替米考星的抗菌活性及药动学

替米考星的抗菌活性及药动学

由泰乐菌素合成的大型环内酯类动物的特殊抗生素。80年代由英国Elanco动物保健品公司首先开发成功，替米考星抗菌谱广，具有很强的抗菌活性，与其他大环内酯类药物相似。该药在国外已用于猪、牛、山羊、兔、肉鸡、火鸡等动物因敏感菌引起的感染性疾病，具有良好的治疗效果，特别是呼吸道感染。在国内也已有进口注册产品用于临床，亦有药厂进行替米考星的合成与产品的申报。2005年初，农业部批准山东济兴医化有限公司济宁兽药厂申报的替米考星原料、替米考星预混剂、替米考星注射液为三类新兽药。为了解替米考星及其应用进展，现将有关抗菌活性、药动学、药效学及药物残留等方面的研究分别概述如下。1最小抑菌浓度替米考星的抗菌活性与泰乐菌素相似，对细菌包括革兰氏阳性菌以及部分革兰氏阴性菌、支原体、螺旋体均有很强的抑制作用，特别对猪的胸膜肺炎放线杆菌、畜禽巴氏杆菌及支原体具有更强的抗菌活性。替米考星对奶牛乳房炎的各类致病菌和鸡败血性支原体均表现出比泰乐菌素更强的体外抗菌活性。Kadlec等曾对猪支气管败血性博德特氏菌的抗菌敏感性进行了测定，在这个实验中，从349只患呼吸道感染的猪中提取支气管败血性博德特氏菌后，用肉汤微稀释法测定最小抑菌浓度。结果表明：分离检测的MIC90最低的是四环素和恩氟沙星；而MIC90最高的是替米考星和头孢噻吩以及链霉素。Oroni等曾对意大利两个山羊牧场中156头哺乳期内乳房感染进行了跟踪检测，发现大多数的致病菌为凝固酶阴性葡萄球菌。第1组的特异病原体是山羊葡萄球菌（SCAP）；第2组的特异病原体是表皮葡萄球菌（SEPI）。结果表明替米考星500μg/ml和四环素62.5μg/ml对山羊葡萄球菌和表皮葡萄球菌有效。Lnamoto等曾分析替米考星（TMS）、金霉素（GC）、甲砜霉素（TP）、泰乐菌素（TS）对日本1985～1989年猪肺炎损害部位分离出的巴氏杆菌和胸膜肺炎放线杆菌的抗菌作用。初步判断，大多数菌株对TMS、CTC、TP敏感。之后进行MIC的测定，结果表明TS对两种细菌的抗菌活性均不及替米考星。兰州兽药研究所曾用磷酸替米考星对畜禽常见的18种病原菌抑菌效果进行测定，结果表明该药优于先锋霉素V，尤其是对李氏杆菌、禽巴氏杆菌、猪丹毒杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、支气管炎博德特氏菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、鸡败血支原体等菌株高度敏感。替米考星对奶牛乳房炎常见的8种病原菌均有一定的抑菌作用，尤其是对G+菌具有很强的抑菌效果，总体抑菌效果优于先锋霉素V。2替米考星的药代动力学替米考星在家畜体内的主要药动学特征表现在内服和皮下注射给药吸收快，血中药物半衰期长，药物组织穿透力强，体内分布容积大等。尤其在肺和乳房等结缔组织中显示出较高的药物浓度，同时在乳中也具有较高的药物浓度，并且维持时间较长，半衰期可达1～2d，奶牛在使用1h后可达到血药峰浓度，3d后其乳汁中的浓度仍具有有效的抗菌活性。这些特殊的药动学特性尤其适合于对家畜肺炎、乳房炎等感染性疾病的治疗。替米考星在动物体内至少产生4种代谢物，其中一种有抗菌活性；在家禽体内还产生另外两种代谢物，一种代谢物活性为替米考星的4倍，另一种活性与替米考星相近，可见在家禽体内替米考星代谢后抗菌活性显著增强。Shen等曾进行了口服替米考星在猪体内的药动学试验。将10只健康猪平均分成2组，分别以20mg/kg和40mg/kg体重单剂量替米考星经胃管给药，在服药前和服药后10min、20min、30min、1h、2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h、36h、48h、72h、96h、120h从颈静脉提取血样，利用高性能的紫外线灯液相色谱法来检测血清中替米考星的药物浓度，血药浓度/时间的关系利用房室法和无房室法进行分析。血清中的药浓度以biexponentialmanner降低，在服用20mg/kg和40mg/kg替米考星后，用平均值±标准偏差来表示测量结果，吸收的半衰期是1.49±0.23h,1.64±0.40h；分布的半衰期是2.96±0.58h、3.20±0.76h；消除的半衰期是25.26±8.25h、20.69±5.07h；最大血药浓度是1.19±0.30μg/ml、2.03±0.28μg/ml；最大浓度时间3.12±0.50h、3.48±0.77h。测定的实验数据表明，在猪口服替米考星后，替米考星能被迅速的吸收和缓慢的排出。兰州兽药研究所曾对替米考星在绵羊体内的药代动力学进行了研究，随机选5只健康小尾寒羊，采取静脉和皮下注射两种途径以替米考星10mg/kg体重剂量给药，进行体内药代动力学研究。动物给药后在96h内分点采血，血浆样品处理采用甲醇沉淀，离心去蛋白，样品测定采用苯基柱，以反向HPLC测定绵羊血清中的替米考星浓度。结果表明，绵羊静注和皮下注射替米考星的药时数据均符合二室开放模型，替米考星皮下注射和静脉给药在羊体内具有吸收和分布较迅速、消除缓慢、体内分布容积大及生物利用度高的特点。替米考星在动物体内的分布存在组织特异性。在大鼠体内的药代动力学研究表明，替米考星在胸膜肺炎感染大鼠和未感染的大鼠中，肺和血清药物浓度显著不同，肺药物浓度总是很高，未感染组中，肺：血浓度比为86∶1，感染组为178∶1，替米考星在奶牛乳腺和肺中的分布也具有同样特性，这种对特定组织的亲和性决定了动物给药后血药浓度只能间接反映体内药物的抗菌活性。其次，此前的研究结果还表明，替米考星具有很强的抗生素后效应，在血药浓度和组织液中的药物浓度十分低的情况下，在特定细胞中仍具有较高浓度的药物积聚[15.16]。3替米考星治疗人工感染的临床效果替米考星由于特殊的抗菌活性和药动学特征，已广泛的应用于畜禽感染性疾病，特别是呼吸道疾病和泌乳动物乳房炎的预防和治疗。FittipaldiN等进行了替米考星磷酸盐对猪放线杆菌胸膜肺炎（APP）的药效学试验，试验目的是观察服药后能否消灭或减少扁桃体内APP的数量。这个试验利用了PCR技术来检测扁桃体内胸膜肺炎放线杆菌的数量。结果表明：在试验中，内服4×10-4浓度替米考星磷酸盐后主要使扁桃体表面的胸膜肺炎放线杆菌的数量减少，但不能彻底的消灭扁桃体深层组织的胸膜肺炎放线杆菌的数量和阻止细菌脱落。兰州兽药研究所曾对国产替米考星饮水剂的药效进行研究。选用健康鸡180只，随机分为6组，1～5组鸡用1个最小致死量C48-2菌液，经胸肌注射接种0.6ml，接种后2h,1～4组鸡开始饮用加药水连续给药5d，所有试验继续观察至接种后第15d。1～3组分别给替米考星饮水剂100mg/L,200mg/L,300mg/L，第4组给泰乐菌素饮水剂500mg/L，第5组只接种但不给药，第6组不接种也不给药。结果表明该药对人工感染引起的鸡巴氏杆菌病有良好的治疗作用，可降低死亡率，提高存活率，减少人工感染引起的病理损伤。采用连续饮水给药建议使用剂量为200mg/L，连续使用3～5d。替米考星高、中剂量治疗组与泰乐菌素治疗组对鸡均具有明显的增重效果，但二者增重效果差异效果不显著。替米考星与泰乐菌素相比具有用量少、抗感染效果显著的优点。兰州兽药研究所也曾对国产替米考星注射液对人工感染的巴氏杆菌的治疗效果，用断奶乳猪进行试验，结果表明替米考星治疗急性猪肺疫效果确实，尤其是高、中剂量比较明显，推荐剂量是10mg/kg体重。扬州大学曾对替米考星对鸡败血霉形体感染的药效学进行研究。通过试管二倍稀释法测定。结果表明替米考星对试验性感染鸡败血霉形体有显著疗效，用药组增重高于对照组，并能显著减少抗体阳性反应率，极显著地减少气囊损伤。Nerland进行了口服替米考星治疗人工感染放线杆菌胸膜肺炎仔猪的药效学试验。选择40只3周龄的不含有特异病原体的仔猪，随机分为4组，每组10只。第1组是经过假处理的未感染胸膜肺炎放线杆菌的猪；第2组接种10CFU胸膜肺炎放线杆菌；第3组是接种胸膜肺炎放线杆菌前的7d内内服4×10-4浓度替米考星；第4组是接种胸膜肺炎放线杆菌前的7d内内服11×10-4浓度金霉素。在接种后的3h和24h后对仔猪支气管肺泡灌洗液和肺组织样品进行测量。在每个时间点，每组研究4～6只猪。结果如下：口服替米考星和金霉素降低了受染猪的肺内细菌接种量。与未经处理和用金霉素处理的猪相比，经替米考星处理的猪支气管肺泡灌洗液内的粒性白细胞的吞噬作用增强，但同时也使其中的白细胞三烯B4的含量降低，肺组织的损害程度轻。替米考星抑制了感染诱导，提高了直肠温度。但支气管肺泡灌洗液内的嗜中性白细胞和前列腺素E2的含量在各组中无太大差异。4替米考星药残检测Wang等曾对替米考星在鸡蛋中药物残留进行了测定，他们采用的方法是液相色谱仪/电喷射离子化串联质谱法（LC/ESI-MS/MS）。在MS/MS下，通过应用2个或者3个碎片离子跃迁的MRM点样来获取数据，从而对定量和定性提供了高度的敏感性和特异性。采用矩阵配对的标准校准曲