粮油检验 储粮真菌标准图谱 第2部分：青霉属 征求意见稿

1粮油检验储粮真菌标准图谱第2部分：青霉属1范围本文件界定了储粮真菌标准图谱青霉属检验的术语和定义，规定了检验环境，给出了粮食中常见青霉菌落图和显微形态特征图。本文件适用于稻谷、小麦、玉米及杂粮中的青霉属检验的辅助参考。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。青霉属Penicillium半知菌亚门(Deuteromycotina)、丝抱真菌纲(Hyphomyce分生孢子梗conidiophre青霉属真菌子实体中除分生孢子外的部分。孢梗茎stipeofconidiophore2光源，光照强度宜在(450±100)1x范围内。具体操作步骤按照附录A执行。物镜的数值孔径一致或稍大，使整个观察视野明图像同步齐焦，屏幕显示90%以上显微镜目镜视场的图像。粮食中常见青霉的菌落图和显微形态特征图见图1～图26,菌落形态特征描述和显微特征描述见附3P.citrinum图1橘青霉菌落图图2橘青霉显微特征图5.3橘灰青霉(P.aurantiogriseum)4图3橘灰青霉菌落图图4橘灰青霉显微特征图5.4灰黄青霉(P.griseofulvum)5P.griseofulvum67P.islandicum图9岛青霉菌落图图10岛青霉显微特征图5.7产紫青霉(P.purpurogenum)8图11产紫青霉菌落图P.purpurogenum图12产紫青霉显微特征图9图13扩展青霉菌落图图14扩展青霉显微特征图5.9草酸青霉(P.purpurogenum图15草酸青霉菌落图图16草酸青霉显微特征图5.10绳状青霉(P.funiculosum)图17绳状青霉菌落图图18绳状青霉显微特征图5.11瘿青霉(P.fellutanum)波图19瘿青霉菌落图图20瘿青霉显微特征图5.12变幻青霉(P.variabile)P.variabile图21变幻青霉菌落图图22变幻青霉显微特征图图23娄地青霉菌落图●图24娄地青霉显微特征图5.14光孢青霉(P.glabrum)图25光孢青霉菌落图P.glabrum图26光孢青霉显微特征图6图谱说明6.1菌落图谱中的CA表示培养基采用察氏培养基，12D表示培养时间为12d,25℃表示培养温度为(25±1)℃。察氏培养基的成分和制法见附录C.1。6.2显微特征图谱中的XXX×代表放大倍数，如1000×表示放大1000倍。A.1.1显微镜：放大倍数为1000倍以上，内置光源，强度可调，宜具备数码照相功能，数码照相机的A.1.10解剖针。A.1.11滴瓶。A.1.12三角瓶。A.1.13载玻片。A.1.16镊子。A.3.1.1采用稀释分离法或种植分离法对粮食表面的青霉菌株进行分离并纯化，将纯化后的菌株保存A.3.1.2将分装于三角瓶中的已灭菌的察氏培养基(A.2.2)熔化、并冷却至45℃左右，备用。A.3.1.3将熔化培养基在超净工作台(A.1.6)中以无菌操作倾注于直径9cm的已灭菌的培养皿(A.1.15)中，每个培养皿注入12mL～15mL培养基，凝固后备用。A.3.1.4将接种针(A.1.9)经火焰灼烧灭菌、冷却后，从斜面试管(A.3.1.1)中挑取少量孢子，点植A.3.1.5将接完种的培养皿倒置并放入霉菌培养箱(A.1.4),于25℃下培养12d,用肉眼或借助放大A.3.2.2用接种针(A.1.9)或解剖针(A.1.10)从培养皿(A.3.1.5)或试管(A.3.1.1)的纯化菌落上A.3.2.3用镊子(A.1.16)取盖玻片(A.1.14),从一边轻轻加盖，避免产生气泡，如果有气泡，可在A.3.2.4用显微镜(A.1.1)观察载片标本中子实体、分生孢子梗、帚状枝、孢梗茎、副枝、类副枝、A.4.1将A.3.1.4的观察现象与第5章的菌落形态标准图对照，确定菌的种类。A.4.2将A.3.2.4的观察现象与第5章的显微形态标准图对照，确定菌的种类。B.1橘青霉(P.citrinum)(图1、图2)生，偶有三轮生或单轮生；梗基每轮3~5个，8.0μm~16(~20)μm×2.2μm~3.0μm,同轮B.2橘灰青霉(P:aurantiogriseum)(图3、图4)B.3灰黄青霉(P:griseofiulvum)(图5、图6分生孢子梗发生于基质或在孢梗束和束丝之中，孢梗B.4鲜绿青霉(R:viridicatum)(图7、图8)B.5岛青霉(Pislandicum)(图9、图10)μm~3.2(~3.5)μm,孢梗茎壁平滑或近于平滑；帚状枝双轮生，偶有三轮生和单轮生；副枝若存在通常B.6产紫青霉(P:purpurogμm,壁平滑，顶端通常膨大；帚状枝双轮生，偶有三轮生或单轮生，彼此紧贴而近于平行；梗基每轮B.7扩展青霉(P:expansum)(图13、图14)B.8草酸青霉(Roxalicum)(图15、图16)菌落在CA上25℃培养12d,直径4.0cm~常较紧贴；瓶梗每轮5~8个或更多，10μm~15μm×2.5μm~3.2μm,幼龄时呈现瓶状至披针形，充分成熟B.9绳状青霉(P:funiculosum)(图17、图18)B.10瘿青霉(Rfellutanum)(图19、图20)B.11变幻青霉(P.variabile)(图21、图22)B.12娄地青霉(Proqueforti)(图23、图24)B.13光孢青霉(P.glabrum)(图25、图26)落质地通常绒状，偶有分离物在中部面上兼有轻微絮状；分生孢子(资料性)培养基和试剂C.1察氏培养基C.1.1成分察氏培养基的成分如下：——硝酸钠3.0g;——磷酸氢二钾1.0g; 七水合硫酸镁0.5g;——氯化钾0.5g: ——蔗糖30.0g——琼脂15.0g:——蒸馏水1000mL。量取600mL蒸馏水，分别按量称取蔗糖、硝酸钠、磷酸氢二钾、七水合硫酸镁、氯化钾