养基组合来诱导种子高频率萌发,获得大量种子苗。在此基础上,利用组织培养方法对种子萌发出的原始球茎进行切割、扩繁,诱导产生愈伤组织和不定芽,以期获得大量试管苗。通过设计不同基本培养基、不同蔗糖浓度、不同活性炭浓度以及不同激素浓度等196种培养基处理对山慈姑种子无菌萌发的影响发现,MS基本培养基、1.0%的蔗糖、0.5%的活性炭这3种处理中萌发率较高,说明它们是山慈姑种子萌发较适的基本培养条件。激素实验中,只添加1.5mg/lIAA的萌发效果最好,萌发率为6.5%,且IAA单激素处理的种子萌发率整体较高,不仅诱导出原始球茎数量多,而且较大。添加了激素NAA的培养基较适宜山慈姑种子苗的生根。通过形态学观察发现,山慈姑种胚从突破种皮到形成原始球茎,最终发育成为完整植株这一过程具有一定的规律性。本实验还对种子萌发得到的原始球茎进行愈伤组织与不定芽的诱导。通过对激素浓度、生长素种类、分裂素种类、活性炭浓度、蔗糖浓度等5种因素进行正交设计,得到8种不同成分培养基。通过对出愈率、分化率、褐化率、愈伤化程度、生长状况等指标进行综合考量,进而筛选出较适宜诱导山慈姑愈伤组织与不定芽的培养基为1／2MS+1.0mg／1

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