DB22-T 3531-2023 人参组培不定根快速扩繁技术规程

65.020.20CCS

B

3622 DB22/T

3531—2023人参组培不定根快速扩繁技术规程Technical

of

practice

of

ginseng

adventitious

吉林省市场监督管理厅 发

布DB22/T

3531—2023 本文件按照GB/T

—《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：吉林省农业科学院（中国农业科技东北创新中心）。博、兰西、李艳君。DB22/T

3531—20231 范围本文件确立了人参组培不定根快速扩繁的程序，规定了不定根诱导、生物反应器培养组培不定根、收获及保存等阶段的操作指示，描述了记录与档案等追溯方法。本文件适用于人参组培不定根的快速扩繁。2 规范性引用文件文件。NY/T

2306—2013 花卉种苗组培快繁技术规程3 术语和定义NY/T

2306

界定的术语和定义适用于本文件。组培不定根

adventitious

root利用植物组织、器官或细胞等作为起始材料，通过植物组织培养方式生产获得的根状物。[来源：NY/T

2306—2013，3.12，有修改]固体培养

solid

culture通过添加植物凝胶使配置好的营养液形成固体状态供植物生长的过程。继代

对来自于外植体所增殖的培养物(包括细胞、组织或器官)通过更换新鲜培养基及不断切割或分离，进行连续多代的培养。[来源：NY/T

2306—2013，3.2，有修改]植物生物反应器

plant

活的工厂生产特定化学物质的生物反应器。4 缩略语下列缩略语适用于本文件。2,4-D:

2,4-Dichlorophenoxyacetic

acid）IBA:

吲哚丁酸（Indole-3-butyric

acid）DB22/T

3531—2023FeNa-EDTA:

乙二胺四乙酸铁钠盐

[EDTA

iron(Ⅲ)

sodium

salt]MS:

Murashige

and

Skoog,19625 程序人参组培不定根快速扩繁技术规程包含

3

个阶段，程序流程图见图

1。图1 人参组培不定根快速扩繁程序6 不定根诱导材料及处理6.1.1 以健康人参主根为外植体，用自来水冲洗

20

，洗净后在超净工作台中切成

1

cm～2

cm

方块，用

70%

乙醇处理

30

s，再用次氯酸钠水溶液（有效氯为

）浸泡

40

（每隔

10

用无菌水清洗

1

次）进行表面消毒。6.1.2 表面消毒后的根用无菌水清洗

3

（

cm×0.5

cm

×0.4

cm（0.7

cm×0.7

cm×0.4

）（长×宽×高）的块。愈伤组织诱导及继代6.2.1 培养基配方：MS

+

2,4-D

1.0

mg/L

+

30

g/L

+

植物凝胶

2.3

g/L，pH

5.7～。6.2.2 培养条件：22

℃±1

℃

暗培养。6.2.3 6.1.2（6.2.1）的培养皿中诱导愈伤组织

6

8

周后，将诱导的愈伤组织接种到培养基中进行继代培养，每

2

周～3

周继代一次，筛选高产愈伤组织。组培不定根诱导及继代6.3.1 组培不定根诱导6.3.1.1 培养基配方：MS

+

IBA

3

mg/L～5

mg/L

+

+

植物凝胶

g/L，

5.7～5.8。6.3.1.2 培养条件：22

℃±1

℃

暗培养。6.3.1.3 接种：将愈伤组织接入含有培养基（6.3.1.1）的培养皿中培养

6

周，诱导不定根。6.3.2.1

MS

4

：NO6.3.2.1

MS

4

：NO3

=7.5（）:37.5（mMCuSO4•5H2O

0.05

；FeNa-EDTA6.3.2 组培不定根继代+ -0.0373

g/L；肌醇

5

mg/L

+

蔗糖

g/L

+

植物凝胶

，pH

5.7～5.8。6.3.2.2 培养条件：22

℃±1

℃

暗培养。6.3.2.3 接种：诱导的不定根在接入含有培养基（6.3.2.1）的培养皿中培养，每

4

5

周继代一次，培养

4

6

代后获得高产组培不定根材料。7 生物反应器培养组培不定根组培不定根增殖培养基6.3.2.1

中的培养基去掉植物凝胶。培养条件接种量

5

～7

g/L3

L～20

L）的

～80%

vvm～

，22

℃±1

℃

暗培养

7

vvm

继代培养将

6.3.2.3

中高产组培不定根材料接入气升式生物反应器内进行增殖培养，7

周后的增殖材料切成

1

的不定根，按

的培