1.1微生物的培养需要适宜条件课件【知识精讲精研】高二下学期生物浙科版选择性必修3

微生物的培养需要适宜条件第1节1.能概述培养基的成分和类型2.能阐明使用无菌技术可获得纯净的微生物培养物微生物：所有形体微小、肉眼不可见的生物的统称。无细胞结构生物原核生物真核生物病毒：SARS病毒、新冠病毒等RNA病毒；T2噬菌体等DNA病毒。细菌：蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等；放线菌：衣氏放线菌等。真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履虫、变形虫等。微生物概述微生物生长繁殖产生的菌落沙门氏菌毛霉

防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。

①要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件；②需要除掉与目标微生物具有竞争和寄生关系的异种微生物。——培养基——无菌技术实验室培养微生物的条件：1.培养基的概念人们为满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的需要而配制的混合养料。2.培养基的作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。培养基为目标微生物提供适宜的生长环境3.培养基的成分（1）基本成分：水、无机盐、碳源、氮源。碳源无机碳源：CO2、CO32-、HCO3-。有机碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等。自养微生物异养微生物氮源无机氮源：NH4＋、NO3-、NH3等。有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等。注意：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源。如氨基酸等。表1-11000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成组分含量提供的主要营养牛肉膏5g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000ml水（2）特殊需求：①培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；②培养霉菌时，需要将培养基调至中性偏酸；③培养细菌时，需要将培养基调至中性偏碱；④培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。“细菌喜荤，霉菌喜素”特殊营养物质：维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等有机化合物---生长因子（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）还需满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的需求(1)液体培养基：按物理性质划分(2)固体培养基：4.培养基的类型“平板”“斜面”常用于快速繁殖、扩大培养、工业生产。纯化（分离）、鉴定、活菌计数、保藏菌种（1）合成培养基按化学成分划分（2）天然培养基----化学成分完全清楚的培养基。----用天然有机物制成的培养基一般用于在实验室进行的、要求可重复性强的各种研究工作除了在实验室常用外，更多地被用于大规模的生物发酵工业（2）鉴别培养基：①加入青霉素的培养基：分离酵母菌、霉菌等真菌②不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌③不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物①加入伊红美蓝的培养基：鉴别大肠杆菌②加入刚果红的培养基：鉴别纤维素分解菌按功能划分----将某种类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。（1）选择培养基：----用于鉴别不同类型的微生物2024/2/8标准培养基种类培养基特点作用物理性质固体培养基加凝固剂，如琼脂微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种半固体培养基容器放倒不致流出，剧烈震动则破散观察微生物的运动、分类鉴定液体培养基不加凝固剂常用于工业生产功能选择培养基根据某种微生物的特殊营养要求配置选择分离鉴别培养基加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂鉴定成分来源天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基用已知的化学物质配制分类鉴定

小结：培养基的类型及用途获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。灭菌和无菌操作技术可以排除非目标微生物的干扰实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触接种室、接种箱或超净工作台可用紫外线照射30min100℃煮沸5-6min62-65℃下煮30min或80-90℃处理30s-1min1.常用的消毒方法用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源等煮沸消毒巴氏消毒化学药剂消毒紫外线消毒一、消毒与灭菌芽孢

（1）概念：某些细菌在营养缺乏或代谢产物积累的环境中形成没有繁殖功能的休眠构造（休眠体），称为芽孢。

芽孢不进行明显的代谢活动；对加热、紫外线照射和化学药物都具有极强的抵抗能力等恶劣的环境有很强的抵抗力。孢子（2）芽孢的特点注意：芽孢不是孢子2.常用的灭菌方法利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌。高压蒸汽灭菌效果最好，100kPa、121℃下维持15-20min，常用于培养基、无菌水等的灭菌。（1）湿热灭菌学科网原创原理：高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性优点：操作简便，效果可靠，可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成分不被破坏。对象：培养基等注：使用后的培养基必须灭菌后才能丢弃，以免污染环境。高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅

使用高压灭菌锅灭菌时所需的温度、压力和时间是根据要消灭的微生物芽孢等结构的耐热性来确定121℃对实验器具和培养基进行15~20min的灭菌处理是比较安全的160-170℃下加热2-3h。常用于玻璃器皿和金属器具。（2）干热灭菌学科网原创原理：使微生物细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等对象：耐高温，需保持干燥的物品，适用于

玻璃器皿(如试管、培养皿、吸管、注射器)

金属器具(如针头、镊子、剪刀等)的灭菌培养皿试管三角瓶移液管常用于接种环、接种针、试管口等的灭菌。（3）灼烧灭菌学科网原创效果：最彻底原理：使微生物燃烧对象：接种工具如接种环、接种针，以及接种过程中的试管口或瓶口等易被污染部位类型适用范围操作方法消毒灭菌较为温和理化方法，杀死部分微生物（不包括芽孢、孢子）强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法日常生活100℃煮沸5～6min巴氏消毒法不耐高温的液体62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min化学药剂生物活体、水源等擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源紫外线紫外线照射30min灼烧灭菌接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧干热灭菌耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等物品放入干热灭菌箱,160～170℃加热2～3h湿热灭菌培养基、培养皿等,生产和实验室常用高压蒸汽灭菌锅内,100kPa,温度121℃,15～30min小结：消毒与灭菌接种室、接种箱，超净工作台使用前将实验工具放到超净工作台上，打开紫外灯和过滤风，灭菌30min。超净工作台二、无菌操作技术玻璃砂漏斗G6玻璃砂漏斗是孔径最小的

可用已在121℃下高压蒸汽灭菌的、G6玻璃砂漏斗对尿素、葡萄糖等进行过滤除菌。移液枪枪头移液管接种：将目标微生物转移到培养基中的过程涂布器接种环接种前的灭菌：请回答下列问题：1.实验器具用什么方法灭菌？2.培养基用什么方法灭菌？3.双手用什么方法消毒？4.接种环用什么方法灭菌？5.涂布器用什么方法灭菌？6.为保证无杂菌，实验操作都要在哪里进行？7.如何制备无菌水？高压蒸汽灭菌法或G6玻璃砂漏斗过滤法灼烧灭菌法浸泡在75%酒精中，使用前灼烧超净工作台的酒精灯火焰