SNT 2289-2009进出口化妆品中氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素的测定液相色谱-质谱质谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口化妆品中氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法Determinationofchloramphenicol,thiamphenicolandflorfenicolincosmeticsforimportandexport—LC-MS/MSmethodI本标准的附录A和附录B均为资料性附录。1SN/T2289—2009氟甲砜霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了化妆品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的液相色谱-质谱/质谱测定方法。2方法提要用甲醇提取样品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素，液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量。水为二次蒸馏水。3.2甲醇水溶液(2+8,体积比):20mL甲醇加水稀释至100mL。3.3氯霉素标准品(chloramphenicol,CAS号56-75-7,C1H₁₂Cl₂N₂O₅):纯度大于等于99%。3.4甲砜霉素标准品(thiamphenicol,CAS号15318-453,Ci2H₁sCl₂NO₅S):纯度大于等于99%。3.5氟甲砜霉素标准品(florfenicol,CAS号76639-94,Ci2H₁sCl₂NO;S):纯度大于等于99%。3.6标准储备溶液：分别称取适量标准品，用甲醇溶解，溶液浓度为100μg/mL。1℃~4℃冷藏保存。3.7混合标准储备溶液：分别移取适量标准储备溶液(3.6),用甲醇稀释，溶液浓度为1μg/mL。1℃~4℃冷藏保存。4仪器和设备4.2旋涡混合器。4.3·高速离心机：7000r/min。4.4分析天平：感量分别为0.01g和0.0001g。5测定步骤5.1样品处理称取1g试样(精确到0.01g)置于50mL具塞离心管中，加入20ml.甲醇，于旋涡混合器上以2000r/min,混匀1min,以6000r/min离心5min,移取1.00mL。移取1.00mL(样液A)用甲醇水5.2测定5.2.1液相色谱条件2SN/T2289—2009b)流动相：甲醇-水，梯度洗脱程序见表1表1流动相梯度洗脱程序时间/min水/%甲醇/%04685.2.2质谱条件e)监测离子对见附录A表A.1(5.2.3液相色谱串联质谱测定根据试样中被测样液的含量情况，选取待测物的响应值在仪器线性响应范围内的浓度进行测定，如超出仪器线性响应范围应进行稀释。在土述色谱条件下甲砜霉索、氟甲砜霉素和氯霉素参考保留时间5.2.4液相色谱-质谱/质谱确证按照液相色谱-串联质谱条件测定样品和标准工作溶液，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中待测物质的保留时间偏差在±2.5%之内。定量测定时采用标准曲线法测定。定性时应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差木超过表/2规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。相对离子丰度/%>20～50允许的相对偏差/%士20土50除不加试样外，均按上述操作步骤进行。6结果计算和表述用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中氯霉素或甲砜霉素或氟甲砜霉素含量，计算结果需扣除空式中：X;——试样中氯霉素或甲砜霉素或氟甲砜霉素，单位为毫克每干克(mg/kg);c从标准曲线上得到的氯霉素或甲砜霉素或氟甲砜霉素的溶液浓度，单位为微克每毫升(pg/mL);3SN/T2289—2009V——样液最终定容体积，单位为毫升(mL);m——最终样液代表的试样质量，单位为克(g)。7测定低限和回收率7.1测定低限氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素测定低限均为0.5mg/kg。7.2回收率标准添加氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素回收率的实验数据见表3。表3标准添加氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素回收率的实验数据添加浓度/(mg/kg)回收率/%“面霜爽肤水洗面奶氮霉素81.0～11082.1～10684.2～10284.5～99.681.0～97.485.2～10285.6～104甲砜霉素82.1～99.383.2～99.485.6～10284.0～102.81.4～95.884.4～10580.0～103,.87.6～10383.6～99.3氟甲砜霉素82.1～10283.2～96.385.6～10481.6～98.586.3～10486.3～10484.6～1064SN/T2289—2009(资料性附录)监测离子对及电压参数a)电喷雾电压(IS):-3500V;b)雾化气压力(GS1):262.01kPa(38psi);c)气帘气压力(CUR):186.165kPa(27psi);d)辅助气流速(GS2):310.275kPa(45psi);e)离子源温度(TEM):525℃;f)碰撞气(CAD):41.37kPa(6psi);表A.1离子对、去簇电压(DP)、碰撞气能量(CE)及碰撞室出口电压(CXP)去簇电压(DP)/V碰撞气能量碰撞室出口电压氯霉素甲砜霉素氟甲砜霉素5SN/T2289—2009氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素混合标准溶液选择性离子流图5.37321.0/152.0Max.7680.0cps5.37321.0/256.97680Max.1.4e4cpsb)04.504.50356.0/185.10.0Max.2.2e4cps4.504.50356.0/335.70.0)l/minMax.4310.0eps353.9/290.0353.9/290.0